| 摘要 | 第1-16页 |
| Abstract | 第16-21页 |
| 缩写词表 | 第21-22页 |
| 第一章 绪论 | 第22-54页 |
| ·糖生物学概述 | 第22-23页 |
| ·糖链与疾病 | 第23-26页 |
| ·糖脂与肿瘤 | 第23-25页 |
| ·Globotriose与微生物感染 | 第25-26页 |
| ·寡糖的合成 | 第26-32页 |
| ·寡糖的化学合成 | 第27-28页 |
| ·糖基转移酶及其在寡糖合成中的应用 | 第28-29页 |
| ·糖苷酶及其在寡糖合成中的应用 | 第29-32页 |
| ·α-半乳糖苷酶 | 第32-38页 |
| ·α-半乳糖苷酶的反应机制 | 第33-34页 |
| ·α-半乳糖苷酶的水解作用 | 第34-36页 |
| ·α-半乳糖苷酶的转糖基作用 | 第36-38页 |
| ·重组DNA技术 | 第38-41页 |
| ·已知序列目的基因的克隆 | 第39页 |
| ·TAIL-PCR | 第39-41页 |
| ·糖苷酶的分子改造 | 第41-48页 |
| ·定点突变 | 第42-45页 |
| ·随机突变 | 第45-47页 |
| ·C-端缺失和DNA shuffling | 第47-48页 |
| ·糖分析与鉴定 | 第48-52页 |
| ·离子色谱 | 第49页 |
| ·质谱 | 第49-50页 |
| ·核磁共振 | 第50-52页 |
| ·本论文的研究内容及意义 | 第52-54页 |
| 第二章 转糖基α-半乳糖苷酶的筛选 | 第54-96页 |
| ·材料与方法 | 第55-72页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第55-56页 |
| ·菌株及质粒 | 第56页 |
| ·培养基及培养条件 | 第56-57页 |
| ·L. casei JCM1134来源的α-半乳糖苷酶基因的克隆与表达 | 第57-66页 |
| ·L. breve JCM1059来源的α-半乳糖苷酶基因的克隆与表达 | 第66-68页 |
| ·C. perfringens ATCC 13124来源的α-半乳糖苷酶基因的克隆与表达 | 第68页 |
| ·B. fragilis NCTC9343来源的α-半乳糖苷酶基因的克隆与表达 | 第68-70页 |
| ·重组酶的活性分析及转糖基产物的初步鉴定 | 第70-72页 |
| ·结果 | 第72-93页 |
| ·L.casei JCM1134来源的α-半乳糖苷酶基因的克隆与表达 | 第72-78页 |
| ·L.breve JCM1059来源的α-半乳糖苷酶的克隆与表达 | 第78-81页 |
| ·C. perfringens ATCC 13124来源的α-半乳糖苷酶基因的克隆与表达 | 第81-82页 |
| ·B. fragilis NCTC9343来源的α-半乳糖苷酶基因的克隆与表达 | 第82-84页 |
| ·重组酶的活性分析及转糖基产物的初步鉴定 | 第84-93页 |
| ·讨论 | 第93-94页 |
| ·本章小结 | 第94-96页 |
| 第三章 α-半乳糖苷酶AgaBf3S的酶学性质及Globotriose的酶法合成研究 | 第96-120页 |
| ·材料与方法 | 第96-100页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第96页 |
| ·菌株和质粒 | 第96-97页 |
| ·培养基和培养条件 | 第97页 |
| ·α-半乳糖苷酶AgaBf3S基因的克隆与表达 | 第97页 |
| ·α-半乳糖苷酶AgaBf3S的酶学性质 | 第97-99页 |
| ·Globotriose的酶法合成 | 第99-100页 |
| ·α-半乳糖苷酶AgaBf3S受体选择性分析 | 第100页 |
| ·结果 | 第100-114页 |
| ·α-半乳糖苷酶AgaBf3S基因的克隆与表达 | 第100-103页 |
| ·α-半乳糖苷酶AgaBf3S的酶学性质 | 第103-106页 |
| ·Globotriose的酶法合成 | 第106-110页 |
| ·α-半乳糖苷酶AgaBf3S的受体选择性分析 | 第110-114页 |
| ·讨论 | 第114-118页 |
| ·本章小结 | 第118-120页 |
| 第四章 α-半乳糖苷酶AgaBf3S的分子改造 | 第120-135页 |
| ·材料与方法 | 第121-126页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第121页 |
| ·菌株与质粒 | 第121页 |
| ·培养基及培养条件 | 第121页 |
| ·基因操作技术 | 第121-125页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第125页 |
| ·高效突变酶的筛选 | 第125页 |
| ·AgaBf3S的同源模建 | 第125页 |
| ·其它氨基酸位点的定点突变 | 第125-126页 |
| ·结果 | 第126-133页 |
| ·AgaBf3S的随机突变及高效突变酶的筛选 | 第126-127页 |
| ·AgaBf3S的定点突变及高效突变酶的筛选 | 第127-129页 |
| ·AgaBf3S的氨基酸位点分析 | 第129-132页 |
| ·其它氨基酸位点的定点突变 | 第132-133页 |
| ·讨论 | 第133-134页 |
| ·本章小结 | 第134-135页 |
| 全文总结 | 第135-137页 |
| 参考文献 | 第137-150页 |
| 攻读博士学位期间取得的的学术成果 | 第150-151页 |
| 致谢 | 第151-152页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第152-153页 |
| 附录 | 第153-162页 |
