| 摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 主要符号表 | 第16-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-31页 |
| 1 果实香气的生物合成与生物代谢途径 | 第17-23页 |
| 1.1 梨果实的香气特征及研究现状 | 第17-18页 |
| 1.2 香气物质的种类 | 第18-19页 |
| 1.2.1 酯类物质 | 第18页 |
| 1.2.2 醇、醛、酮类物质 | 第18页 |
| 1.2.3 萜类物质 | 第18-19页 |
| 1.3 香气物质生物合成的关键酶 | 第19-20页 |
| 1.3.1 脂氧合酶 | 第19页 |
| 1.3.2 醇脱氢酶 | 第19页 |
| 1.3.3 萜类合成酶 | 第19-20页 |
| 1.3.4 醇酰基转移酶 | 第20页 |
| 1.3.5 脂氢过氧化物裂解酶 | 第20页 |
| 1.4 不同物质的生物合成路径 | 第20-21页 |
| 1.4.1 氨基酸为前体的生物合成 | 第21页 |
| 1.4.2 脂肪酸为前体的生物合成 | 第21页 |
| 1.5 挥发性成分的提取和鉴定 | 第21-22页 |
| 1.5.1 顶空固相微萃取法 | 第21-22页 |
| 1.5.2 顶空进样法 | 第22页 |
| 1.5.3 溶剂萃取法 | 第22页 |
| 1.5.4 蒸馏提取法 | 第22页 |
| 1.6 挥发性物质的分离与鉴定 | 第22-23页 |
| 1.6.1 挥发性物质的分离 | 第22-23页 |
| 1.6.2 挥发性物质的定性与定量 | 第23页 |
| 2 果实糖代谢与糖转运体 | 第23-31页 |
| 2.1 果实中糖积累方式与变化规律 | 第23-24页 |
| 2.1.1 液泡对糖的贮藏 | 第23页 |
| 2.1.2 果实不同发育阶段糖的变化规律 | 第23-24页 |
| 2.2 果实中重要糖的代谢和运输 | 第24-25页 |
| 2.2.1 蔗糖的代谢与转运 | 第24页 |
| 2.2.2 山梨醇的代谢与转运 | 第24-25页 |
| 2.3 糖诱导的关键酶与代谢调控 | 第25-26页 |
| 2.3.1 果糖激酶 | 第25页 |
| 2.3.2 己糖激酶 | 第25页 |
| 2.3.3 蔗糖酶 | 第25页 |
| 2.3.4 蔗糖合成酶 | 第25-26页 |
| 2.3.5 蔗糖磷酸合成酶 | 第26页 |
| 2.4 糖是果实代谢的信号分子 | 第26-27页 |
| 2.4.1 糖信号调节系统与调节功能 | 第26页 |
| 2.4.2 糖的转运与植物激素 | 第26-27页 |
| 2.5 糖代谢途径及糖转运体 | 第27-31页 |
| 2.5.1 草莓果实糖的运输与代谢 | 第27-28页 |
| 2.5.2 糖转运体及其家族基因 | 第28页 |
| 2.5.3 糖转运体对糖的转运方式 | 第28-29页 |
| 2.5.4 糖转运体定位及其功能研究 | 第29页 |
| 2.5.5 糖转运体亚细胞定位 | 第29-31页 |
| 技术路线 | 第31-32页 |
| 第二章 果实不同部位香气物质分布特征及其代谢谱 | 第32-63页 |
| 引言 | 第32页 |
| 1 材料和方法 | 第32-36页 |
| 1.1 材料 | 第32-33页 |
| 1.2 方法 | 第33页 |
| 1.3 果实成熟期判别 | 第33-34页 |
| 1.4 样品制备 | 第34页 |
| 1.5 香气物质的萃取与顶空进样 | 第34-35页 |
| 1.6 气相色谱和质谱分析的条件 | 第35页 |
| 1.7 定量分析与标品验证 | 第35页 |
| 1.8 统计分析 | 第35-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-56页 |
| 2.1 四种梨全果中挥发性物质分析 | 第36-41页 |
| 2.1.1 四种梨全果中挥发性物质的测定谱图 | 第36-38页 |
| 2.1.2 四种梨全果中挥发性物质的组分和含量比较 | 第38-40页 |
| 2.1.3 四种梨全果中不同类别挥发性物质的含量比较 | 第40-41页 |
| 2.2 四种梨果肉、果皮及果核中挥发性物质分析 | 第41-46页 |
| 2.2.1 四种梨果肉、果皮及果核中挥发性物质的组分和含量比较 | 第41-43页 |
| 2.2.2 四种梨“果肉、果皮及果核”中不同类别挥发性物质比较 | 第43-46页 |
| 2.3 四种梨挥发性物质的香气活性（OAV）及其主要香气性状 | 第46-49页 |
| 2.4 四种梨全果和果肉中挥发性物质OPLS分析 | 第49-52页 |
| 2.5 四种梨全果及果皮、果肉和果核中挥发性物质的代谢途径与代谢谱 | 第52-54页 |
| 2.5.1 四种梨全果中主要挥发性物质的代谢途径与代谢谱 | 第52-53页 |
| 2.5.2 四种梨果皮、果肉和果核中主要挥发性物质的代谢途径与代谢谱 | 第53-54页 |
| 2.6 基于四种梨挥发性香气物质的亲缘关系分析 | 第54-56页 |
| 3 讨论 | 第56-63页 |
| 3.1 香面梨和木头酥主要挥发性物质的生物合成途径 | 第56-57页 |
| 3.2 香面梨和木头酥全果中存在较多的酯类物质 | 第57页 |
| 3.3 香面梨和木头酥果肉中的萜类香气物质 | 第57-58页 |
| 3.4 香面梨、木头酥与砀山酥梨和南果梨挥发性物质的差异 | 第58-59页 |
| 3.5 全果中挥发性物质的来源 | 第59页 |
| 3.6 香气活性值（OAV）决定果实挥发性物质的香气 | 第59-60页 |
| 3.7 影响梨果实香气的主要因素 | 第60-61页 |
| 3.8 香面梨和木头酥可能的遗传背景分析 | 第61-63页 |
| 第三章 果实重要糖转运体基因发掘与筛选、基因克隆与功能验证 | 第63-94页 |
| 引言 | 第63-64页 |
| 1 材料与方法 | 第64-68页 |
| 1.1 材料 | 第64-65页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第64页 |
| 1.1.2 试剂材料 | 第64-65页 |
| 1.2 方法 | 第65-68页 |
| 1.2.1 基因组水平草莓疑似果糖转运体的挖掘 | 第65页 |
| 1.2.2 糖转运体蛋白进化树与跨膜结构分析 | 第65页 |
| 1.2.3 引物设计与合成 | 第65页 |
| 1.2.4 RNA提取 | 第65-66页 |
| 1.2.5 反转录反应 | 第66页 |
| 1.2.6 定量PCR与测序 | 第66-67页 |
| 1.2.7 gene31477的克隆 | 第67页 |
| 1.2.8 切胶回收与纯化 | 第67页 |
| 1.2.9 35S::31477 表达载体质粒构建 | 第67-68页 |
| 1.2.10 35S::31477 转化农杆菌GV3101 | 第68页 |
| 2 结果与分析 | 第68-88页 |
| 2.1 果实重要糖转运体基因挖掘与筛选 | 第68-75页 |
| 2.1.1 疑似果糖转运体基因查找和进化树分析 | 第68-69页 |
| 2.1.2 定量PCR引物设计 | 第69-70页 |
| 2.1.3 草莓不同发育阶段的果实、花和叶的样品 | 第70-71页 |
| 2.1.4 草莓不同发育阶段的果实、花和叶样品的定量分析 | 第71-73页 |
| 2.1.5 重要的基因相关功能研究报道 | 第73-74页 |
| 2.1.6 重要疑似糖转运体基因跨膜结构分析 | 第74-75页 |
| 2.1.7 果糖含量与糖转运相关性分析 | 第75页 |
| 2.2 基因克隆与载体构建 | 第75-81页 |
| 2.2.1 g-31477 基因功能分析 | 第75页 |
| 2.2.2 g-31477 基因克隆引物设计 | 第75-76页 |
| 2.2.3 目的基因的切胶回收与纯化 | 第76页 |
| 2.2.4 克隆载体的连接、转化与验证 | 第76-80页 |
| 2.2.5 双元表达载体质粒构建及其农杆菌转化 | 第80-81页 |
| 2.3 基因功能验证 | 第81-88页 |
| 2.3.1 瞬时侵染的方式验证基因功能 | 第81-84页 |
| 2.3.1.1 浸染最佳时期的判定 | 第81-82页 |
| 2.3.1.2 瞬时侵染前后果实表观变化 | 第82-83页 |
| 2.3.1.3 果实瞬时表达 | 第83页 |
| 2.3.1.4 基因功能分析 | 第83-84页 |
| 2.3.2 酵母表达方式检测基因功能 | 第84-86页 |
| 2.3.2.1 酵母菌验证 | 第84-85页 |
| 2.3.2.2 酵母表达载体构建 | 第85页 |
| 2.3.2.3 在酵母中验证基因功能 | 第85-86页 |
| 2.3.3.遗传转化的方式验证基因功能 | 第86-88页 |
| 2.3.3.1 草莓无菌苗扩繁 | 第86页 |
| 2.3.3.2 基于外植体高成活率的激素条件筛选 | 第86-87页 |
| 2.3.3.3 农杆菌GV3101侵染外植体 | 第87-88页 |
| 3 讨论 | 第88-94页 |
| 3.1 不同的糖转运体在不同器官的转运 | 第88-89页 |
| 3.2 糖转运体在维管束的运输与表达 | 第89页 |
| 3.3 酵母菌单糖转运体的转运与表达 | 第89-90页 |
| 3.4 糖转运体有待进一步明确的问题 | 第90页 |
| 3.5 糖作为植物生长的信号物质和遗传物质 | 第90-91页 |
| 3.6 其他影响草莓遗传转化效率的因素 | 第91-94页 |
| 结论 | 第94-96页 |
| 参考文献 | 第96-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 作者简介及成果清单 | 第111页 |
