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脱二氧喹赛多、脱二氧乙酰甲喹抗体制备及酶联免疫吸附检测方法的建立

摘要第1-11页
Abstract第11-13页
缩略语表第13-14页
第一章 文献综述第14-27页
   ·喹噁啉类药物的概况第14-15页
   ·喹赛多的研究进展第15-17页
     ·喹赛多及其理化性质第15页
     ·喹赛多的代谢研究第15-16页
     ·喹赛多的安全性研究第16-17页
     ·脱二氧喹赛多及其理化性质第17页
   ·喹赛多及其代谢产物检测方法研究进展第17-19页
     ·仪器检测方法第17-19页
       ·高效液相色谱法第17-18页
       ·液相色谱串联质谱法第18页
       ·液相色谱串联离子捕获时间飞行质谱法第18页
       ·超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱法第18-19页
       ·超高效液相色谱串联电喷雾质谱法第19页
     ·酶联免疫检测方法第19页
   ·乙酰甲喹的研究进展第19-22页
     ·乙酰甲喹及其理化性质第19-20页
     ·乙酰甲喹的代谢研究第20-21页
     ·乙酰甲喹的安全性研究第21-22页
     ·脱二氧乙酰甲喹及其理化性质第22页
   ·乙酰甲喹及其代谢产物检测方法研究进展第22-24页
     ·仪器检测方法第22-23页
       ·高效液相色谱法第22-23页
       ·液相色谱串联质谱法第23页
       ·超高效液相色谱串联质谱法第23页
       ·超声波辅助分散液-液微萃取联合高效液相色谱紫外检测法第23页
     ·酶联免疫吸附检测方法第23-24页
   ·免疫分析在兽药残留检测中的应用第24-25页
     ·酶联免疫吸附法第24页
     ·化学发光免疫法第24-25页
     ·电化学免疫法第25页
     ·量子点荧光免疫法第25页
     ·微阵列法第25页
     ·免疫层析试纸条法第25页
   ·选题目的和意义第25-27页
第二章 脱二氧喹赛多单克隆抗体制备第27-51页
   ·前言第27-28页
   ·实验材料第28-30页
     ·主要试剂材料第28-29页
     ·主要仪器设备第29页
     ·主要溶液配制第29-30页
   ·实验方法第30-41页
     ·脱二氧喹赛多完全抗原的制备第30-32页
       ·脱二氧喹赛多的肟化第31页
       ·免疫抗原的制备第31-32页
       ·检测抗原的制备第32页
     ·脱二氧喹赛多完全抗原的鉴定第32页
       ·质谱法鉴定免疫抗原第32页
       ·紫外扫描法鉴定检测抗原第32页
     ·小鼠免疫和多克隆抗体的制备第32-33页
     ·脱二氧喹赛多多克隆抗体的检测第33-35页
       ·方阵法确定最佳检测抗原浓度第33-34页
       ·间接ELISA测定多克隆抗体的效价第34页
       ·多克隆抗体间接竞争ELISA检测第34页
       ·多克隆抗体特异性分析第34-35页
     ·脱二氧喹赛多单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立第35-38页
       ·Sp2/0瘤细胞的复苏与传代培养第35页
       ·饲养细胞的制备第35-36页
       ·骨髓瘤细胞的制备第36页
       ·免疫脾细胞的制备第36页
       ·细胞融合及培养第36-37页
       ·阳性孔的筛选第37页
       ·阳性孔的克隆第37-38页
       ·杂交瘤细胞的冻存和复苏第38页
     ·脱二氧喹赛多单克隆抗体腹水的制备第38页
     ·脱二氧喹赛多单克隆抗体的纯化第38-39页
     ·脱二氧喹赛多单克隆抗体特性的鉴定第39-41页
       ·单克隆抗体蛋白浓度的测定第39页
       ·细胞培养上清和单克隆抗体效价的测定第39页
       ·单克隆抗体的亚型鉴定第39页
       ·单克隆抗体亲和力常数的测定第39-40页
       ·单克隆抗体的ic-ELISA检测第40页
       ·单克隆抗体特异性鉴定第40-41页
   ·结果与分析第41-50页
     ·免疫抗原MALDI-TOF-MS鉴定结果第41-42页
     ·检测抗原紫外扫描鉴定结果第42页
     ·脱二氧喹赛多多克隆抗体的检测结果第42-46页
       ·最佳检测抗原浓度的确定第42-43页
       ·多克隆抗体效价的测定第43-44页
       ·多克隆抗体间接竞争ELISA检测结果第44-45页
       ·多克隆抗体特异性结果第45-46页
     ·杂交瘤细胞株的建立第46页
     ·脱二氧喹赛多单克隆抗体的特性鉴定第46-50页
       ·单克隆抗体的浓度测定结果第46页
       ·细胞培养上清和单克隆抗体效价测定结果第46-47页
       ·单克隆抗体的亚型鉴定结果第47页
       ·单克隆抗体亲和常数测定结果第47-48页
       ·单克隆抗体间接竞争ELISA检测结果第48-49页
       ·单克隆抗体特异性鉴定结果第49-50页
   ·讨论第50-51页
第三章 脱二氧喹赛多单克隆抗体酶联免疫吸附检测法的建立第51-61页
   ·前言第51页
   ·实验材料第51-53页
     ·主要试剂材料第51-52页
     ·主要仪器设备第52页
     ·主要溶液配制第52-53页
   ·实验方法第53-55页
     ·间接竞争ELISA条件优化第53-54页
       ·检测抗原浓度优化第53页
       ·封阻液浓度的优化第53页
       ·二甲亚砜浓度优化第53页
       ·单克隆抗体稀释度优化第53页
       ·标品与单克隆抗体比例优化第53-54页
       ·竞争反应时间优化第54页
       ·二抗稀释度优化第54页
     ·间接竞争ELISA标准曲线的建立第54页
     ·样品加标处理第54-55页
     ·加标回收率检测第55页
   ·结果与分析第55-60页
     ·间接竞争ELISA工作条件的优化第55-59页
       ·检测抗原浓度优化结果第55-56页
       ·封阻液浓度优化结果第56页
       ·二甲亚砜浓度优化结果第56-57页
       ·单克隆抗体稀释度优化结果第57页
       ·标品与单克隆抗体比例优化结果第57-58页
       ·竞争反应时间优化结果第58页
       ·二抗稀释度优化结果第58-59页
     ·间接竞争ELISA标准曲线的建立第59页
     ·加标回收检测结果第59-60页
   ·讨论第60-61页
第四章 脱二氧乙酰甲喹多克隆抗体的制备第61-75页
   ·前言第61页
   ·实验材料第61-63页
     ·主要试剂材料第61-62页
     ·主要仪器设备第62-63页
     ·主要溶液配制第63页
   ·实验方法第63-68页
     ·脱二氧乙酰甲喹完全抗原的制备第63-64页
       ·脱二氧乙酰甲喹的肟化第64页
       ·脱二氧乙酰甲喹与BSA、OVA的偶联第64页
     ·脱二氧乙酰甲喹完全抗原的鉴定第64-65页
       ·质谱法鉴定免疫抗原第64页
       ·紫外扫描法鉴定检测抗原第64-65页
     ·小鼠免疫和多克隆抗体的制备第65页
     ·脱二氧乙酰甲喹多克隆抗体的检测第65-67页
       ·方阵法确定最佳检测抗原浓度第65-66页
       ·多克隆抗体效价检测第66页
       ·多克隆抗体间接竞争ELISA检测第66-67页
       ·多克隆抗体特异性分析第67页
     ·脱二氧乙酰甲喹多克隆抗体加标回收检测第67-68页
   ·结果与分析第68-73页
     ·免疫抗原MALDI-TOF-MS鉴定结果第68-69页
     ·检测抗原紫外扫描鉴定结果第69页
     ·脱二氧乙酰甲喹多克隆抗体的检测结果第69-73页
       ·最佳检测抗原浓度的确定第69-70页
       ·多克隆抗体效价的测定第70-71页
       ·多克隆抗体间接竞争ELISA检测结果第71-72页
       ·多克隆抗体特异性结果第72-73页
     ·脱二氧乙酰甲喹多克隆抗体加标回收检测结果第73页
   ·讨论第73-75页
第五章 总结与展望第75-76页
   ·总结第75页
   ·创新点第75页
   ·展望第75-76页
硕士研究生期间论文发表情况第76-77页
参考文献第77-85页
致谢第85页

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