| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第11-18页 |
| ·植物细胞质雄性不育在杂交种生产上的应用 | 第11页 |
| ·甜菜CMS机制的研究 | 第11-12页 |
| ·细胞学机制研究 | 第11页 |
| ·遗传学机制研究 | 第11-12页 |
| ·分子机理的研究 | 第12页 |
| ·线粒体基因与CMS相关性的研究 | 第12-14页 |
| ·实时荧光定量PCR技术 | 第14-16页 |
| ·实时荧光定量PCR的定量方法 | 第14-15页 |
| ·实时荧光定量PCR技术的应用 | 第15-16页 |
| ·本研究目的及其意义 | 第16-17页 |
| ·实验流程 | 第17-18页 |
| 2 实验材料与方法 | 第18-27页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·实验试剂与试剂盒 | 第18-19页 |
| ·实验主要仪器设备 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-27页 |
| ·甜菜CMS相关基因的克隆 | 第19-23页 |
| ·甜菜基因组DNA的提取 | 第19-20页 |
| ·特异性引物设计及PCR扩增 | 第20-23页 |
| ·特异性引物设计 | 第20页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第20-21页 |
| ·PCR扩增产物的纯化回收 | 第21-22页 |
| ·PCR产物的克隆及测序 | 第22页 |
| ·测序目的基因序列的分析 | 第22页 |
| ·不育系及其保持系中测序基因序列的比较 | 第22-23页 |
| ·甜菜细胞质雄性不育相关基因差异表达分析 | 第23-27页 |
| ·总RNA的提取 | 第23页 |
| ·反转录合成单链cDNA | 第23-24页 |
| ·半定量PCR(Semi-Quantitative PCR)反应 | 第24-26页 |
| ·实时荧光定量PCR(Quantitative Real-Time PCR)反应 | 第26-27页 |
| ·实时荧光定量PCR体系 | 第26页 |
| ·实时荧光定量引物设计 | 第26-27页 |
| ·实时荧光定量PCR反应程序 | 第27页 |
| ·实时荧光定量分析方法 | 第27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-39页 |
| ·甜菜CMS相关基因的克隆 | 第27-32页 |
| ·甜菜基因组DNA的琼脂糖凝胶纯化回收电泳检测 | 第27-28页 |
| ·甜菜线粒体CMS相关基因序列的克隆 | 第28-29页 |
| ·甜菜不育系与保持系目的基因序列比较 | 第29-31页 |
| ·甜菜不育系与保持系目的基因的氨基酸序列比较 | 第31-32页 |
| ·甜菜CMS相关基因差异表达分析 | 第32-39页 |
| ·RNA样品的质量检测 | 第32页 |
| ·cDNA样品的质量检测 | 第32-33页 |
| ·半定量PCR分析 | 第33-35页 |
| ·实时荧光定量PCR分析 | 第35-39页 |
| ·qPCR扩增曲线和熔解曲线分析 | 第35-37页 |
| ·线粒体CMS相关基因在甜菜花蕾不同发育阶段的表达水平分析 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| ·克隆的基因(片段)在核苷酸及氨基酸水平上与甜菜CMS的关系 | 第39-40页 |
| ·克隆的基因(片段)相对表达量与甜菜CMS的关系 | 第40-41页 |
| 5 结论 | 第41-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-54页 |
| 附录 | 第54-69页 |
| 作者简介 | 第69页 |
