中文摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
目录 | 第7-11页 |
ABBREVIATIONS | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-33页 |
·拟南芥雄配子体发生和发育的过程 | 第12-13页 |
·雄性生殖细胞的分化发育和小孢子发生 | 第12页 |
·雄配子体发生、花粉萌发和花粉管生长 | 第12-13页 |
·拟南芥雄配子体发育的分子机制 | 第13-22页 |
·花药早期发育的分子机制 | 第14-15页 |
·小孢子形成的分子机制 | 第15-16页 |
·三核花粉形成的分子机制 | 第16-18页 |
·花粉萌发和花粉管生长的分子机制 | 第18-22页 |
·细胞壁对花粉萌发和花粉管生长的作用 | 第19页 |
·细胞骨架对花粉萌发和花粉管生长的影响 | 第19-20页 |
·信号转导对花粉萌发和花粉管生长的影响 | 第20-21页 |
·物质运输对花粉萌发和花粉管生长的影响 | 第21-22页 |
·转录调控对拟南芥花粉发育和花粉管萌发生长的作用 | 第22-26页 |
·真核生物转录起始过程 | 第22-23页 |
·拟南芥花粉不同时期的转录组学 | 第23-24页 |
·转录因子在拟南芥花粉发育和花粉管萌发生长中的作用 | 第24-26页 |
·HMGB蛋白家族的功能 | 第26-32页 |
·哺乳动物和酵母中HMGB蛋白家族的研究进展 | 第27-28页 |
·植物中HMGB蛋白家族的研究进展 | 第28-31页 |
·ARID-HMG蛋白家族的研究进展 | 第31-32页 |
·立题依据和研究意义 | 第32-33页 |
第二章 实验方法 | 第33-54页 |
·实验材料 | 第33-34页 |
·植物材料 | 第33页 |
·菌株 | 第33页 |
·质粒载体 | 第33-34页 |
·酶、试剂及各种化学药品 | 第34页 |
·实验仪器 | 第34-35页 |
·常用溶液及培养基的配制 | 第35-41页 |
·常用溶液的配制 | 第35-39页 |
·常用培养基的配制 | 第39-41页 |
·实验方法 | 第41-54页 |
·植物材料的栽种与管理 | 第41页 |
·拟南芥杂交实验 | 第41页 |
·拟南芥花粉体外萌发实验 | 第41页 |
·拟南芥花粉体内萌发及雌蕊的苯胺蓝染色 | 第41-42页 |
·拟南芥总基因组DNA的快速提取法(Edwards法) | 第42页 |
·CTAB法提取拟南芥角果RNA | 第42页 |
·TRIZOL法提取拟南芥花粉RNA | 第42-43页 |
·多糖多酚快速提取试剂盒提取拟南芥总RNA | 第43页 |
·基因半定量PCR(RT-PCR) | 第43-44页 |
·荧光实时定量PCR(Real-time PCR) | 第44-45页 |
·回收琼脂糖凝胶中的DNA | 第45-46页 |
·DNA片段与T载体或与目的载体的连接反应 | 第46页 |
·大肠杆菌DH5a超级感受态的制备 | 第46-47页 |
·大肠杆菌DH5a超级感受态的热激转化 | 第47页 |
·大肠杆菌质粒的小量提取 | 第47页 |
·大肠杆菌质粒的大量提取与纯化 | 第47-48页 |
·农杆菌感受态的制备 | 第48-49页 |
·农杆菌感受态的电击转化 | 第49页 |
·农杆菌侵染转化拟南芥 | 第49页 |
·GUS染色观察 | 第49页 |
·DAPI染色观察 | 第49-50页 |
·酵母中转录激活活性的分析 | 第50页 |
·基因枪转化、瞬时表达和荧光双分子互补(BiFC)实验 | 第50-51页 |
·荧光素酶双分子互补实验(LUC) | 第51页 |
·His标签蛋白原核表达及纯化 | 第51-52页 |
·电泳迁移实验(Electrophoretic mobility shift assay,EMSA) | 第52-54页 |
第三章 实验结果 | 第54-93页 |
引言 | 第54页 |
·athmgb15-1突变体的表型分析 | 第54-58页 |
·athmgb15-1突变体靠近角果基部的结实率较低 | 第54-56页 |
·athmgb15-1突变体花粉在体外萌发率低,但在体内可正常萌发产生花粉管 | 第56页 |
·athmgb15-1突变体花粉管体内生长受抑制,花粉管短 | 第56-58页 |
·AtHMGB15蛋白的功能分析 | 第58-71页 |
·AtHMGB15属于ARID-HMG蛋白亚家族,具有结合DNA的活性 | 第58页 |
·AtHMGB15的亚细胞定位 | 第58-64页 |
·AtHMGB15蛋白在酵母中不具有转录激活活性 | 第64页 |
·AtHMGB15蛋白形成同源聚合体,并与ARID-HMG蛋白家族其它成员形成异源聚合体 | 第64-67页 |
·AtHMGB15蛋白在植物体内与其它转录因子相互作用 | 第67-71页 |
·AtHMGB15与转录因子AGL66、AGL104和AGL18相互作用 | 第67-69页 |
·AtHMGB15与通用转录因子AtTFIIB1相互作用 | 第69-71页 |
·AtHMGB15在花粉萌发及花粉管生长调控网络中的作用研究 | 第71-82页 |
·athmgb15-1突变体基因表达谱的芯片数据分析 | 第71-74页 |
·AtHMGB15与AtMIKC~*协同影响花粉管萌发生长 | 第74-79页 |
·athmgb15-1突变体与agl66 agl104-2突变体表型相似 | 第74页 |
·athmgb15-1增强agl66 agl104-2的表型 | 第74-75页 |
·AtHMGB15与AtMIKC~*共同调控与细胞壁合成及修饰、分泌、运输和信号等过程相关基因的表达 | 第75-77页 |
·AtHMGB15和AtMIKC~*参与调控AtHMGB11、AGL94、AGL65、AGL30、AGL29和AGL18基因的表达 | 第77-79页 |
·agl66加重athmgb15-C突变体花粉体外萌发率低的表型 | 第79-82页 |
·athmgb15-C突变体中同时突变AGL66和AGL94严重降低角果结实率 | 第82页 |
·ARID-HMG蛋白家族成员在花粉发育以及其它生长过程中功能的初步研究 | 第82-93页 |
·ARID-HMG基因的表达模式 | 第82-85页 |
·ARID-HMG1、ARID-HMG2和AtHMGB11突变体的鉴定及遗传分析 | 第85-86页 |
·AtHMGB11与AtHMGB15基因存在部分的功能冗余 | 第86-87页 |
·野生型花粉中超表达ARID-HMG基因不影响花粉发育 | 第87页 |
·野生型植株中超表达ARID-HMG基因的分析 | 第87-93页 |
·超表达AtHMGB11基因造成植物小苗根增长,植株分支增多、变矮,角果短小 | 第89页 |
·AtHMGB11-OE花丝短,造成花粉不能授到雌蕊柱头上,导致植株结实率降低 | 第89-93页 |
第四章 总结与结论、讨论和展望 | 第93-98页 |
·总结与结论 | 第93页 |
·讨论 | 第93-96页 |
·AtHMGB15在花粉萌发和花粉管生长中起重要作用 | 第93-94页 |
·AtHMGB15调控许多在花粉管萌发生长中起重要作用的基因表达 | 第94-95页 |
·AtHMGB15在花粉萌发和花粉管生长调控网络中的作用 | 第95-96页 |
·展望 | 第96-98页 |
·AtHMGB15是否影响AtMIKC~*蛋白异源复合体的形成及结合DNA的能力 | 第96页 |
·AtHMGB15能否促进AtMIKC~*蛋白异源复合体与转录起始复合体的结合 | 第96页 |
·寻找更多与AtHMGB15蛋白互作的花粉转录因子 | 第96-97页 |
·通过鉴定AtHMGB15的下游基因研究花粉萌发和花粉管生长的分子遗传机制 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-111页 |
附录:表1.本研究所用引物列表 | 第111-117页 |
附录:表2.T1代转基因植株互补统计 | 第117-118页 |
附录:表3.T1代转基因植株统计1 | 第118-119页 |
附录:表4.T1代转基因植株统计2 | 第119-120页 |
附录:表5.T1代转基因植株统计3 | 第120-121页 |
附录:表6.T1代转基因植株统计4 | 第121-122页 |
致谢 | 第122-124页 |
作者简介 | 第124页 |