| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 一 前言 | 第10-17页 |
| ·植物抗逆境中转录因子在植物抗逆反应中发挥着重要作用 | 第10-11页 |
| ·植物响应镉胁迫的调控机制 | 第11-15页 |
| ·植物重金属离子动态调节机制 | 第11-13页 |
| ·植物Cd响应基因的转录调控机制 | 第13-14页 |
| ·Trp响应Cd胁迫 | 第14-15页 |
| ·本实验室关于PvMTF-1的研究进展 | 第15-16页 |
| ·研究论文选题的目的和意义 | 第16-17页 |
| 二 实验方法和材料 | 第17-36页 |
| ·实验材料 | 第17-19页 |
| ·植物材料 | 第17页 |
| ·转基因烟草的抗性筛选 | 第17页 |
| ·培养基 | 第17-18页 |
| ·酶、试剂盒、抗生素及各种化学试剂 | 第18页 |
| ·引物合成及测序 | 第18页 |
| ·抗体的制备 | 第18-19页 |
| ·主要实验仪器 | 第19页 |
| ·主要应用分析软件 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-36页 |
| ·表型分析 | 第19页 |
| ·生理指标的测定方法 | 第19-20页 |
| ·DNA提取 | 第20-22页 |
| ·PCR反应 | 第22-23页 |
| ·qRT-PCR | 第23-25页 |
| ·T-A克隆 | 第25-26页 |
| ·稳定转化烟草 | 第26-27页 |
| ·植物总蛋白提取、电泳 | 第27-28页 |
| ·Western Blot | 第28-29页 |
| ·酵母杂交筛选 | 第29-30页 |
| ·染色质免疫共沉淀 | 第30-32页 |
| ·EMSA | 第32-36页 |
| 三 实验结果 | 第36-47页 |
| ·PvMTF-1提高烟草Cd抗性 | 第36-37页 |
| ·ChIP-cloning在35S：PvMTF-1-GFP转基因烟草中筛选PvMTF-1靶基因 | 第37-38页 |
| ·PvMTF-1在Cd胁迫下上调ASA2表达 | 第38-39页 |
| ·野生型烟草通过增加Trp可提高对Cd的耐受能力 | 第39-40页 |
| ·ASA2(-1222/-1081)基因启动子结构分析 | 第40-41页 |
| ·Cd胁迫下ChIP验证PvMTF-1与ASA2promter(-1222/-1081)结合 | 第41-42页 |
| ·PvMTF-1在酵母中结合ASA2启动子上游(-1222/-1081)并结合MRE元件 | 第42-43页 |
| ·PvMTF-1在体外结合MRE元件 | 第43-44页 |
| ·PvMTF-1能识别ASA2启动子近端的MRE元件 | 第44-46页 |
| ·PvMTF-1转基因烟草在Cd胁迫下,游离Trp含量增加,Cd的含量降低 | 第46-47页 |
| 四讨论 | 第47-52页 |
| ·PvMTF-1转基因烟草的抗Cd调控模式 | 第47-48页 |
| ·PvMTF-1是MRE结合转录因子 | 第48-49页 |
| ·转录因子/金属响应元件互作是植物金属稳态调控的普遍机制 | 第49-50页 |
| ·PvMTF-1是一个新型镉抗性转录因子 | 第50页 |
| ·后期工作展望及可行性方案 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-61页 |
| 附录 | 第61-68页 |
| 附录Ⅰ：论文所用引物序列 | 第61-63页 |
| 附录Ⅱ：论文所用载体 | 第63-66页 |
| 附录Ⅲ：Tablel | 第66-67页 |
| 附录Ⅳ：硕士在读期间发表的论文 | 第67-68页 |
| 附件 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
