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寡肽转运蛋白hPEPT2(560-664)的原核表达及性质研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 引言第11-27页
   ·肽转运蛋白转运方式的研究第11-12页
   ·哺乳动物肽转运蛋白的克隆第12-13页
   ·寡肽转运蛋白 PEPT2 的基因结构第13-14页
   ·寡肽转运蛋白 PEPT2 的结构特点第14-16页
   ·寡肽转运蛋白 PEPT2 的多态性变体的分布特征第16页
   ·寡肽转运蛋白 PEPT2 的功能特点第16-19页
     ·PEPT2 在肾脏的转运作用第17页
     ·PEPT2 在大脑的调节功能第17-18页
     ·PEPT2 在肺部的功能第18页
     ·PEPT2 在乳腺的功能第18-19页
     ·PEPT2 蛋白的营养作用第19页
   ·寡肽转运蛋白 PEPT2 突变体的功能第19-21页
   ·寡肽转运蛋白 PEPT2 的底物结构第21-25页
     ·PEPT2 与二肽的相互作用第21-22页
     ·PEPT2 与三肽的相互作用第22-23页
     ·PEPT2 对β-内酰胺类抗生素的转运作用第23页
     ·PEPT2 对其他药物的转运作用第23-24页
     ·被 PEPT2 识别的底物/抑制剂的结构要求第24-25页
   ·本课题的选题意义及主要内容第25-27页
第二章 寡肽转运蛋白 hPEPT2(560-664)的原核表达与纯化第27-42页
   ·实验材料第27-29页
     ·实验仪器第27-28页
     ·实验试剂第28页
     ·实验载体质粒及菌种第28-29页
   ·实验方法第29-35页
     ·寡肽转运蛋白 hPEPT2(560-664)表达质粒的构建第29-32页
       ·设计引物第29页
       ·PCR 扩增 hPEPT2(560-664)基因片段第29-30页
       ·pET30a(+)载体质粒的提取第30-31页
       ·构建 pET30a(+)-hPEPT2(560-664)重组质粒第31-32页
     ·pET30a(+)-hPEPT2(560-664)重组质粒的转化第32-33页
       ·感受态细胞的制备(CaCl2法)第32页
       ·重组质粒 pET30a(+)-hPEPT2(560-664)的转化第32-33页
     ·重组质粒 pET30a(+)-hPEPT2(560-664)的检测第33页
     ·重组质粒 pET30a(+)-hPEPT2(560-664)的诱导表达第33-34页
       ·表达条件的优化第33-34页
       ·重组质粒 pET30a(+)-hPEPT2(560-664)的大量表达第34页
     ·hPEPT2(560-664)目标蛋白的分离纯化第34-35页
       ·hPEPT2(560-664)目标蛋白的分离第34-35页
       ·hPEPT2(560-664)目标蛋白的纯化第35页
   ·实验结果与讨论第35-41页
     ·hPEPT2(560-664)基因片段的 PCR 扩增第35-36页
     ·pET30a(+)-hPEPT2(560-664)重组质粒的构建第36-37页
       ·PCR 产物和 pET30a(+)质粒的双酶切第36-37页
       ·PCR 产物和 pET30a(+)质粒的连接第37页
     ·pET30a(+)-hPEPT2(560-664)重组质粒的表达条件第37-39页
     ·hPEPT2(560-664)蛋白的分离纯化第39-41页
       ·hPEPT2(560-664)目的蛋白的分离第39-40页
       ·hPEPT2(560-664)目的蛋白的纯化第40-41页
   ·本章小结第41-42页
第三章 寡肽转运蛋白 hPEPT2(560-664)的性质初探第42-47页
   ·实验材料第42页
     ·实验仪器第42页
     ·实验试剂第42页
   ·实验方法第42-43页
     ·hPEPT2(560-664)蛋白紫外和荧光的性质研究第42-43页
     ·圆二色光谱法(CD)预测 hPEPT2(560-664)蛋白的结构第43页
   ·实验结果与讨论第43-47页
     ·hPEPT2(560-664)的紫外检测结果第43-44页
     ·hPEPT2(560-664)的荧光检测结果第44-45页
     ·圆二色光谱法(CD)预测 hPEPT2(560-664)蛋白的二级结构第45-47页
结论第47-48页
参考文献第48-60页
致谢第60-61页
附录第61-64页
个人简历第64页

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