| 中文摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-26页 |
| ·蛋白质合成的终止 | 第16页 |
| ·肽链释放因子 | 第16-23页 |
| ·肽链释放因子的种类 | 第16-17页 |
| ·肽链释放因子的结构 | 第17-18页 |
| ·第一类肽链释放因子识别终止密码子的分子机制 | 第18-23页 |
| ·肽链释放因子与其他参与翻译的因子相互作用 | 第23页 |
| ·遗传密码子的普遍性和特异性 | 第23页 |
| ·嗜热四膜虫和蓝氏贾第鞭毛虫的特点及本课题的研究意义 | 第23-26页 |
| ·嗜热四膜虫的特点 | 第23-24页 |
| ·蓝氏贾第鞭毛虫的特点 | 第24页 |
| ·本课题研究的意义 | 第24-26页 |
| 第二章 四膜虫eRF1及其突变体识别终止密码子的性质和活性分析 | 第26-43页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·实验材料 | 第26-28页 |
| ·菌株和质粒 | 第26-27页 |
| ·生化试剂、引物合成及测序 | 第27页 |
| ·试剂的配制 | 第27-28页 |
| ·实验仪器 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-34页 |
| ·引物序列 | 第28-29页 |
| ·四膜虫eRF1(Tt/Sc eRF1)嵌合体的构建(含HA标签) | 第29-31页 |
| ·定点突变 | 第31-32页 |
| ·质粒洗牌技术 | 第32-33页 |
| ·双荧光素酶通读效率实验 | 第33-34页 |
| ·Western Blot | 第34页 |
| ·实验结果 | 第34-40页 |
| ·四膜虫eRF1嵌合体重组质粒的构建 | 第34-35页 |
| ·四膜虫eRF1嵌合体突变质粒的构建 | 第35-37页 |
| ·四膜虫eRF1嵌合体及突变体支持细胞生存活性分析 | 第37页 |
| ·eRF1识别终止密码子活性的定量分析 | 第37-40页 |
| ·四膜虫eRF1嵌合体和突变体蛋白在酵母细胞中能够稳定的表达 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-43页 |
| 第三章 四膜虫eRF1 N端模体结构识别终止密码子的性质和活性分析 | 第43-56页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·菌株和质粒 | 第43-44页 |
| ·生化试剂、引物合成及测序 | 第44页 |
| ·试剂的配制 | 第44页 |
| ·实验仪器 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44-47页 |
| ·引物序列 | 第44-45页 |
| ·四膜虫eRF1 N端嵌合体的构建 | 第45-47页 |
| ·四膜虫eRF1 N端嵌合体突变体的构建 | 第47页 |
| ·质粒洗牌技术 | 第47页 |
| ·双荧光素酶通读效率实验 | 第47页 |
| ·Western blot实验 | 第47页 |
| ·实验结果 | 第47-53页 |
| ·四膜虫eRF1 N端嵌合体的构建 | 第47-48页 |
| ·四膜虫eRF1 N端嵌合体突变体的构建 | 第48-49页 |
| ·四膜虫eRF1 N端嵌合体及突变体支持细胞生存活性分析 | 第49-50页 |
| ·四膜虫eRF1 N端嵌合体及突变体识别终止密码子活性的定量分析 | 第50-52页 |
| ·Western blot检测eRF1在酵母细胞中稳定表达 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-56页 |
| 第四章 贾第虫eRF1 N端模体结构识别终止密码子的性质和活性分析以及eRF3对其识别活性的影响 | 第56-64页 |
| ·引言 | 第56页 |
| ·实验材料 | 第56-57页 |
| ·菌株和质粒 | 第56-57页 |
| ·生化试剂、引物合成及测序 | 第57页 |
| ·试剂的配制 | 第57页 |
| ·实验仪器 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-59页 |
| ·引物序列 | 第57页 |
| ·贾第虫eRF1 N端嵌合体的构建 | 第57-58页 |
| ·贾第虫Gl-eRF1-eRF3的构建 | 第58-59页 |
| ·质粒洗牌技术 | 第59页 |
| ·双荧光素酶通读效率实验 | 第59页 |
| ·Western Blot | 第59页 |
| ·实验结果 | 第59-63页 |
| ·贾第虫eRF1 N端嵌合体和贾第虫Gl-eRF1-eRF3的构建 | 第59-61页 |
| ·贾第虫eRF1 N端嵌合体及Gl-eRFl-eRF3支持细胞生存活性分析 | 第61页 |
| ·eRF1识别终止密码子活性的定量分析 | 第61-62页 |
| ·贾第虫eRF1嵌合体蛋白在酵母细胞中能够稳定的表达 | 第62-63页 |
| ·讨论 | 第63-64页 |
| 总结与展望 | 第64-66页 |
| 总结 | 第64-65页 |
| 展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 附录 | 第71-72页 |
| 攻读硕士期间取得的研究成果 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 个人简介及联系方式 | 第74-75页 |
| 承诺书 | 第75-76页 |
