| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 英文缩略词表 | 第7-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-20页 |
| ·GPCRs 二聚化及意义 | 第10-13页 |
| ·GPCRs 简介 | 第10页 |
| ·GPCRs 二聚化 | 第10-12页 |
| ·GPCRs 二聚化意义 | 第12-13页 |
| ·PAC1 受体简介 | 第13-14页 |
| ·PAC1 受体研究概况 | 第13页 |
| ·不同 PAC1 受体亚型的性质 | 第13-14页 |
| ·PAC1 受体介导的生物学功能 | 第14-17页 |
| ·PAC1 受体介导的对神经系统的作用 | 第14-15页 |
| ·PAC1 受体介导的对调节体内能量代谢的作用 | 第15-16页 |
| ·PAC1 受体介导的调节免疫系统的作用 | 第16-17页 |
| ·本课题研究的目的、意义及主要研究内容 | 第17-20页 |
| ·研究目的及意义 | 第17-19页 |
| ·主要研究内容 | 第19-20页 |
| 第二章 相关载体的构建和鉴定 | 第20-41页 |
| ·介绍 | 第20页 |
| ·实验材料与方法 | 第20-31页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-31页 |
| ·实验结果 | 第31-39页 |
| ·重组真核表达载体 pEYFP-PAC1 的构建 | 第31-32页 |
| ·重组真核表达载体 pEYFP-D-PAC1 的构建 | 第32-33页 |
| ·重组真核表达载体 pRluc-PAC1 的构建 | 第33-34页 |
| ·重组真核表达载体 pRluc-D-PAC1 的构建 | 第34-35页 |
| ·重组真核表达载体 pEYFP/N-PAC1 的构建 | 第35-36页 |
| ·重组真核表达载体 pEYFP/N-D-PAC1 的构建 | 第36-37页 |
| ·重组真核表达载体 pEYFP/C-PAC1 的构建 | 第37-38页 |
| ·重组真核表达载体 pEYFP/C-D-PAC1 的构建 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| ·结论 | 第40-41页 |
| 第三章 B 族 G 蛋白偶联受体 PAC1 的二聚化 | 第41-50页 |
| ·介绍 | 第41页 |
| ·实验材料与方法 | 第41-44页 |
| ·实验材料 | 第41-42页 |
| ·实验方法 | 第42-44页 |
| ·结果 | 第44-48页 |
| ·PAC1 基因的分析 | 第44-45页 |
| ·重组真核表达载体 PAC1-EYFP 在细胞内表达情况 | 第45页 |
| ·生物发光能量共振转移检测 PAC1 的二聚化 | 第45-47页 |
| ·双分子荧光互补和免疫荧光检测 PAC1 的二聚化 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·结论 | 第49-50页 |
| 第四章 N 端激动域 HSDCIF 对 B 族 G 蛋白偶联受体 PAC1 二聚化和上膜运输的影响 | 第50-64页 |
| ·介绍 | 第50页 |
| ·实验材料和方法 | 第50-54页 |
| ·实验材料 | 第50-52页 |
| ·实验方法 | 第52-54页 |
| ·结果 | 第54-62页 |
| ·重组载体 PAC1-EYFP 与 D-PAC1-EYFP 在 CHO 细胞中表达不同 | 第54-55页 |
| ·双分子荧光互补和免疫荧光检测 D-PAC1 是否能同源二聚化 | 第55-57页 |
| ·生物发光能量转移检测 D-PAC1 是否能同源二聚化 | 第57-58页 |
| ·加入外源 HSDCIF，通过 BRET，BiFC 和 WB 间接检测其对 PAC1 二聚化的影响 | 第58-60页 |
| ·加入外源 HSDCIF，共聚焦显微镜动态观察其对 PAC1 上膜的影响 | 第60-61页 |
| ·MTT 检测外源 HSDCIF 对稳定表达 PAC1 的 CHO 细胞增值的影响 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| ·结论 | 第63-64页 |
| 第五章 主要仪器、试剂配制与常用技术 | 第64-75页 |
| ·主要仪器 | 第64-65页 |
| ·主要试剂配方 | 第65-71页 |
| ·常用技术 | 第71-75页 |
| ·Western Blotting | 第71-72页 |
| ·细胞培养技术 | 第72-75页 |
| 第六章 总结、创新与展望 | 第75-77页 |
| ·总结 | 第75页 |
| ·创新 | 第75-76页 |
| ·展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-86页 |
| 附录 | 第86-96页 |
| 附录 1 pEYFP-N1 Vector 图谱 | 第86-87页 |
| 附录 2 pRluc-N1 Vector 图谱 | 第87-88页 |
| 附录 3 pEYFP-PAC1 测序图 | 第88-89页 |
| 附录 4 pEYFP-D-PAC1 测序图 | 第89-90页 |
| 附录 5 pRluc-PAC1 测序图 | 第90-91页 |
| 附录 6 pRluc-D-PAC1 测序图 | 第91-92页 |
| 附录 7 pEYFP/N-PAC1 测序图 | 第92-93页 |
| 附录 8 pEYFP/N-D-PAC1 测序图 | 第93-94页 |
| 附录 9 pEYFP/C-PAC1 测序图 | 第94-95页 |
| 附录 10 pEYFP/C-D-PAC1 测序图 | 第95-96页 |
| 硕士期间的成果 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97页 |
