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氯嘧磺隆降解及其对土壤微生态影响的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-17页
1 绪论第17-33页
   ·磺酰脲类除草剂的使用情况简介第17-20页
     ·磺酰脲类除草剂的作用机理第17-18页
     ·磺酰脲类除草剂的种类第18页
     ·磺酰脲类除草剂在应用中出现的问题第18-19页
     ·磺酰脲类除草剂的降解第19-20页
   ·农药残留的微生物修复第20-22页
     ·应用在农药降解中的微生物种类第20页
     ·微生物降解除草剂的机理第20-22页
     ·微生物修复存在的问题和展望第22页
   ·氯嘧磺隆的应用及其降解第22-25页
     ·氯嘧磺隆简介第22-23页
     ·氯嘧磺隆的理化性质第23页
     ·氯嘧磺隆的作用特性第23页
     ·土壤中的状况及其后茬的安全性第23-24页
     ·氯嘧磺隆的检测方法第24-25页
     ·氯嘧磺隆降解菌的筛选第25页
   ·农药对土壤微生态的影响第25-28页
     ·农药对土壤微生物种群的影响第26页
     ·农药对土壤酶活性的影响第26-28页
   ·变性凝胶电泳(DGGE)在微生物微生态学上的应用第28-30页
     ·DGGE原理第28页
     ·DGGE在微生物生态学中的应用第28-29页
     ·DGGE技术的局限性第29-30页
     ·DGGE的前景展望第30页
   ·本研究的内容和技术路线第30-33页
     ·研究内容第30-31页
     ·技术路线第31-33页
2 降解菌株的筛选、分离与鉴定第33-55页
   ·试验材料和仪器第33-36页
     ·实验材料和试剂第33-35页
     ·培养基第35页
     ·仪器设备第35-36页
   ·氯密磺隆降解菌株的驯化、分离和降解率的测定方法第36-37页
     ·氯嘧磺隆降解菌株的驯化和分离第36页
     ·氯嘧磺隆含量的测定第36页
     ·氯嘧磺隆降解率的测定第36-37页
   ·降解菌株的鉴定第37-44页
     ·细菌菌株形态观察及生理生化实验鉴定第37页
     ·生理生化特征鉴定第37-38页
     ·分子序列分析第38-44页
   ·实验结果与分析第44-54页
     ·氯嘧磺隆降解菌株纯化与降解率测定的结果第44-48页
     ·菌株鉴定结果第48-54页
   ·本章小结第54-55页
3 氯嘧磺隆降解菌株的生长特性和降解特性的研究第55-67页
   ·材料及仪器第55页
   ·降解菌株的培养条件优化第55-56页
     ·菌落数-OD(600)标准曲线测定第55-56页
     ·菌株最适生长pH值测定第56页
     ·菌株最适生长温度测定第56页
     ·菌株最适转速测定第56页
     ·接种量对氯嘧磺隆高效降解细菌生长的影响第56页
     ·通气量对氯嘧磺隆高效降解细菌生长的影响第56页
     ·生长曲线的测定第56页
   ·降解特性的研究第56-57页
     ·温度对降解率的影响第56-57页
     ·初始pH对降解率的影响第57页
     ·接种量对降解率的影响第57页
     ·氯嘧磺隆初始浓度对降解率的影响第57页
     ·摇床转速对降解率的影响第57页
   ·模拟环境中菌株L3对氯嘧磺隆降解的影响第57-58页
     ·生物法测定菌株L3对氯嘧磺隆的降解第57-58页
     ·模拟土壤环境中菌株L3对氯嘧磺隆的降解第58页
   ·菌株生长条件的优化结果第58-62页
     ·菌株L3活菌数及OD值的关系第58-59页
     ·初始pH对菌株L3生长的影响第59页
     ·温度对菌株L3生长的影响第59-60页
     ·摇床转速对菌株L3生长的影响第60页
     ·接种量对菌株L3生长的影响第60页
     ·装液量对菌株L3生长的影响第60-61页
     ·菌株L3生长曲线的测定第61-62页
   ·菌株L3降解氯嘧磺隆条件的优化第62-66页
     ·温度对菌株L3降解氯嘧磺隆的影响第62页
     ·接种量对菌株L3降解氯嘧磺隆的影响第62-63页
     ·初始农药浓度对菌株L3降解氯嘧磺隆的影响第63页
     ·初始pH值对菌株L3降解氯嘧磺隆的影响第63-64页
     ·摇床转速对菌株L3降解氯嘧磺隆的影响第64页
     ·菌株L3对氯嘧磺隆降解曲线的绘制第64-65页
     ·生物测定法测定菌株L3对氯嘧磺隆的降解影响第65页
     ·土壤模拟实验菌株对氯嘧磺隆降解的影响第65-66页
   ·本章小结第66-67页
4 氯嘧磺隆降解酶的性质研究第67-76页
   ·材料与方法第67页
     ·材料和药品第67页
     ·仪器第67页
   ·实验方法第67-70页
     ·粗酶液的提取第67-68页
     ·氯嘧磺隆标准曲线第68页
     ·降解酶定位第68页
     ·蛋白标准曲线的测定第68-69页
     ·产酶曲线的测定第69页
     ·pH对粗酶液酶促反应的影响第69页
     ·温度对粗酶液酶促反应的影响第69页
     ·粗酶液的酸碱稳定性测定第69页
     ·粗酶液的热稳定性测定第69-70页
     ·金属离子对粗酶液的影响第70页
   ·结果分析第70-75页
     ·氯嘧磺隆标准曲线的测定第70页
     ·降解酶位置的确定第70-71页
     ·蛋白曲线的测定第71页
     ·菌株不同时间段内产酶和降解率的关系第71-72页
     ·温度对降解酶降解氯嘧磺隆的影响第72页
     ·pH值对氯嘧磺隆降解酶对氯嘧磺隆降解率的影响第72-73页
     ·恒温保存对降解酶活性的影响第73页
     ·pH保存对降解酶活性的影响第73-74页
     ·金属离子对降解酶活性的影响第74-75页
   ·本章小结第75-76页
5 氯嘧磺隆对土壤中微生态的影响第76-94页
   ·材料与方法第76-77页
     ·材料和药品仪器第76-77页
     ·土壤处理第77页
   ·土壤酶活性的测定方法第77-78页
     ·过氧化氢酶活性的测定第77页
     ·多酚氧化酶活性的测定第77页
     ·蛋白酶活性的测定第77-78页
     ·脲酶活性的测定第78页
     ·蔗糖酶活性的测定第78页
     ·脱氢酶活性的测定第78页
   ·氯嘧磺隆对土壤微生物的影响第78-79页
     ·土壤样品的处理第78页
     ·土壤微生物的测定第78-79页
   ·土壤细菌菌群的DGGE分析方法第79-82页
     ·土壤细菌基因组DNA提取第79-80页
     ·土壤基因组DNA16SrDNA片段的PCR扩增第80-81页
     ·变性凝胶电泳第81页
     ·染色第81页
     ·割胶回收第81-82页
     ·指纹图谱分析第82页
     ·克隆和序列分析第82页
   ·土壤酶测定结果分析第82-87页
     ·氯嘧磺隆对于土壤过氧化氢酶活性的影响第82-83页
     ·氯嘧磺隆对于土壤多酚氧化酶活性的影响第83-84页
     ·氯嘧磺隆对于土壤蛋白酶活性的影响第84-85页
     ·氯嘧磺隆对于土壤脲酶活性的影响第85页
     ·氯嘧磺隆对于土壤蔗糖酶活性的影响第85-86页
     ·氯嘧磺隆对于土壤脱氢酶活性的影响第86-87页
   ·氯嘧磺隆对土壤菌群的影响分析第87-88页
     ·氯嘧磺隆对土壤中细菌的影响第87页
     ·氯嘧磺隆对土壤中真菌的影响第87-88页
     ·氯嘧磺隆对土壤中放线菌的影响第88页
   ·土壤菌群的DGGE分析结果第88-92页
     ·土壤DNA提取结果第88-89页
     ·特异性引物的PCR扩增第89-90页
     ·氯嘧磺隆对土壤微生物群落结构的影响第90-92页
   ·本章小结第92-94页
结论第94-95页
参考文献第95-104页
攻读学位期间发表的学术论文第104-105页
致谢第105-106页

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