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Asial型口蹄疫病毒宿主嗜性变异的分子基础

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 绪论第14-35页
   ·研究背景、目的和意义第14-15页
   ·国内外研究进展第15-33页
     ·FMD 概述第15-16页
     ·FMD 流行现状第16-20页
     ·FMDV 基因组结构和蛋白第20-23页
     ·FMDV 的细胞入侵和基因组复制第23页
     ·FMDV 的进化变异第23-25页
     ·FMDV 嗜性和宿主范围第25-26页
     ·FMDV 的整联蛋白受体第26-31页
     ·FMDV 的 HS 受体第31-33页
   ·研究内容和方法第33-35页
     ·含有不同受体结合位点毒株的鉴定和分析第33页
     ·含不同受体结合位点的 Asia 1 型 FMDV 的制备和表型差异分析第33页
     ·含不同受体结合位点的 Asia 1 型 FMDV 对猪和牛的致病性第33-34页
     ·含不同受体结合位点的 Asia 1 型 FMDV 对受体的识别与比较分析第34-35页
第二章 猪源 Asia 1 FMDV 的全长 cDNA 的序列测定和分析第35-42页
 摘要第35页
   ·材料第35-37页
     ·实验材料第35-36页
     ·试剂耗材第36页
     ·参考毒株的基因组信息第36-37页
   ·方法第37-38页
     ·引物合成第37页
     ·病毒 RNA 的制备第37-38页
     ·全长 cDNA 的扩增第38页
     ·序列比较和系统发生树分析第38页
   ·结果第38-40页
     ·全基因组的扩增第38-39页
     ·全基因组序列分析第39页
     ·氨基酸序列分析第39-40页
     ·系统发生树分析结果第40页
   ·讨论第40-42页
第三章 受体识别位点基序突变对 FMDV 细胞致病性的影响第42-50页
 摘要第42页
   ·材料与方法第42-45页
     ·菌株、质粒与细胞第42-43页
     ·酶与试剂第43页
     ·引物设计第43页
     ·含不同受体识别基序的全长 cDNA 的构建第43-44页
     ·含不同受体识别基序的全长 cDNA 的病毒拯救第44页
     ·拯救病毒对不同宿主来源细胞的致病性第44-45页
   ·结果第45-48页
     ·含不同受体识别基序的全长 cDNA 的构建第45页
     ·含不同受体识别基序的病毒拯救第45-46页
     ·拯救病毒的 RT-PCR 鉴定及稳定性分析第46页
     ·拯救病毒的间接免疫荧光鉴定结果第46页
     ·拯救病毒的 LD50第46-47页
     ·拯救病毒的 TCID50第47页
     ·病毒在不同宿主来源细胞上的蚀斑形成能力第47-48页
     ·病毒在不同宿主来源细胞上的复制能力第48页
   ·讨论第48-50页
第四章 含有不同受体基序毒株对猪和牛的致病性差异的比较第50-58页
 摘要第50-51页
   ·材料和方法第51-52页
     ·毒株第51页
     ·实验动物第51页
     ·检测试剂第51页
     ·分组和攻毒第51页
     ·临床症状第51页
     ·血毒症测定第51-52页
     ·抗体应答测定第52页
   ·结果第52-56页
     ·不同毒株肌肉注射猪和牛体温测定结果第52-53页
     ·不同毒株喷雾感染猪和牛体温测定结果第53-54页
     ·注射感染猪和牛的临床症状第54-55页
     ·喷雾感染猪和牛的临床症状第55页
     ·血毒症测定结果第55-56页
     ·抗体应答结果第56页
   ·讨论第56-58页
第五章 含有不同受体基序毒株对细胞受体的识别与利用第58-79页
 摘要第58-59页
   ·材料与方法第59-66页
     ·实验材料第59页
     ·主要试剂第59页
     ·FMDV 受体亚基基因的克隆第59-60页
     ·受体亚基基因胞外域的原核表达及其抗体的制备第60-61页
     ·稳定表达 FMDV 整联蛋白受体细胞系的建立第61-64页
     ·共聚焦观察整联蛋白的表达和病毒的入侵第64页
     ·含不同受体识别基序毒株对整联蛋白和 HS 的识别与利用第64-65页
     ·含不同受体识别基序毒株对第三路径的利用第65-66页
   ·结果第66-77页
     ·目的基因的获得第66页
     ·受体亚基基因胞外域的原核表达及其抗体的制备第66-68页
     ·慢病毒双表达载体的构建与鉴定第68页
     ·稳定表达整联蛋白细胞系的建立及鉴定第68-71页
     ·共聚焦显微镜观察结果第71-73页
     ·比较 rRGD、rRDD 和 rRSD 对整联蛋白和 HS 的识别与利用差异第73-76页
     ·比较 rRGD、rRDD 和 rRSD 对第三路径的利用第76-77页
   ·讨论第77-79页
第六章 全文结论第79-80页
参考文献第80-91页
附录第91-102页
致谢第102-103页
作者简历第103页

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