| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 前言 | 第11-17页 |
| 1.1 断乳仔猪消化道生理特点 | 第11-12页 |
| 1.1.1 胃酸分泌不足,消化酶活性较低 | 第11页 |
| 1.1.2 肠绒膜形态发生变化,吸收能力下降 | 第11页 |
| 1.1.3 胃肠道微生物区系紊乱,容易发生腹泻 | 第11-12页 |
| 1.2 仔猪腹泻发病机理和现状 | 第12页 |
| 1.3 防治断乳仔猪腹泻的方法 | 第12-13页 |
| 1.4 常见乳酸菌的分类 | 第13页 |
| 1.5 乳酸菌发酵产生有机酸 | 第13-15页 |
| 1.5.1 有机酸种类及抑菌作用 | 第13-14页 |
| 1.5.2 有机酸抑菌作用机理 | 第14-15页 |
| 1.6 乳酸菌在防治仔猪腹泻方面的应用 | 第15-16页 |
| 1.7 乳酸菌制剂存在的问题 | 第16-17页 |
| 1.7.1 产品的安全性、有效性 | 第16页 |
| 1.7.2 产品单一,缺乏针对性 | 第16页 |
| 1.7.3 产品不能与抗生素联用 | 第16页 |
| 1.7.4 生产加工保存稳定性 | 第16-17页 |
| 1.8 本研究的目的及意义 | 第17页 |
| 2 试验材料 | 第17-18页 |
| 2.1 试验样品、指示菌株及试验动物 | 第17页 |
| 2.2 主要试剂及药品 | 第17-18页 |
| 2.3 试验仪器 | 第18页 |
| 3 试验方法 | 第18-26页 |
| 3.1 乳酸菌的分离鉴定及优良乳酸菌菌株的筛选 | 第18-20页 |
| 3.1.1 乳酸菌的分离 | 第18-19页 |
| 3.1.2 乳酸菌的初步鉴定 | 第19页 |
| 3.1.3 16S rDNA序列分析 | 第19-20页 |
| 3.1.4 优良乳酸菌菌株的筛选 | 第20页 |
| 3.2 乳酸菌抑制大肠杆菌生长繁殖的研究 | 第20-23页 |
| 3.2.1 菌株的活化及培养 | 第20-21页 |
| 3.2.2 自制培养基的筛选 | 第21-22页 |
| 3.2.3 乳酸菌对产肠毒素大肠杆菌生长繁殖的抑制 | 第22页 |
| 3.2.4 乳酸菌发酵上清液对大肠杆菌生长繁殖的抑制 | 第22-23页 |
| 3.3 气相色谱-质谱联用分析发酵上清液中主要有机酸含量 | 第23-24页 |
| 3.3.1 标准液和发酵上清液的预处理 | 第23页 |
| 3.3.2 色谱条件 | 第23页 |
| 3.3.3 质谱条件 | 第23页 |
| 3.3.4 标准曲线的制备 | 第23页 |
| 3.3.5 发酵上清液分析 | 第23-24页 |
| 3.4 乳酸菌制剂应用效果的研究 | 第24-26页 |
| 3.4.1 乳酸菌制剂制备和保存期试验 | 第24页 |
| 3.4.2 乳酸菌预防和治疗哺乳仔猪腹泻、改善肠道菌群及促生长试验 | 第24-25页 |
| 3.4.3 乳酸菌预防断乳仔猪腹泻及促生长试验 | 第25-26页 |
| 4 试验结果 | 第26-48页 |
| 4.1 乳酸菌的分离鉴定及优良乳酸菌菌株的筛选 | 第26-32页 |
| 4.1.1 分离细菌的形态、染色及菌落形态 | 第26-27页 |
| 4.1.2 生理生化特性观察 | 第27-28页 |
| 4.1.3 16S rRNA鉴定 | 第28-29页 |
| 4.1.4 耐酸试验 | 第29-30页 |
| 4.1.5 耐胆盐试验 | 第30-31页 |
| 4.1.6 耐胰酶试验 | 第31-32页 |
| 4.1.7 分离菌产酸试验 | 第32页 |
| 4.2 乳酸菌体外抑制产肠毒素大肠杆菌生长试验 | 第32-39页 |
| 4.2.1 自制培养基的筛选 | 第32-35页 |
| 4.2.2 乳酸菌与大肠杆菌混合培养 | 第35-39页 |
| 4.2.3 乳酸菌发酵上清液抑制大肠杆菌生长试验 | 第39页 |
| 4.3 气相色谱-质谱联用分析发酵上清液中乳酸和苯乳酸含量 | 第39-46页 |
| 4.3.1 标准品气相色谱分析结果 | 第39-40页 |
| 4.3.2 乳酸和苯乳酸标准曲线 | 第40-41页 |
| 4.3.3 乳酸菌发酵上清液中主要有机酸含量测定 | 第41-46页 |
| 4.4 乳酸菌制剂保存期试验 | 第46页 |
| 4.5 乳酸菌制剂应用效果 | 第46-48页 |
| 4.5.1 乳酸菌制剂预防和治疗哺乳仔猪细菌性腹泻、改道菌群及促生长效果 | 第46-47页 |
| 4.5.2 乳酸菌预防断乳仔猪腹泻及促生长效果 | 第47-48页 |
| 5 分析讨论 | 第48-54页 |
| 5.1 乳酸菌的分离鉴定及优良乳酸菌菌株的筛选 | 第48-50页 |
| 5.1.1 乳酸菌的分离鉴定 | 第48页 |
| 5.1.2 优良乳酸菌菌株的筛选 | 第48-50页 |
| 5.2 乳酸菌对产肠毒素大肠杆菌生长繁殖的抑制 | 第50-51页 |
| 5.2.1 混合培养中乳酸菌对产肠毒素大肠杆菌的抑制 | 第50-51页 |
| 5.2.2 乳酸菌发酵上清液对产肠毒素大肠杆菌的抑制作用 | 第51页 |
| 5.3 乳酸菌抑菌物质的检测 | 第51-52页 |
| 5.4 乳酸菌制剂生产应用效果评价 | 第52-54页 |
| 5.4.1 乳酸菌制剂的保存 | 第52页 |
| 5.4.2 乳酸菌预防和治疗哺乳仔猪细菌性腹泻、改善肠道菌群及促生长效果 | 第52-53页 |
| 5.4.3 乳酸菌制剂预防断乳仔猪细菌性腹泻及促生长效果 | 第53-54页 |
| 6 结论 | 第54页 |
| 7 创新性 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 附录 | 第64-76页 |
