| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| ·木糖醇的应用价值和生产 | 第12-13页 |
| ·木糖醇的应用价值 | 第12页 |
| ·木糖醇的生产 | 第12-13页 |
| ·乙醇的应用价值和生产 | 第13-14页 |
| ·乙醇的应用价值 | 第13页 |
| ·乙醇的生产 | 第13-14页 |
| ·利用马克思克鲁维耐热酵母作为发酵菌株的意义 | 第14-15页 |
| ·发酵底物的选择及其意义 | 第15-16页 |
| ·利用木糖和甘油发酵生产木糖醇的意义 | 第15-16页 |
| ·利用木糖和葡萄糖发酵生产乙醇的意义 | 第16页 |
| ·木糖代谢途径及本论文代谢工程改造思路 | 第16-22页 |
| ·木糖代谢途径 | 第16-17页 |
| ·通过改造木糖代谢途径生产木糖醇 | 第17-18页 |
| ·通过改造木糖代谢途径生产乙醇 | 第18-22页 |
| 第二章 实验材料、设备及方法 | 第22-108页 |
| ·实验材料与设备 | 第22-23页 |
| ·菌株、质粒和培养基 | 第22页 |
| ·酶与试剂 | 第22-23页 |
| ·仪器设备 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-108页 |
| ·基础实验方法 | 第24-32页 |
| ·提取酵母基因组的方法 | 第24页 |
| ·酵母化学转化的步骤 | 第24-25页 |
| ·酵母发酵生产木糖醇的流程 | 第25页 |
| ·酵母发酵生产乙醇的流程 | 第25-26页 |
| ·酵母RNA提取的流程 | 第26页 |
| ·Bradford测定蛋白含量 | 第26-27页 |
| ·XR和XDH酶活测定的流程 | 第27页 |
| ·XR酶活的测定 | 第27页 |
| ·XDH酶活的测定 | 第27页 |
| ·胶回收的操作流程 | 第27-28页 |
| ·质粒抽提流程 | 第28-29页 |
| ·PCR产物纯化流程 | 第29页 |
| ·制备大肠杆菌化学感受态细胞 | 第29-30页 |
| ·大肠感受态细胞转化 | 第30页 |
| ·辅酶量的测定流程 | 第30-32页 |
| ·NAD~+/NADH辅酶量的测定 | 第30-31页 |
| ·NADP~+/NADPH辅酶量的测定 | 第31-32页 |
| ·木糖醇生产课题的实验方法 | 第32-59页 |
| ·各种Xyl1的克隆 | 第32-37页 |
| ·NcXyl1的克隆 | 第32-36页 |
| ·PsXyl1基因的克隆 | 第36-37页 |
| ·木糖醇课题中各种高效发酵菌株的构建和验证 | 第37-55页 |
| ·将构建的载体转入改造后的耐热酵母 | 第55-59页 |
| ·YZB001,YLUA005和YRL002宿主菌株的制备 | 第55-56页 |
| ·构建各种耐热酵母XR表达菌株的具体过程 | 第56-58页 |
| ·验证各种耐热酵母XR表达菌株的成功构建 | 第58-59页 |
| ·乙醇生产课题的实验方法 | 第59-108页 |
| ·构建乙醇课题中各种质粒载体的构建 | 第59-102页 |
| ·乙醇课题中各种高效发酵菌株的构建和验证 | 第102-108页 |
| ·高效发酵菌株的构建过程 | 第102-106页 |
| ·高效发酵菌株的验证 | 第106-108页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第108-136页 |
| ·木糖生产木糖醇相关结果与讨论 | 第108-123页 |
| ·含有不同启动子和Xyl1的菌株在合成培养基下的发酵情况 | 第108-109页 |
| ·含有不同拷贝的NcXyl1的菌株在42℃下的发酵情况 | 第109-111页 |
| ·YZJ017菌株的相关发酵结果 | 第111-114页 |
| ·YZJ017利用木糖发酵的辅助底物的选择 | 第111-112页 |
| ·YZJ017利用在不同温度下的发酵结果 | 第112-113页 |
| ·YZJ017在42 °C条件下利用其它不同糖浓度的发酵情况 | 第113-114页 |
| ·YZJ015菌株的相关发酵结果 | 第114-118页 |
| ·YZJ015利用不同糖浓度的发酵情况 | 第114-116页 |
| ·YZJ015利用不同初始OD的发酵情况 | 第116-117页 |
| ·YZJ015利用菌体循环发酵生产木糖醇 | 第117-118页 |
| ·过表达KmFPS1基因对于木糖醇生产的影响 | 第118-119页 |
| ·过表达木糖转运蛋白CiGXF1基因提高木糖醇的产量和生产速率 | 第119页 |
| ·利用发酵罐发酵生产木糖醇 | 第119-122页 |
| ·利用分批补料发酵获得高木糖醇浓度 | 第122-123页 |
| ·木糖生产乙醇相关结果与讨论 | 第123-136页 |
| ·NcXR和各种XDH突变体的最好组合的菌株筛选 | 第123-125页 |
| ·各种基因工程改造菌株利用木糖发酵生产乙醇的情况 | 第125-126页 |
| ·YZJ088在不同温度下利用不同木糖浓度和不同起始OD的发酵 | 第126-130页 |
| ·重组工程菌株中高的XR和XDH粗酶活使其有高的木糖发酵能力 | 第130-131页 |
| ·重组工程菌株中XR和XDH粗酶活的热稳定性 | 第131-132页 |
| ·YZJ088具有同时利用和发酵葡萄糖和木糖的能力 | 第132-133页 |
| ·Real-time PCR分析 | 第133-134页 |
| ·优化代谢途径过程中辅酶的变化 | 第134-136页 |
| 参考文献 | 第136-140页 |
| 附录 | 第140-146页 |
| 致谢 | 第146-148页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第148-149页 |
