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新型鸭呼肠孤病毒的鉴定及其全基因组序列解析

中文摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-12页
附表和插图清单第12-13页
英文缩略表第13-14页
文献综述第14-21页
1 引言第21-22页
2 材料与方法第22-34页
   ·材料第22-23页
     ·样品采集第22页
     ·SPF 鸡胚与实验动物第22页
     ·细胞系第22页
     ·主要试剂及试剂盒第22页
     ·主要溶液及培养基的配制第22-23页
     ·主要仪器第23页
   ·方法第23-34页
     ·鸭源呼肠孤病毒的分离与生物学鉴定第23-29页
       ·病料的采集及处理第24页
       ·病毒的 SPF 鸡胚分离第24页
       ·病毒鸡胚半数致死量(ELD50)的测定第24页
       ·动物回归试验第24页
       ·常见鸭病毒病的检测第24页
       ·血凝试验第24页
       ·有机溶剂敏感性试验第24页
       ·病毒的核酸类型鉴定第24-25页
       ·病毒的纯化第25-26页
       ·电镜负染色观察第26页
       ·RT-PCR 检测及序列进化分析第26-29页
     ·病毒在 BHK-21 细胞系上的增殖特性研究第29-30页
       ·病毒在 BHK-21 细胞系上的适应性试验第29页
       ·病毒细胞半数致死量(TCID50)测定第29页
       ·RT-PCR 检测第29页
       ·Western blot 检测第29-30页
       ·IFA 检测第30页
       ·一步生长曲线绘制第30页
     ·动物致病性试验第30-32页
       ·麻鸭致病性试验第30页
       ·病理组织切片观察第30-31页
       ·免疫组织化学检测第31页
       ·SPF 鸡致病性试验第31-32页
     ·鸭源呼肠孤病毒全基因组序列测定及分析第32-34页
       ·引物的设计与合成第32-33页
       ·病毒 RNA 的提取第33页
       ·cDNA 的合成第33页
       ·PCR 扩增第33-34页
       ·RT-PCR 产物的纯化第34页
       ·纯化产物与 PMD-19T 载体的连接与转化第34页
       ·阳性克隆的挑选与鉴定第34页
       ·阳性质粒的提取第34页
       ·基因序列测定第34页
       ·病毒基因组结构的分析、基因组序列相似性分析及系统进化分析第34页
3 结果与分析第34-50页
   ·鸭源呼肠孤病毒的分离与生物学鉴定第34-37页
     ·病毒的 SPF 鸡胚分离结果第34页
     ·病毒鸡胚半数致死量(ELD50)的测定第34-35页
     ·动物回归实验第35页
     ·常见鸭病毒病的检测第35页
     ·病毒的血凝试验结果第35页
     ·病毒的有机溶剂敏感性试验结果第35页
     ·病毒的核酸类型鉴定第35页
     ·病毒的电镜观察结果第35页
     ·病毒基因组 S2 节段部分序列的扩增第35-36页
     ·核酸同源性分析及系统进化分析第36-37页
   ·病毒在 BHK-21 细胞系中的增殖特性研究第37-41页
     ·病毒适应 BHK-21 细胞系第37页
     ·病毒 TCID50 测定第37页
     ·RT-PCR 检测第37-40页
     ·Western blot 检测结果第40页
     ·IFA 检测结果第40-41页
     ·病毒在 BHK-21 细胞中的增殖规律第41页
   ·DRVTH11 株病毒对动物致病性试验第41-44页
     ·麻鸭致病性实验第41-42页
     ·组织病理学观察及免疫组化结果第42-43页
     ·SPF 鸡致病性实验第43-44页
   ·鸭源呼肠孤病毒全基因组序列测定及分析第44-50页
     ·DRV TH11 株病毒全基因序列的测定第44页
     ·DRV TH11 株病毒基因组结构的分析第44-45页
     ·DRV TH11 株病毒与 MDRV 及 ARV 同源性分析第45-47页
     ·DRV TH11 株病毒系统进化分析第47-50页
4 讨论第50-51页
5 结论第51-52页
参考文献第52-57页
致谢第57-58页
作者简介第58页
在读期间发表的学术论文第58页

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