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原花青素相关基因AnANR转化热研2号柱花草的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
1 前言第11-21页
   ·柱花草的研究进展第11-13页
     ·柱花草的生物学研究第11-12页
     ·柱花草的综合利用第12-13页
   ·植物转基因技术第13-14页
     ·农杆菌转化法第13页
     ·基因枪法第13页
     ·花粉管通道法第13-14页
   ·转基因技术在柱花草育种中的应用第14-15页
     ·柱花草的组织培养第14页
     ·柱花草的遗传转化第14-15页
   ·ANR基因及GUS报告基因第15-19页
     ·原花青素的生物合成第15-17页
     ·ANR基因第17页
     ·GUS基因第17-19页
   ·本研究的目的和意义第19-20页
   ·本研究的技术路线第20-21页
2 材料与方法第21-35页
   ·试验材料第21-22页
     ·植物材料第21页
     ·试验试剂第21页
     ·试剂盒与引物第21-22页
     ·载体与菌株第22页
     ·仪器设备第22页
   ·试验方法第22-35页
     ·柱花草原花青素的提取与测定第22-23页
     ·基本培养基的配制方法第23-24页
     ·主要抗生素和试剂的配制第24-25页
     ·热研2号柱花草的遗传体系的优化第25-26页
     ·AnANR基因全长的获得第26-28页
     ·AnANR基因表达载体的构建第28-31页
     ·表达载体转化农杆菌第31页
     ·遗传转化体系中各因素的优化第31-32页
     ·热研2号柱花草的遗传转化第32-33页
     ·转基因植株的分子验证第33-34页
     ·转基因柱花草的炼苗移栽第34页
     ·转基因柱花草原花青素含量的变化第34-35页
3 结果与分析第35-52页
   ·不同种质柱花草原花青素的提取与测定第35-37页
     ·最大波长的确定第35页
     ·标准曲线的绘制第35-36页
     ·不同种质柱花草原花青素含量的比较第36-37页
   ·热研2号柱花草遗传再生体系的优化第37-38页
   ·AnANR基因全长的获得第38-40页
     ·红掌AnANR的提取及cDNA的获得第38-39页
     ·AnANR目的基因片段的回收第39-40页
   ·AnANR基因的序列分析第40-42页
   ·AnANR基因表达载载体的构建第42-44页
     ·AnANR基因克隆载体的获得第42页
     ·质粒pT-AnANR与CaM35S-GFP的双酶切第42-43页
     ·质粒CaM35S-GFP-AnANR的提取与酶切鉴定第43-44页
   ·农杆菌介导转化体系中各因素的优化第44-46页
     ·羧苄青霉素(Cb)最佳浓度的确定第44-45页
     ·潮霉素(Hyg)最佳浓度的确定第45页
     ·农杆菌最佳OD_(600)值的确定第45-46页
     ·农杆菌最佳侵染时间的确定第46页
   ·热研2号柱花草的遗传转化及转基因植株的再生第46-47页
   ·转基因柱花草的检测分析第47-50页
     ·GUS染色检测第47-48页
     ·PCR检测分析第48-50页
   ·转基因柱花草的移栽第50页
   ·转基因柱花草的原花青素含量的变化第50-52页
4 讨论第52-56页
   ·热研2号柱花草的组织培养第52页
   ·遗传转化体系中各因素的优化第52-54页
   ·转基因柱花草的移栽第54-55页
   ·AnANR基因的表达分析第55-56页
5 结论第56-57页
参考文献第57-61页
缩略语表第61-62页
附录第62-63页
致谢第63页

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