摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 引言 | 第11-27页 |
·肽转运蛋白转运方式的研究 | 第11-12页 |
·哺乳动物肽转运蛋白的克隆 | 第12-13页 |
·寡肽转运蛋白 PEPT2 的基因结构 | 第13-14页 |
·寡肽转运蛋白 PEPT2 的结构特点 | 第14-16页 |
·寡肽转运蛋白 PEPT2 的多态性变体的分布特征 | 第16页 |
·寡肽转运蛋白 PEPT2 的功能特点 | 第16-19页 |
·PEPT2 在肾脏的转运作用 | 第17页 |
·PEPT2 在大脑的调节功能 | 第17-18页 |
·PEPT2 在肺部的功能 | 第18页 |
·PEPT2 在乳腺的功能 | 第18-19页 |
·PEPT2 蛋白的营养作用 | 第19页 |
·寡肽转运蛋白 PEPT2 突变体的功能 | 第19-21页 |
·寡肽转运蛋白 PEPT2 的底物结构 | 第21-25页 |
·PEPT2 与二肽的相互作用 | 第21-22页 |
·PEPT2 与三肽的相互作用 | 第22-23页 |
·PEPT2 对β-内酰胺类抗生素的转运作用 | 第23页 |
·PEPT2 对其他药物的转运作用 | 第23-24页 |
·被 PEPT2 识别的底物/抑制剂的结构要求 | 第24-25页 |
·本课题的选题意义及主要内容 | 第25-27页 |
第二章 寡肽转运蛋白 hPEPT2(560-664)的原核表达与纯化 | 第27-42页 |
·实验材料 | 第27-29页 |
·实验仪器 | 第27-28页 |
·实验试剂 | 第28页 |
·实验载体质粒及菌种 | 第28-29页 |
·实验方法 | 第29-35页 |
·寡肽转运蛋白 hPEPT2(560-664)表达质粒的构建 | 第29-32页 |
·设计引物 | 第29页 |
·PCR 扩增 hPEPT2(560-664)基因片段 | 第29-30页 |
·pET30a(+)载体质粒的提取 | 第30-31页 |
·构建 pET30a(+)-hPEPT2(560-664)重组质粒 | 第31-32页 |
·pET30a(+)-hPEPT2(560-664)重组质粒的转化 | 第32-33页 |
·感受态细胞的制备(CaCl2法) | 第32页 |
·重组质粒 pET30a(+)-hPEPT2(560-664)的转化 | 第32-33页 |
·重组质粒 pET30a(+)-hPEPT2(560-664)的检测 | 第33页 |
·重组质粒 pET30a(+)-hPEPT2(560-664)的诱导表达 | 第33-34页 |
·表达条件的优化 | 第33-34页 |
·重组质粒 pET30a(+)-hPEPT2(560-664)的大量表达 | 第34页 |
·hPEPT2(560-664)目标蛋白的分离纯化 | 第34-35页 |
·hPEPT2(560-664)目标蛋白的分离 | 第34-35页 |
·hPEPT2(560-664)目标蛋白的纯化 | 第35页 |
·实验结果与讨论 | 第35-41页 |
·hPEPT2(560-664)基因片段的 PCR 扩增 | 第35-36页 |
·pET30a(+)-hPEPT2(560-664)重组质粒的构建 | 第36-37页 |
·PCR 产物和 pET30a(+)质粒的双酶切 | 第36-37页 |
·PCR 产物和 pET30a(+)质粒的连接 | 第37页 |
·pET30a(+)-hPEPT2(560-664)重组质粒的表达条件 | 第37-39页 |
·hPEPT2(560-664)蛋白的分离纯化 | 第39-41页 |
·hPEPT2(560-664)目的蛋白的分离 | 第39-40页 |
·hPEPT2(560-664)目的蛋白的纯化 | 第40-41页 |
·本章小结 | 第41-42页 |
第三章 寡肽转运蛋白 hPEPT2(560-664)的性质初探 | 第42-47页 |
·实验材料 | 第42页 |
·实验仪器 | 第42页 |
·实验试剂 | 第42页 |
·实验方法 | 第42-43页 |
·hPEPT2(560-664)蛋白紫外和荧光的性质研究 | 第42-43页 |
·圆二色光谱法(CD)预测 hPEPT2(560-664)蛋白的结构 | 第43页 |
·实验结果与讨论 | 第43-47页 |
·hPEPT2(560-664)的紫外检测结果 | 第43-44页 |
·hPEPT2(560-664)的荧光检测结果 | 第44-45页 |
·圆二色光谱法(CD)预测 hPEPT2(560-664)蛋白的二级结构 | 第45-47页 |
结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
附录 | 第61-64页 |
个人简历 | 第64页 |