| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 目录 | 第10-14页 |
| 缩略词表 | 第14-16页 |
| 第一章 引言 | 第16-22页 |
| 第二章 食管癌细胞系 SOX17 基因的甲基化调控研究 | 第22-50页 |
| 第一节 前言 | 第22-23页 |
| 第二节 材料和方法 | 第23-37页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第23-24页 |
| ·主要仪器及设备 | 第24-25页 |
| ·缓冲液的制备 | 第25页 |
| ·细胞培养及总 RNA 提取 | 第25-26页 |
| ·SOX17 基因的表达检测 | 第26-28页 |
| ·食管癌细胞系 5-aza-dc 处理 | 第28页 |
| ·5-aza-dc 处理后细胞 RNA 提取及 SOX17 基因的表达检测 | 第28-29页 |
| ·细胞培养及基因组 DNA 提取 | 第29-30页 |
| ·甲基化特异性 PCR 的对照组的建立 | 第30-31页 |
| ·食管癌细胞系 DNA 的亚硫酸氢钠处理 | 第31-32页 |
| ·食管癌细胞系 SOX17 基因启动子区甲基化的检测 | 第32-33页 |
| ·食管癌细胞系 SOX17 基因的硫化测序分析 | 第33-37页 |
| 第三节 结果 | 第37-46页 |
| ·食管癌细胞系 SOX17 基因的表达检测 | 第37页 |
| ·食管癌细胞系 SOX17 基因启动子区甲基化检测 | 第37-44页 |
| ·食管癌细胞系 5-aza-dc 处理后 SOX17 基因的半定量 RT-PCR 检测 | 第44-46页 |
| 第四节 讨论 | 第46-49页 |
| 第五节 小结 | 第49-50页 |
| 第三章 正常食管粘膜、食管不典型增生及原发性食管癌 SOX17 基因启动子区甲基化检测 | 第50-68页 |
| 第一节 前言 | 第50-51页 |
| 第二节 材料和方法 | 第51-59页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第51页 |
| ·主要仪器及设备 | 第51-52页 |
| ·缓冲液的制备 | 第52页 |
| ·组织中基因组 DNA 的提取 | 第52-54页 |
| ·组织 DNA 的亚硫酸氢钠处理 | 第54-55页 |
| ·人正常食管粘膜、食管不典型增生和原发性食管癌组织中 SOX17 基因甲基化状态的检测 | 第55-58页 |
| ·数值计算及统计学分析 | 第58-59页 |
| 第三节 结果 | 第59-65页 |
| 第四节 讨论 | 第65-67页 |
| 第五节 小结 | 第67-68页 |
| 第四章 人原发性食管癌及癌旁食管组织 SOX17 基因和β-catenin 基因的表达研究 | 第68-78页 |
| 第一节 前言 | 第68-70页 |
| 第二节 材料和方法 | 第70-73页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第70页 |
| ·主要仪器及设备 | 第70页 |
| ·溶液的配制 | 第70-71页 |
| ·IHC 检测人原发性食管癌及癌旁食管组织 SOX17 基因和β-catenin 基因的表达 | 第71-73页 |
| 第三节 结果 | 第73-76页 |
| 第四节 讨论 | 第76-77页 |
| 第五节 小结 | 第77-78页 |
| 第五章 SOX17 基因在食管癌中的功能研究及对 WNT/β-catenin 信号通路的影响 | 第78-106页 |
| 第一节 前言 | 第78-80页 |
| 第二节 材料和方法 | 第80-96页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第80-81页 |
| ·主要仪器及设备 | 第81页 |
| ·试剂的配制 | 第81-82页 |
| ·SOX17 基因真核表达的构建 | 第82-87页 |
| ·瞬时转染及克隆形成实验 | 第87-89页 |
| ·双荧光素酶报告检测系统分析 SOX17 基因对经典 WNT/β-catenin 信号通路的影响 | 第89-91页 |
| ·Western Blot 方法分析 SOX17 基因对经典 WNT/β-catenin 信号通路的影响 | 第91-96页 |
| 第三节 结果 | 第96-102页 |
| ·SOX17 基因对食管癌 KYSE140 细胞的克隆形成能力的影响 | 第96-97页 |
| ·SOX17 基因对经典 WNT/β-catenin 信号通路的影响 | 第97-102页 |
| 第四节 讨论 | 第102-105页 |
| 第五节 小结 | 第105-106页 |
| 第六章 miRNAs 对 SOX17 基因表达的调控作用 | 第106-129页 |
| 第一节 前言 | 第106-107页 |
| 第二节 材料和方法 | 第107-122页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第107-108页 |
| ·主要仪器及设备 | 第108页 |
| ·试剂的配制 | 第108-109页 |
| ·SOX17 基因的 3’非翻译区的野生型和突变型表达载体的构建 | 第109-113页 |
| ·细胞培养、瞬时转染和双荧光素酶报告基因检测 | 第113-114页 |
| ·Western Blot 方法检测调控 SOX17 基因表达的 miRNA | 第114-118页 |
| ·Real-time PCR 检测 miRNAs 的表达 | 第118-122页 |
| 第三节 结果 | 第122-126页 |
| 第四节 讨论 | 第126-128页 |
| 第五节 小结 | 第128-129页 |
| 第七章 结论 | 第129-130页 |
| 参考文献 | 第130-139页 |
| 致谢 | 第139-141页 |
| 个人简历，在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第141-143页 |
| 附录 A | 第143-153页 |
| 附录 B | 第153-178页 |
| 附录 C | 第178-200页 |
