摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
缩略语 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-23页 |
1. 霍乱 | 第11-12页 |
·霍乱简介 | 第11页 |
·霍乱的流行概况 | 第11-12页 |
2. 霍乱弧菌 | 第12-17页 |
·霍乱弧菌简介及分类 | 第12页 |
·霍乱弧菌基因组学 | 第12-13页 |
·霍乱弧菌毒力因子 | 第13-16页 |
·霍乱弧菌毒力基因的表达调控 | 第16-17页 |
3. LysR家族转录调控蛋白 | 第17-23页 |
·LysR家族转录调控蛋白的结构和功能 | 第18-19页 |
·LysR家族转录调控蛋白的调控模式 | 第19-20页 |
·霍乱弧菌AphB蛋白 | 第20-23页 |
第二章 霍乱弧菌AphB氧不敏感突变株的筛选 | 第23-37页 |
1. 材料与方法 | 第24-32页 |
·菌株与质粒 | 第24-25页 |
·培养基与培养条件 | 第25页 |
·实验用酶及试剂 | 第25页 |
·常规实验方法 | 第25-28页 |
·aphB基因突变子文库的建立 | 第28页 |
·AphB氧不敏感突变株的筛选 | 第28-29页 |
·利用over-lapping PCR方法进行定点突变 | 第29-31页 |
·筛选到的AphB氧不敏感突变子在霍乱弧菌中的验证 | 第31-32页 |
2. 结果与分析 | 第32-36页 |
·AphB氧不敏感突变株的筛选及功能分析 | 第32-33页 |
·AphB氧不敏感突变株在△aphB缺失突变株中的验证 | 第33-36页 |
3. 小结与讨论 | 第36-37页 |
第三章 AphB氧不敏感突变的机理研究 | 第37-49页 |
1. 材料与方法 | 第39-44页 |
·菌株与质粒 | 第39-40页 |
·培养基与培养条件 | 第40页 |
·实验用酶及试剂 | 第40页 |
·显色实验用试剂及配方 | 第40页 |
·实验常规方法 | 第40-42页 |
·T25和T18融合突变aphB基因的重组质粒的构建 | 第42-43页 |
·细菌双杂交实验方法 | 第43-44页 |
2. 结果与分析 | 第44-47页 |
·T25和T18融合突变aphB基因的重组质粒的构建 | 第44-45页 |
·细菌双杂交实验 | 第45-47页 |
3. 小结与讨论 | 第47-49页 |
第四章 AphB蛋白晶体结构的研究 | 第49-63页 |
1. 材料与方法 | 第50-57页 |
·菌株与质粒 | 第50页 |
·培养基与培养条件 | 第50页 |
·实验用试剂及仪器 | 第50-51页 |
·实验试剂的配制方法 | 第51-54页 |
·AphB C-terminal His-tag融合蛋白的表达、纯化 | 第54-56页 |
·AphB C-terminal截短型蛋白的结晶获得 | 第56-57页 |
2. 结果与分析 | 第57-62页 |
·AphB C-terminal截短型蛋白纯化结果 | 第57-61页 |
·AphB C-terminal截短型蛋白的结晶结果 | 第61-62页 |
3. 小结与讨论 | 第62-63页 |
全文总结 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-71页 |
致谢 | 第71页 |