摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
縮略语表 | 第14-16页 |
1 前言 | 第16-20页 |
·研究背景 | 第16-18页 |
·研究思路 | 第18-19页 |
·研究目的和意义 | 第19-20页 |
2 材料和方法 | 第20-42页 |
·细胞株 | 第20页 |
·实验动物 | 第20页 |
·药品和试剂 | 第20-22页 |
·主要仪器和设备 | 第22-23页 |
·溶液配制 | 第23-26页 |
·细胞的复苏、传代与冻存 | 第26页 |
·猪原代肝细胞的分离与培养 | 第26-27页 |
·亚细胞器的分离 | 第27-30页 |
·猪肝组织亚细胞器的分离 | 第27-28页 |
·肝细胞亚细胞器的分离 | 第28-30页 |
·蛋白浓度的测定 | 第30-31页 |
·亚细胞组分活性的鉴定 | 第31-32页 |
·在体实验 | 第32-33页 |
·离体实验 | 第33-36页 |
·~3H-CYA在猪原代肝细胞中的分布 | 第33页 |
·饱和实验 | 第33-34页 |
·竞争抑制实验 | 第34页 |
·细胞内第二信使测定 | 第34-36页 |
·喹赛多代谢物的检测 | 第36-37页 |
·自由基(ROS)测定 | 第37-38页 |
·细胞内ROS测定 | 第37-38页 |
·细胞上清O_2~-测定 | 第38页 |
·实时荧光定量PCR检测相关基因的mRNA的表达 | 第38-41页 |
·总RNA的提取 | 第38-39页 |
·总RNA纯度及完整性的检测 | 第39页 |
·逆转录反应 | 第39页 |
·实时荧光定量PCR检测目的基因mRNA表达水平 | 第39-41页 |
·统计学分析 | 第41-42页 |
3 结果 | 第42-60页 |
·HL-7702细胞的培养 | 第42页 |
·猪原代肝细胞的培养 | 第42-43页 |
·BCA法测得的亚细胞器蛋白浓度 | 第43-44页 |
·标志性酶在亚细胞器中的分布 | 第44-45页 |
·~3H-CYA在猪肝脏中的分布 | 第45-46页 |
·猪原代肝细胞各个亚细胞器~3H-CYA的分布 | 第46-49页 |
·~3H-CYA与结合蛋白的结合特性 | 第49-51页 |
·~3H-CYA与原代肝细胞和亚细胞器的饱和实验 | 第49-50页 |
·~3H-CYA与喹赛多主要代谢物的竞争抑制试验 | 第50-51页 |
·CYA作用L02和猪原代肝细胞之后第二信使变化 | 第51-53页 |
·CYA作用L02和猪原代肝细胞之后cAMP变化 | 第51-52页 |
·CYA作用L02和猪原代肝细胞后Ca~(2+)变化 | 第52-53页 |
·CYA作用L02和猪原代肝细胞后IP3和DAG变化 | 第53页 |
·喹赛多在原代肝细胞内代谢物的鉴定 | 第53-56页 |
·喹赛多对猪原代肝细胞内自由基释放的时效量效关系 | 第56-57页 |
·抗氧化剂作用下喹赛多对EGF基因mRNA水平的影响 | 第57-60页 |
·RNA浓度的测定 | 第57-58页 |
·RNA质量的鉴定 | 第58页 |
·抗氧化剂作用下EGF基因mRNA的表达变化 | 第58-60页 |
4 讨论 | 第60-65页 |
·原代肝细胞分离条件选择 | 第60页 |
·猪肝组织喹赛多结合蛋白的定位及结合特性研究 | 第60-62页 |
·喹赛多在猪肝脏结合蛋白的定位 | 第60-61页 |
·喹赛多与结合蛋白结合特性 | 第61-62页 |
·喹赛多上调EGF基因表达的可能作用机理 | 第62-64页 |
·喹赛多在猪肝脏结合蛋白的推测 | 第64-65页 |
5 全文总结 | 第65-66页 |
文献综述 | 第66-81页 |
参考文献 | 第81-92页 |
致谢 | 第92-93页 |
附录 | 第93-96页 |