中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一章 绪论 | 第8-13页 |
·血管生长药物及其缺陷 | 第8-9页 |
·SDF-1 | 第9-11页 |
·SDF-1的趋化能力 | 第9-10页 |
·SDF-1的间接治疗作用 | 第10页 |
·SDF-1与心肌缺血 | 第10页 |
·SDF-1与脑缺血性疾病 | 第10-11页 |
·SDF-1与肿瘤 | 第11页 |
·本研究的目的及意义 | 第11-13页 |
第二章 重组蛋白SDF-1α菌种的重培养 | 第13-17页 |
·实验思路 | 第13页 |
·实验材料 | 第13-14页 |
·菌种与质粒 | 第13-14页 |
·试剂 | 第14页 |
·仪器设备 | 第14页 |
·培养基及主要试剂配制 | 第14页 |
·实验方法 | 第14-15页 |
·重组蛋白SDF-1α菌种的复壮 | 第14页 |
·质粒的提取 | 第14-15页 |
·转化 | 第15页 |
·实验结果及讨论 | 第15-16页 |
·本章小结 | 第16-17页 |
第三章 SDF-1α的诱导表达和分离纯化 | 第17-33页 |
·实验思路 | 第17-23页 |
·工程菌的诱导表达 | 第17-18页 |
·层析方法的选择 | 第18-22页 |
·离子交换层析 | 第18-21页 |
·凝胶排阻层析 | 第21-22页 |
·蛋白电泳 | 第22-23页 |
·实验材料 | 第23-25页 |
·菌种及层析柱 | 第23页 |
·实验试剂 | 第23页 |
·仪器设备 | 第23页 |
·培养基及主要试剂配制 | 第23-25页 |
·实验方法 | 第25-28页 |
·冷冻菌种培养、诱导表达 | 第25页 |
·菌体破碎 | 第25页 |
·变性和复性 | 第25-26页 |
·SP-Sepharose Fast Flow阳离子交换 | 第26页 |
·凝胶排阻 | 第26页 |
·脱盐和冻干 | 第26-27页 |
·蛋白电泳 | 第27-28页 |
·实验结果与讨论 | 第28-32页 |
·SP-Sepharose Fast Flow阳离子交换结果 | 第28-29页 |
·凝胶排阻结果 | 第29-30页 |
·蛋白电泳结果 | 第30-32页 |
·重组菌E.Coli BL21(DE3)/pET15b-SDF-1α的表达 | 第30-31页 |
·两步层析分离的电泳检测 | 第31-32页 |
·本章小结 | 第32-33页 |
第四章 重组蛋白SDF-1α的检测 | 第33-40页 |
·实验思路 | 第33-34页 |
·纯度和浓度 | 第33页 |
·活性 | 第33-34页 |
·实验材料 | 第34-35页 |
·细胞和试剂 | 第34页 |
·仪器设备 | 第34页 |
·培养基及试剂配制 | 第34-35页 |
·实验方法 | 第35-36页 |
·SDS-PAGE蛋白电泳和高效凝胶色谱 | 第35页 |
·Bradford法测量蛋白浓度 | 第35页 |
·Transwell细胞小室实验 | 第35-36页 |
·实验结果与讨论 | 第36-39页 |
·SDF-1α的分离纯化结果 | 第36-37页 |
·重组SDF-1α的活性鉴定结果 | 第37-39页 |
·本章小结 | 第39-40页 |
结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-49页 |
致谢 | 第49页 |