| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-21页 |
| ·我国对虾养殖产业的发展现状 | 第12页 |
| ·提高对虾抗病毒能力的研究尝试 | 第12-14页 |
| ·抗病毒育种 | 第13页 |
| ·抗病毒药剂的研究 | 第13页 |
| ·基于 RNA 干扰的对虾抗病毒研究 | 第13-14页 |
| ·RNA 干扰的基本原理 | 第14-18页 |
| ·dsRNA 前体的加工 | 第14-15页 |
| ·RNA 沉默效应复合体的组装 | 第15-16页 |
| ·mRNA 的切割和翻译抑制 | 第16-17页 |
| ·RNA 干扰的调节因子 | 第17-18页 |
| ·对虾上 RNA 干扰相关基因的研究 | 第18-20页 |
| ·Dicer 家族 | 第18-19页 |
| ·Argonaute 家族 | 第19页 |
| ·其他相关因子 | 第19-20页 |
| ·目前研究存在的问题 | 第20页 |
| ·研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-26页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·实验用虾 | 第21页 |
| ·菌株和载体 | 第21页 |
| ·酶，生化试剂和试剂盒 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-26页 |
| ·感受态细胞的制备及转化 | 第21-22页 |
| ·载体的构建 | 第22-23页 |
| ·体外转录 | 第23-24页 |
| ·HT115 细菌中内源性 dsRNA 的制备 | 第24-25页 |
| ·酚氯仿抽提法纯化 RNA | 第25页 |
| ·对虾组织总 RNA 的提取 | 第25页 |
| ·cDNA 的反转及实时定量研究 | 第25-26页 |
| 第三章 载体的构建及体外转录 dsRNA | 第26-30页 |
| ·体外转录载体的构建 | 第26-27页 |
| ·模板的制备及体外转录 dsRNA | 第27-30页 |
| 第四章 不同 dsRNA 刺激下对虾相关基因的表达变化 | 第30-43页 |
| ·不同 dsRNA 刺激下 RNA 干扰相关基因的表达变化情况 | 第30-34页 |
| ·不同 dsRNA 对靶基因的沉默效率及脱靶效应 | 第34-39页 |
| ·靶基因的沉默效率及影响因素 | 第34-36页 |
| ·dsRNA 造成的脱靶效应 | 第36-39页 |
| ·Rab7 基因在 RNA 干扰中的作用 | 第39-41页 |
| ·dsRNA 重复刺激下 RNA 干扰相关基因的应答情况 | 第41-43页 |
| 第五章 讨论 | 第43-47页 |
| ·dsRNA 在对虾中造成的脱靶效应 | 第43页 |
| ·影响基因沉默效率的因素 | 第43-44页 |
| ·靶基因存在与否对于 RISC 代谢的影响 | 第44-45页 |
| ·Rab7 在 RNA 干扰中的作用 | 第45页 |
| ·非特异性 dsRNA 诱导对虾抗病毒免疫的机制分析 | 第45-47页 |
| 第六章 结论与创新点 | 第47-48页 |
| ·结论 | 第47页 |
| ·不同 dsRNA 刺激下 RNA 干扰相关基因的表达变化规律不同 | 第47页 |
| ·不同靶基因的沉默效率存在巨大差异 | 第47页 |
| ·dsRNA 在对虾上也会产生脱靶效应 | 第47页 |
| ·创新点 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 附录 | 第54-56页 |
| 附录1 用 CaCl_2法制备感受态细胞 | 第54页 |
| 附录2 质粒的转化 | 第54-55页 |
| 附录3 酚氯仿抽提法纯化 RNA | 第55页 |
| 附录4 对虾组织总 RNA 的提取 | 第55-56页 |
| 附表 | 第56-59页 |
| 附表1 实验中用到的引物 | 第56-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60页 |
