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嗜热四膜虫金属硫蛋白MTT1和MTT2的重组表达和功能分析

中文摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
第一章 文献综述第12-22页
   ·金属硫蛋白的研究进展第12-18页
     ·金属硫蛋白的理化性质第12页
     ·金属硫蛋白的结构第12-13页
     ·金属硫蛋白的调控第13-15页
     ·金属硫蛋白的功能第15-18页
   ·嗜热四膜虫金属硫蛋白的研究进展第18-20页
     ·嗜热四膜虫第18-19页
     ·嗜热四膜虫是研究金属硫蛋白的良好模式生物第19-20页
   ·本项研究工作的目的和意义第20-22页
第二章 嗜热四膜虫金属硫蛋白MTT1和MTT2在大肠杆菌中的重组表达及活性分析第22-32页
   ·材料第22-24页
     ·菌株和质粒第22页
     ·试剂与工具酶第22-23页
     ·主要实验仪器第23页
     ·主要试剂配制第23-24页
   ·方法第24-27页
     ·MTT1和MTT2基因的克隆第24-25页
     ·pGEX-MTT1和pGEX-MTT2表达载体的构建第25-26页
     ·GST-MTT1和GST-MTT2在大肠杆菌中的表达分析第26页
     ·大肠杆菌BL21/pGEX-MTT1和BL21/pGEX-MTT2的细胞增殖分析第26-27页
   ·结果第27-31页
     ·MTT1和MTT2基因的克隆第27页
     ·pGEX-MTT1和pGEX-MTT2表达载体的构建第27-28页
     ·融合蛋白GST-MTT1和GST-MTT2在大肠杆菌中的表达第28页
     ·大肠杆菌BL21/pGEX-MTT1和BL21/pGEX-MTT2对Cd~(2+)和Cu~(2+)的耐受性第28-31页
   ·讨论第31-32页
第三章 嗜热四膜虫中两类不同金属硫蛋白的功能补偿分析第32-50页
   ·材料第32-33页
     ·菌株和质粒第32页
     ·试剂与工具酶第32-33页
     ·主要实验仪器第33页
     ·主要试剂配制第33页
   ·方法第33-42页
     ·嗜热四膜虫敲除载体pN-MTT1-3和pN-MTT2-4的构建第33-37页
     ·嗜热四膜虫细胞的转化、筛选和鉴定第37-41页
     ·△MTT1-MTT3和△MTT2-MTT4细胞株在Cd~(2+)、Cu~(2+)和H_2O_2胁迫下的生长比较第41-42页
     ·嗜热四膜虫突变体细胞中MTT1、MTT2、MTT3、MTT4和MTT5的表达分析第42页
   ·结果第42-48页
     ·嗜热四膜虫MTT家族基因的序列分析第42-43页
     ·嗜热四膜虫敲除载体pN-MTT1-3和pN-MTT2-4的构建第43-44页
     ·△MTT1-MTT3和△MTT2-MTT4突变体细胞株的构建与鉴定第44-46页
     ·△MTT1-MTT3和△MTT2-MTT4突变体细胞在Cd~(2+)、Cu~(2+)和H_2O_2下的增殖比较第46-47页
     ·两类MT家族基因在△MTT1-MTT3和△MTT2-MTT4突变体细胞中的表达变化第47-48页
   ·讨论第48-50页
总结与展望第50-52页
附录第52-54页
参考文献第54-61页
攻读学位期间取得的研究成果第61-62页
致谢第62-63页
个人简况及联系方式第63-65页

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