摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一章 绪论 | 第8-14页 |
·立题意义 | 第8页 |
·国内外研究进展 | 第8-12页 |
·根霉脂肪酶概述 | 第8-9页 |
·华根霉脂肪酶 | 第9-10页 |
·脂肪酶耐热性分子改造研究进展 | 第10-11页 |
·脂肪酶前肽功能研究进展 | 第11-12页 |
·课题研究思路、研究内容和课题来源 | 第12-14页 |
·研究思路 | 第12页 |
·研究内容 | 第12-13页 |
·课题来源 | 第13-14页 |
第二章 材料与方法 | 第14-23页 |
·实验材料 | 第14-15页 |
·菌株与质粒 | 第14页 |
·培养基及试剂 | 第14-15页 |
·主要试剂及仪器 | 第15页 |
·实验方法 | 第15-23页 |
·理性设计突变株的构建与筛选 | 第15-17页 |
·前肽与成熟肽表达菌株的构建 | 第17-18页 |
·不同截短前肽序列脂肪酶基因重组菌株的构建与筛选 | 第18-19页 |
·重组菌的生长与表达测定 | 第19-20页 |
·重组蛋白的分离纯化与酶学性质测定 | 第20-21页 |
·脂肪酶的体外变性和复性 | 第21-22页 |
·重组菌的发酵 | 第22-23页 |
第三章 结果与讨论 | 第23-43页 |
·理性设计提高华根霉脂肪酶耐热性 | 第23-29页 |
·突变酶突变位点的预测分析 | 第23页 |
·突变酶表达菌株的构建与筛选 | 第23-24页 |
·突变酶的酶学性质研究 | 第24-29页 |
·脂肪酶前肽体外辅助折叠作用研究 | 第29-34页 |
·前肽与成熟肽表达菌株的构建与筛选 | 第29-31页 |
·前肽的诱导表达与纯化 | 第31页 |
·携带全长前肽的脂肪酶、剪切前肽的脂肪酶和成熟肽脂肪酶的表达与纯化 | 第31-32页 |
·前肽体外辅助折叠作用 | 第32-34页 |
·不同截短前肽序列的脂肪酶基因在毕赤酵母中的表达差异研究 | 第34-43页 |
·重组菌株的构建与筛选 | 第34-37页 |
·重组菌的表达差异研究 | 第37-43页 |
主要结论与展望 | 第43-44页 |
主要结论 | 第43页 |
展望 | 第43-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-48页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第48页 |