摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
第一章 绪论 | 第14-35页 |
·研究背景、目的和意义 | 第14-15页 |
·国内外研究进展 | 第15-33页 |
·FMD 概述 | 第15-16页 |
·FMD 流行现状 | 第16-20页 |
·FMDV 基因组结构和蛋白 | 第20-23页 |
·FMDV 的细胞入侵和基因组复制 | 第23页 |
·FMDV 的进化变异 | 第23-25页 |
·FMDV 嗜性和宿主范围 | 第25-26页 |
·FMDV 的整联蛋白受体 | 第26-31页 |
·FMDV 的 HS 受体 | 第31-33页 |
·研究内容和方法 | 第33-35页 |
·含有不同受体结合位点毒株的鉴定和分析 | 第33页 |
·含不同受体结合位点的 Asia 1 型 FMDV 的制备和表型差异分析 | 第33页 |
·含不同受体结合位点的 Asia 1 型 FMDV 对猪和牛的致病性 | 第33-34页 |
·含不同受体结合位点的 Asia 1 型 FMDV 对受体的识别与比较分析 | 第34-35页 |
第二章 猪源 Asia 1 FMDV 的全长 cDNA 的序列测定和分析 | 第35-42页 |
摘要 | 第35页 |
·材料 | 第35-37页 |
·实验材料 | 第35-36页 |
·试剂耗材 | 第36页 |
·参考毒株的基因组信息 | 第36-37页 |
·方法 | 第37-38页 |
·引物合成 | 第37页 |
·病毒 RNA 的制备 | 第37-38页 |
·全长 cDNA 的扩增 | 第38页 |
·序列比较和系统发生树分析 | 第38页 |
·结果 | 第38-40页 |
·全基因组的扩增 | 第38-39页 |
·全基因组序列分析 | 第39页 |
·氨基酸序列分析 | 第39-40页 |
·系统发生树分析结果 | 第40页 |
·讨论 | 第40-42页 |
第三章 受体识别位点基序突变对 FMDV 细胞致病性的影响 | 第42-50页 |
摘要 | 第42页 |
·材料与方法 | 第42-45页 |
·菌株、质粒与细胞 | 第42-43页 |
·酶与试剂 | 第43页 |
·引物设计 | 第43页 |
·含不同受体识别基序的全长 cDNA 的构建 | 第43-44页 |
·含不同受体识别基序的全长 cDNA 的病毒拯救 | 第44页 |
·拯救病毒对不同宿主来源细胞的致病性 | 第44-45页 |
·结果 | 第45-48页 |
·含不同受体识别基序的全长 cDNA 的构建 | 第45页 |
·含不同受体识别基序的病毒拯救 | 第45-46页 |
·拯救病毒的 RT-PCR 鉴定及稳定性分析 | 第46页 |
·拯救病毒的间接免疫荧光鉴定结果 | 第46页 |
·拯救病毒的 LD50 | 第46-47页 |
·拯救病毒的 TCID50 | 第47页 |
·病毒在不同宿主来源细胞上的蚀斑形成能力 | 第47-48页 |
·病毒在不同宿主来源细胞上的复制能力 | 第48页 |
·讨论 | 第48-50页 |
第四章 含有不同受体基序毒株对猪和牛的致病性差异的比较 | 第50-58页 |
摘要 | 第50-51页 |
·材料和方法 | 第51-52页 |
·毒株 | 第51页 |
·实验动物 | 第51页 |
·检测试剂 | 第51页 |
·分组和攻毒 | 第51页 |
·临床症状 | 第51页 |
·血毒症测定 | 第51-52页 |
·抗体应答测定 | 第52页 |
·结果 | 第52-56页 |
·不同毒株肌肉注射猪和牛体温测定结果 | 第52-53页 |
·不同毒株喷雾感染猪和牛体温测定结果 | 第53-54页 |
·注射感染猪和牛的临床症状 | 第54-55页 |
·喷雾感染猪和牛的临床症状 | 第55页 |
·血毒症测定结果 | 第55-56页 |
·抗体应答结果 | 第56页 |
·讨论 | 第56-58页 |
第五章 含有不同受体基序毒株对细胞受体的识别与利用 | 第58-79页 |
摘要 | 第58-59页 |
·材料与方法 | 第59-66页 |
·实验材料 | 第59页 |
·主要试剂 | 第59页 |
·FMDV 受体亚基基因的克隆 | 第59-60页 |
·受体亚基基因胞外域的原核表达及其抗体的制备 | 第60-61页 |
·稳定表达 FMDV 整联蛋白受体细胞系的建立 | 第61-64页 |
·共聚焦观察整联蛋白的表达和病毒的入侵 | 第64页 |
·含不同受体识别基序毒株对整联蛋白和 HS 的识别与利用 | 第64-65页 |
·含不同受体识别基序毒株对第三路径的利用 | 第65-66页 |
·结果 | 第66-77页 |
·目的基因的获得 | 第66页 |
·受体亚基基因胞外域的原核表达及其抗体的制备 | 第66-68页 |
·慢病毒双表达载体的构建与鉴定 | 第68页 |
·稳定表达整联蛋白细胞系的建立及鉴定 | 第68-71页 |
·共聚焦显微镜观察结果 | 第71-73页 |
·比较 rRGD、rRDD 和 rRSD 对整联蛋白和 HS 的识别与利用差异 | 第73-76页 |
·比较 rRGD、rRDD 和 rRSD 对第三路径的利用 | 第76-77页 |
·讨论 | 第77-79页 |
第六章 全文结论 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-91页 |
附录 | 第91-102页 |
致谢 | 第102-103页 |
作者简历 | 第103页 |