抗除草剂基因DsALS转化拟南芥和甘蓝型油菜的研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 縮略词表(Abbreviation) | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-22页 |
| ·我国油菜的生产现状及存在问题 | 第10页 |
| ·转基因技术在油菜遗传改良中的应用 | 第10-12页 |
| ·油菜品质改良 | 第10-11页 |
| ·油菜抗性改良 | 第11-12页 |
| ·ALS与ALS抑制剂的研究进展 | 第12-14页 |
| ·ALS与ALS抑制剂 | 第12页 |
| ·ALS氨基酸序列中与抗除草剂相关的位点 | 第12-13页 |
| ·抗除草剂ALS突变基因在播娘蒿中的研究进展 | 第13-14页 |
| ·表达载体构建的方法 | 第14-16页 |
| ·传统的载体构建方法 | 第14-15页 |
| ·Gateway技术 | 第15-16页 |
| ·多基因表达载体的构建方法 | 第16页 |
| ·油菜转化的主要方法 | 第16-21页 |
| ·直接转化法 | 第17-18页 |
| ·农杆菌介导法 | 第18-21页 |
| ·研究目的与意义 | 第21-22页 |
| 2 材料和方法 | 第22-36页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·载体和菌株 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·抗生素,激素及其它试剂的浓度和配置方法 | 第22-23页 |
| ·转化培养基的配制方法 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-36页 |
| ·DsALS基因的克隆 | 第24-27页 |
| ·转化载体的构建 | 第27-28页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第28-31页 |
| ·转化植株的分子水平检测 | 第31-34页 |
| ·转化植株的抗性鉴定 | 第34-36页 |
| 3 结果和分析 | 第36-51页 |
| ·DsALS基因的克隆 | 第36-40页 |
| ·真核表达载体鉴定 | 第40-42页 |
| ·pBI121-DsALS载体的验证 | 第40-41页 |
| ·pCAMBIA3301-DsALS载体的验证 | 第41-42页 |
| ·DsALS转化拟南芥和甘蓝型油菜 | 第42-43页 |
| ·转化植株分子的水平检测 | 第43-45页 |
| ·PCR鉴定 | 第43-45页 |
| ·RT-PCR鉴定 | 第45页 |
| ·抗性鉴定 | 第45-51页 |
| ·转基因拟南芥的抗性鉴定 | 第45-46页 |
| ·转基因甘蓝型油菜的抗性鉴定 | 第46-51页 |
| 4 讨论 | 第51-54页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥转化和甘蓝型油菜转化 | 第51页 |
| ·影响转化效率的因素 | 第51-52页 |
| ·农杆菌介导获得转ALS油菜的意义 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 致谢 | 第62页 |