| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 专业词汇中英文对照表 | 第8-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-24页 |
| ·EGFR信号通路及其入核现象的发现 | 第12-16页 |
| ·EGFR信号通路简介 | 第12-13页 |
| ·核内EGFR的发现 | 第13页 |
| ·其他酪氨酸激酶受体的核转位现象 | 第13页 |
| ·核转位EGFR的发生机制 | 第13-15页 |
| ·核转位EGFR的重要生物学作用 | 第15-16页 |
| ·磷酸化肽段富集 | 第16-19页 |
| ·抗体富集法 | 第16页 |
| ·色谱分离富集法 | 第16-19页 |
| ·固相金属离子亲和色谱富集法 | 第16-17页 |
| ·金属氧化物富集方法 | 第17-18页 |
| ·二维磷酸化肽段富集方法 | 第18页 |
| ·阳离子交换色谱法 | 第18-19页 |
| ·磷酸化蛋白质组学定量技术 | 第19-23页 |
| ·~(32)P代谢标记和荧光染料染色的磷酸化蛋白质定量分析方法 | 第19页 |
| ·稳定同位素标记技术 | 第19-22页 |
| ·化学标记技术(chemical modification) | 第19-20页 |
| ·同位素代谢标记技术 | 第20页 |
| ·同重同位素标签标记定量法 | 第20-21页 |
| ·~(18)O标记技术 | 第21-22页 |
| ·同位素标记的肽段作为内标的绝对定量法 | 第22页 |
| ·非标定量法 | 第22-23页 |
| ·本研究拟解决的问题及研究内容 | 第23-24页 |
| 第二章 EGFR入核现象的验证 | 第24-32页 |
| ·前言 | 第24页 |
| ·实验材料与方法 | 第24-27页 |
| ·实验材料 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·实验仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-27页 |
| ·实验结果 | 第27-31页 |
| ·western blotting方法验证EGFR核转位现象 | 第27-28页 |
| ·激光扫描共聚焦显微镜技术验证EGFR核转位现象 | 第28-30页 |
| ·其他癌症细胞系中EGFR的核转位现象 | 第30-31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| 第三章 TiO_2法富集细胞核磷酸化肽段 | 第32-38页 |
| ·前言 | 第32页 |
| ·实验材料与方法 | 第32-35页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·实验仪器 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-35页 |
| ·实验结果 | 第35-37页 |
| ·TiO_2磷酸化肽段富集方法的优化 | 第35-36页 |
| ·细胞核内磷酸化肽段的富集 | 第36-37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第四章 细胞核内定量磷酸化蛋白质组学研究 | 第38-48页 |
| ·前言 | 第38-39页 |
| ·实验材料与方法 | 第39-41页 |
| ·实验材料 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·实验仪器 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-41页 |
| ·实验结果 | 第41-46页 |
| ·iTRAQ标记定性结果分析 | 第41-42页 |
| ·iTRAQ标记磷酸化位点(pS/pT/pY)分析 | 第42-43页 |
| ·iTRAQ标记定量结果分析 | 第43-45页 |
| ·差异蛋白功能分析 | 第45-46页 |
| ·小结 | 第46-48页 |
| 第五章 讨论 | 第48-54页 |
| ·细胞核差异磷酸化蛋白激酶预测 | 第48页 |
| ·TiO_2法富集磷酸化肽段的优势 | 第48-49页 |
| ·细胞核组分未经预分离对实验结果的影响 | 第49页 |
| ·Ser和Thr磷酸化位点鉴定率远远高于Tyr磷酸化位点鉴定率 | 第49-50页 |
| ·磷酸化鉴定数目较少原因分析 | 第50页 |
| ·选择iTRAQ标记方法的优势 | 第50-51页 |
| ·研究受体酪氨酸激酶信号通路策略比较分析 | 第51页 |
| ·胞浆EGFR信号通路占较大比例 | 第51-52页 |
| ·磷酸化差异蛋白分析 | 第52-54页 |
| 基本结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 附录 | 第61-72页 |
| 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第72页 |
