| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩写词表 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1 磷脂酶 C 的研究进展 | 第12-13页 |
| ·磷脂酶 C 发现 | 第12页 |
| ·磷脂酶 C 的分类 | 第12-13页 |
| 2 受精中 Ca ~(2+)释放机制的假说 | 第13-15页 |
| ·受体控制假说 | 第14页 |
| ·精子因子假说 | 第14-15页 |
| 3 卵母细胞的激活方法 | 第15-16页 |
| ·物理激活 | 第15页 |
| ·化学激活 | 第15-16页 |
| ·联合激活 | 第16页 |
| 4 PLCζ的特异之处 | 第16-20页 |
| ·E F 结构域具有较高的 Ca ~(2+) 敏感性 | 第16-17页 |
| ·PLCζ的 C2 区域对 Ca ~(2+) 振荡有重要作用 | 第17页 |
| ·PLCζ的 XY 连接结构具有靶向定位作用 | 第17-18页 |
| ·精子 PLCζ的缺陷与雄性不育 | 第18-20页 |
| 5 研究目的及意义 | 第20-22页 |
| 第二章 实验内容 | 第22-56页 |
| 实验一 美利奴绵羊 PLCζ基因的克隆及序列分析 | 第22-30页 |
| 摘要 | 第22页 |
| 1 材料和方法 | 第22-25页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-25页 |
| 2 结果 | 第25-29页 |
| ·PLCζ基因的扩增与克隆 | 第25页 |
| ·PLCζ蛋白基因核苷酸及推导的氨基酸序列分析 | 第25-27页 |
| ·PLCζ蛋白基因的同源性比对及系统进化树的构建 | 第27-29页 |
| 3 讨论 | 第29页 |
| 4 小结 | 第29-30页 |
| 实验二 美利奴绵羊 PLCζ基因的原核表达载体的构建与表达 | 第30-42页 |
| 摘要 | 第30页 |
| 1 材料和方法 | 第30-35页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-35页 |
| 2 结果 | 第35-39页 |
| ·目的基因的扩增 | 第35-36页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第36-37页 |
| ·原核产物的表达 | 第37-38页 |
| ·融合蛋白的纯化和 WB 分析 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-40页 |
| 4 小结 | 第40-42页 |
| 实验三 美利奴绵羊 PL Cζ基因真核表达载体的构建及其表达研究 | 第42-52页 |
| 摘要 | 第42页 |
| 1 材料和方法 | 第42-46页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-46页 |
| 2 结果 | 第46-50页 |
| ·目的基因的扩增 | 第46-47页 |
| ·pEGFP- N1 - PLCζ重组表达质粒的鉴定 | 第47-48页 |
| ·pEGFP- N1- PLCζ重组表达质粒转染 293T 细胞 | 第48-49页 |
| ·pEGFP- N1 - PLCζ重组表达质粒转染绵羊胎儿成纤维细胞 | 第49-50页 |
| 3 讨论 | 第50页 |
| 4 小结 | 第50-52页 |
| 试验四 美利奴绵羊 PLCζ基因在卵母细胞中表达的初步研究 | 第52-56页 |
| 摘要 | 第52页 |
| 1 材料和方法 | 第52-53页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-53页 |
| 2. 结果 | 第53-54页 |
| ·卵母细胞的体外培养 | 第53-54页 |
| ·卵母细胞胞质内质粒的显微注射 | 第54页 |
| 3. 讨论 | 第54页 |
| 4. 小结 | 第54-56页 |
| 全文总结 | 第56页 |
| 创新点 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63-64页 |
| 导师评阅表 | 第64页 |
