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一株快速生长分枝杆菌新种的鉴定及其胞壁脂聚糖功能研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
1. 绪论第11-17页
    1.1 结核病现状第11页
    1.2 分枝杆菌的菌种鉴定第11-12页
    1.3 结核分枝杆菌免疫能力第12-17页
        1.3.1 巨噬细胞第13-14页
        1.3.2 树突状细胞第14-15页
        1.3.3 结核分枝杆菌抗原第15-17页
2.菌种鉴定第17-32页
    2.1 前言第17-18页
    2.2 实验方法第18-25页
        2.2.1 菌株来源第18页
        2.2.2 DNA制备第18-19页
        2.2.3 PCR扩增第19页
        2.2.4 测序结果分析第19页
        2.2.5 分枝杆菌药物敏感性研究第19-20页
        2.2.6 分枝杆菌生长特征及生化反应试验第20-25页
        2.2.7 菌株WH798的抗酸染色实验第25页
    2.3 实验结果第25-31页
        2.3.0 16S rRNA测序结果第25-26页
        2.3.1 选取 16S rRNA序列信息第26-27页
        2.3.2 抗酸染色第27页
        2.3.3 同源性分析第27-29页
        2.3.4 WH798菌株的药物敏感性试验结果第29-30页
        2.3.5 分枝杆菌菌种鉴定的结果第30-31页
    2.4 讨论第31-32页
3.脂聚糖的提取及纯化第32-43页
    3.1 前言第32-33页
    3.2 相关实验试剂及仪器第33-35页
        3.2.1 主要试剂第33-34页
        3.2.2 主要仪器第34页
        3.2.3 主要试剂的配制第34-35页
    3.3 实验方法第35-37页
        3.3.1 菌体培养第35页
        3.3.2 脂聚糖提取及纯化第35页
        3.3.3 粗提物的SDS-PAGE凝胶电泳第35-36页
        3.3.4 硝酸银染显色(PAS染色)第36-37页
    3.4 纯化后脂聚糖纯度及含量的测定第37-39页
        3.4.1 根据课题组苯酚-硫酸法测定脂聚糖溶液中脂聚糖的浓度第37-38页
        3.4.2 BCA试剂盒法测定脂聚糖中蛋白质的含量第38页
        3.4.3 检测脂聚糖样品中核酸的含量第38-39页
    3.5 实验结果第39-40页
        3.5.1 脂聚糖的SDS-PAGE电泳及染色第39页
        3.5.2 SDS-PAGE电泳及银染结果第39-40页
    3.6 讨论第40-43页
4.不同凝集素对脂聚糖结构差异的分析第43-47页
    4.1 前言第43页
    4.2 实验方法第43-44页
        4.2.1 相关试剂配制第43-44页
        4.2.2 实验方法第44页
    4.3 实验结果第44-45页
    4.4 讨论第45-47页
5.LAM类似物对树突状细胞的免疫原性研究第47-58页
    5.1 前言第47-48页
    5.2 实验试剂及仪器第48-49页
        5.2.1 主要试剂第48-49页
        5.2.2 主要仪器第49页
    5.3 实验方法第49-51页
        5.3.1 C57/bl小鼠骨髓细胞提取及DC诱导第49-50页
        5.3.2 免疫磁珠分离纯化诱导得到的DC第50页
        5.3.3 流式细胞术检测DC纯度第50-51页
        5.3.4 LAM类似物及菌体对DC刺激试验第51页
    5.4 实验结果第51-56页
        5.4.1 不同LAM刺激树突状细胞后CD80和CD86的表达第51-52页
        5.4.2 ELISA不同菌株LAM刺激DC后细胞培养上清中细胞因子分泌情况第52-54页
        5.4.3 Real-time PCR检测经三种LAM分别刺激 6h、24h后DC表面MR、Dectin-2和DC-SIGN受体的表达量变化情况第54-56页
    5.5 讨论第56-58页
6.结论与展望第58-59页
7.参考文献第59-70页
致谢第70-71页
攻读学位期间的研究成果第71页

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