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拮抗菌和青枯菌无致病力突变株防控茄科作物青枯病的效应和机理研究

摘要第1-15页
ABSTRACT第15-19页
第一章 文献综述第19-35页
 1 青枯病概述第19-26页
   ·青枯病的危害第19页
   ·青枯菌的生物学特性第19-20页
   ·青枯菌的致病过程第20页
   ·青枯菌的致病因子第20-25页
     ·胞外多糖第20-21页
     ·胞外蛋白第21-23页
     ·Ⅲ型分泌系统第23-25页
   ·青枯菌致病因子的调控第25-26页
 2 细菌性青枯病的防治第26-28页
   ·防治方法概述第26页
   ·生物防治第26-28页
 3 生防机理的研究第28-31页
   ·生防菌定殖的研究进展第28页
   ·植物系统抗性的研究第28-31页
     ·植物系统抗性相关的信号物质的研究第28-30页
     ·植物系统抗性相关基因的研究第30-31页
 4 无致病力青枯菌防治青枯病的研究第31-32页
 5 本研究的目的和意义第32-33页
 6 技术路线第33-35页
第二章 解淀粉芽孢杆菌S20防控茄青枯病的研究第35-45页
 1 材料与方法第35-38页
   ·供试材料第35-36页
     ·试剂第35页
     ·培养基第35页
     ·菌株、质粒和引物第35-36页
     ·仪器与设备第36页
   ·试验方法第36-38页
     ·B.amyloliquefaciens S20防控茄青枯病的盆栽试验第36页
     ·病情指数的监测第36-37页
     ·植株根际病原菌和生防菌数量的测定第37页
     ·植株生长情况的测定第37页
     ·抑菌物质的检测与分析第37-38页
   ·分析和统计第38页
 2. 结果与分析第38-42页
   ·B.amyloliquefaciens S20对茄青枯病的防控效果第38页
   ·不同处理对茄子植株根际土中病原菌和生防菌数量的影响第38-40页
   ·不同处理对茄子植株生长的影响第40-41页
   ·B.amyloliquefaciens S20抑菌物质的高效液相色谱检测和质谱分析第41-42页
 3. 讨论第42页
 4. 本章小结第42-45页
第三章 R.solanacearum ZJ3721 phcA~-突变株和hrp~-突变株的构建及其特性的研究第45-67页
 1 材料与方法第45-53页
   ·供试材料第45-48页
     ·试剂第45页
     ·培养基第45-46页
     ·菌株、质粒和引物第46-48页
   ·试验方法第48-53页
     ·菌株R.solanacearum ZJ3721基因组DNA的提取第48页
     ·细菌RNA的提取及反转录第48页
     ·质粒DNA的提取第48页
     ·酶切、酶连、回收及转化第48页
     ·引物的设计、合成及DNA序列的测序第48页
     ·phcA突变株的构建第48-51页
     ·hrp~-突变株的构建第51页
     ·R.solanacearum ZJ3721突变菌株和野生菌株的形态比较第51-52页
     ·R.solanacearum ZJ3721突变菌株致病性的检测第52页
     ·R.solanacearum ZJ3721突变菌株和野生菌株生长特性的比较第52页
     ·R.solanacearum ZJ3721突变菌株和野生菌株碳源代谢特性的比较第52页
     ·R.solanacearum ZJ3721突变菌株和野生菌株中致病相关基因的表达第52-53页
     ·R.solanacearum ZJ3721突变菌株和野生菌株中产噬铁素的检测第53页
 2. 结果与分析第53-63页
   ·R.solanacearum ZJ3721突变菌株的构建及与野生菌株的菌落形态比较第53-55页
   ·R.solanacearum ZJ3721突变菌株致病力检测结果第55-56页
   ·R.solanacearum ZJ3721突变菌株和与野生菌株的生长特性比较第56-57页
   ·R.solanacearum ZJ3721突变菌株和野生菌株的碳源代谢的差异第57-61页
   ·R.solanacearum ZJ3721突变菌株和野生菌株致病相关基因的表达第61-62页
   ·R.solanacearum ZJ3721突变菌株和野生菌株噬铁素的产生第62-63页
 3. 讨论第63-64页
 4 本章小结第64-67页
第四章 R.solanacearum ZJ3721 phcA~-突变株对番茄青枯病的防控效果研究第67-77页
 1 材料与方法第67-69页
   ·供试材料第67-68页
     ·供试菌株第67页
     ·供试土壤第67页
     ·供试番茄品种第67页
     ·培养基第67-68页
   ·试验方法第68-69页
     ·番茄幼苗的准备第68页
     ·接种菌液的制备第68页
     ·盆栽试验的设计第68页
     ·病情指数的监测第68-69页
     ·植株根际病原菌和生防菌数量的测定第69页
     ·植株茎内病原菌和生防菌数量的测定第69页
 2 结果与分析第69-74页
   ·盆栽试验中生防菌对番茄青枯病的防效第69-71页
   ·盆栽试验中番茄根际土壤中病原菌和生防菌的数量第71-72页
   ·盆栽试验中番茄植株茎中病原菌和生防菌的数量第72-74页
 3 讨论第74-75页
 4 本章小结第75-77页
第五章 R.solanacearum ZJ3721 phcA~-突变株诱导番茄系统抗性的研究第77-89页
 1 材料与方法第77-82页
   ·供试材料第77-79页
     ·供试菌株第77-78页
     ·试剂、培养基和营养液第78页
     ·供试番茄第78页
     ·番茄抗性基因荧光定量PCR所用引物第78-79页
   ·试验方法第79-81页
     ·番茄幼苗的准备第79页
     ·接种菌液的制备第79页
     ·菌株诱导番茄系统抗性的试验设计第79页
     ·番茄叶片样品的采集和RNA的提取第79-80页
     ·番茄叶片中抗性相关基因表达的测定第80-81页
     ·水培条件下R.solanacearum ZJ3721野生菌株和phcA~-突变株在番茄根表定殖的测定第81页
   ·分析和统计第81-82页
 2 结果第82-86页
   ·水培条件下R.solanacearum ZJ3721野生菌株和phcA~-突变株诱导番茄产生系统抗性第82-85页
   ·水培条件下R.solanacearum ZJ3721野生菌株和phcA~-突变株在番茄根表的定植第85-86页
 3 讨论第86-87页
 4 本章小节第87-89页
第六章 R.solanacearum ZJ3721 phcA~-突变株和hrp~-突变株诱导烟草系统抗性的研究第89-107页
 1 材料与方法第90-93页
   ·供试材料第90-91页
     ·供试菌株第90页
     ·试剂、培养基和营养液第90页
     ·供试烟草第90页
     ·烟草相关抗性基因的荧光定量PCR所用引物第90-91页
   ·试验方法第91-93页
     ·烟草幼苗的培育第91页
     ·接种菌液的制备第91-92页
     ·不同菌株诱导烟草抗性的试验设计第92页
     ·烟草根和叶片样品的采集和RNA的提取第92页
     ·烟草根和叶片中系统抗性相关基因表达的测定第92-93页
     ·烟草根和叶片中丙二醛(MDA)含量、过氧化氢(H_2O_2)含量及过氧化氢酶(CAT)活性的测定第93页
   ·分析和统计第93页
 2 结果第93-103页
   ·不同菌株处理对烟草抗性基因诱导表达的影响第93-99页
     ·烟草叶片中抗性相关基因的表达情况第94-97页
     ·烟草植株根系中抗性相关基因的表达第97-99页
   ·不同处理对抗病性相关酶(物质)活性(含量)的影响第99-103页
     ·不同处理对烟草中过氧化氢酶(CAT)活性的影响第99-101页
     ·不同处理对烟草中丙二醛(MDA)含量的影响第101-102页
     ·不同处理对烟草中过氧化氢含量的影响第102-103页
 3 讨论第103-104页
 4 本章小结第104-107页
第七章 植物疫苗工程菌新型应用方式及青枯病生物防治新策略的探索第107-119页
 1 材料与方法第107-111页
   ·供试材料第107-108页
     ·供试土壤第107-108页
     ·供试有机肥第108页
     ·试剂和培养基第108页
   ·试验方法第108-111页
     ·接种菌液及有机肥的制备第108-109页
     ·土壤培养试验的设计第109页
     ·土壤培养中phcA~-突变株菌体数量的测定第109页
     ·3-OH PAME的制备第109页
     ·3-OH PAME降解菌的分离和纯化第109-110页
     ·菌株降解3-OH PAME能力的鉴定第110页
     ·3-OH PAME降解菌的鉴定第110页
     ·不同培养条件下3-OH PAME降解菌生长的测定第110-111页
     ·共培养条件下3-OH PAME降解菌对青枯菌致病基因表达影响的检测第111页
 2 结果与分析第111-117页
   ·不同有机肥配方对phcA~-突变株在土壤中生长的影响第111-112页
   ·3-OH PAME降解菌的分离和鉴定第112-114页
   ·不同培养条件对3-OH PAME降解菌生长的影响第114-116页
     ·培养温度对3-OH PAME降解菌生长的影响第114-115页
     ·装液量对3-OH PAME降解菌生长的影响第115页
     ·培养基初始pH值对3-OH PAME降解菌生长的影响第115-116页
   ·共培养条件下3-OH PAME降解菌对青枯菌致病基因表达的影响第116-117页
 3 讨论第117页
 4 本章小结第117-119页
参考文献第119-129页
全文总结第129-131页
创新之处第131-133页
攻读博士期间发表的学术论文第133-135页
附录第135-137页
致谢第137页

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