| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-22页 |
| ·生物冶金的研究进展及浸矿微生物种类 | 第11页 |
| ·半胱氨酸脱硫酶的研究进展及分类 | 第11-13页 |
| ·半胱氨酸脱硫酶的反应机理及结构 | 第13-15页 |
| ·半胱氨酸脱硫酶的功能 | 第15-20页 |
| ·铁硫簇的组装 | 第15-18页 |
| ·硫醇的合成 | 第18页 |
| ·生物素和硫辛酸的合成 | 第18-19页 |
| ·铁代谢(suf基因簇) | 第19-20页 |
| ·蛋白质相互作用技术 | 第20页 |
| ·本文的研究的目的意义及研究内容 | 第20-21页 |
| ·本文研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| ·本文研究的内容 | 第21页 |
| ·本论文课题资助情况 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-39页 |
| ·实验材料 | 第22-28页 |
| ·样品 | 第22页 |
| ·菌株 | 第22页 |
| ·载体 | 第22页 |
| ·试剂盒 | 第22页 |
| ·工具酶 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·引物合成 | 第23页 |
| ·构建质粒列表 | 第23页 |
| ·抗体列表 | 第23-25页 |
| ·培养基及主要溶液 | 第25-28页 |
| ·基本方法 | 第28-39页 |
| ·细菌基因组DNA的提取 | 第28页 |
| ·PCR反应系统包括 | 第28-29页 |
| ·菌落PCR | 第29页 |
| ·从琼脂糖凝胶上回收DNA片段 | 第29页 |
| ·连接反应 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第30页 |
| ·转化 | 第30页 |
| ·重组质粒的构建 | 第30-32页 |
| ·原核表达重组子的构建 | 第32页 |
| ·融合蛋白的表达及纯化 | 第32-34页 |
| ·变性蛋白的透析复性 | 第34-35页 |
| ·多克隆抗体的制备方法 | 第35页 |
| ·Western blot | 第35-36页 |
| ·生长曲线的测定 | 第36页 |
| ·免疫共沉淀 | 第36页 |
| ·GST-pull down | 第36-37页 |
| ·酶活的测定 | 第37-39页 |
| 第三章 氧化亚铁硫杆菌半胱氨酸脱硫酶的克隆表达和功能鉴定 | 第39-54页 |
| ·结果与分析 | 第39-52页 |
| ·半胱氨酸脱硫酶(cysteine desulfurase IscS)的分析及克隆 | 第39-42页 |
| ·cysteine desulfurase IscS原核表达载体的构建 | 第42-43页 |
| ·cysteine desulfurase IscS促进细菌生长试验 | 第43-46页 |
| ·半胱氨酸脱硫酶(cysteine desulfurase IscS)在硫代谢中的作用 | 第46-47页 |
| ·半胱氨酸脱硫酶(cysteine desulfurase IscS)的蛋白相互作用 | 第47-52页 |
| ·小结与讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 嗜酸硫化芽孢杆菌半胱氨酸脱硫酶的克隆表达和功能鉴定 | 第54-69页 |
| ·结果与分析 | 第54-67页 |
| ·半胱氨酸脱硫酶(cysteine desulfurase SufS)的分析及克隆 | 第54-57页 |
| ·cysteine desulfurase SufS原核表达载体的构建 | 第57-59页 |
| ·cysteine desulfurase SufS促进细菌生长试验 | 第59-63页 |
| ·cysteine desulfurase SufS酶活的测定 | 第63-65页 |
| ·半胱氨酸脱硫酶(cysteine desulfurase SufS)在硫代谢中的作用 | 第65-66页 |
| ·半胱氨酸脱硫酶(cysteine desulfurase SufS)的蛋白相互作用 | 第66-67页 |
| ·小结与讨论 | 第67-69页 |
| 第五章 全文总结与展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 硕士期间研究成果 | 第79页 |
