| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1 团头鲂主要细菌性疾病 | 第12-15页 |
| ·细菌性出血病 | 第12-14页 |
| ·细菌性出血病研究 | 第12-13页 |
| ·细菌性出血病防治方法 | 第13-14页 |
| ·竖鳞病 | 第14页 |
| ·打印病 | 第14-15页 |
| 2 嗜水气单胞菌的研究 | 第15-18页 |
| ·嗜水气单胞菌简介 | 第15页 |
| ·嗜水气单胞菌致病性 | 第15-16页 |
| ·嗜水气单胞菌的诊断和鉴定 | 第16-17页 |
| ·嗜水气单胞菌的检测方法 | 第17页 |
| ·嗜水气单胞菌的耐药性 | 第17-18页 |
| 3 绿色荧光蛋白及其应用 | 第18-20页 |
| ·绿色荧光蛋白简介 | 第18-19页 |
| ·绿色荧光蛋白发展史 | 第19页 |
| ·绿色荧光蛋白特点 | 第19-20页 |
| ·绿色荧光蛋白在微生物中的应用 | 第20页 |
| 4 本论文研究的意义 | 第20-22页 |
| 第二章 团头鲂出血病病原的分离鉴定及药敏试验 | 第22-38页 |
| 1 材料 | 第22-24页 |
| ·病鱼来源 | 第22-23页 |
| ·试验材料 | 第23-24页 |
| ·试验试剂 | 第23页 |
| ·试验仪器 | 第23-24页 |
| 2 方法 | 第24-29页 |
| ·细菌菌株的分离纯化 | 第24页 |
| ·分离菌形态观察 | 第24-25页 |
| ·分离菌人工感染试验 | 第25页 |
| ·胞外酶活性检测 | 第25页 |
| ·生理生化试验 | 第25-26页 |
| ·16S rRNA基因序列测定与系统发育分析 | 第26-27页 |
| ·PCR模板DNA的制备 | 第26页 |
| ·序列分析及系统发育树的构建 | 第26-27页 |
| ·药敏试验 | 第27页 |
| ·组织病理学初步研究 | 第27-29页 |
| ·组织样本脱水、透明以及浸蜡处理 | 第27页 |
| ·样本组织包埋处理 | 第27页 |
| ·切片 | 第27-28页 |
| ·烤片 | 第28页 |
| ·H.E染色 | 第28-29页 |
| ·封片 | 第29页 |
| 3 结果 | 第29-36页 |
| ·菌落形态特征 | 第29页 |
| ·胞外酶活性 | 第29-31页 |
| ·人工感染试验结果 | 第31页 |
| ·生理生化特性 | 第31-33页 |
| ·系统发育学 | 第33-34页 |
| ·药敏试验结果 | 第34页 |
| ·组织病理学观察结果 | 第34-36页 |
| ·肝脏组织病理观察 | 第34-35页 |
| ·肾脏组织病理观察 | 第35-36页 |
| ·脾脏组织病理观察 | 第36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 病原嗜水气单胞菌双重PCR检测方法的建立 | 第38-46页 |
| 1 材料与方法 | 第38-40页 |
| ·菌株来源 | 第38页 |
| ·工具酶和试剂 | 第38页 |
| ·引物设计 | 第38-39页 |
| ·细菌DNA模板制备 | 第39页 |
| ·双重PCR反应体系的建立和优化 | 第39页 |
| ·镁离子浓度的优化 | 第39页 |
| ·退火温度的优化 | 第39页 |
| ·双重PCR反应的特异性检测 | 第39-40页 |
| ·双重PCR反应的灵敏性检测 | 第40页 |
| ·菌液的稀释 | 第40页 |
| ·DNA模板的稀释 | 第40页 |
| ·双重PCR检测不同毒性的嗜水气单胞菌 | 第40页 |
| ·双重PCR检测的应用 | 第40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-44页 |
| ·双重PCR检测方法的建立 | 第40-41页 |
| ·最佳镁离子浓度 | 第40页 |
| ·最佳退火温度 | 第40-41页 |
| ·单一和双重PCR产物特异性 | 第41页 |
| ·双重PCR检测的灵敏度 | 第41-43页 |
| ·不同毒性嗜水气单胞菌的检测结果 | 第43-44页 |
| ·双重PCR检测送检样品结果 | 第44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 常用抗菌药物对嗜水气单胞菌的抗菌效果研究 | 第46-54页 |
| 1 材料 | 第46-47页 |
| ·营养肉汤 | 第46页 |
| ·营养琼脂 | 第46页 |
| ·抗菌药物来源 | 第46页 |
| ·供试菌株及其来源 | 第46-47页 |
| 2 方法 | 第47-48页 |
| ·溶解剂最小抑菌浓度的测定 | 第47页 |
| ·抗菌药物MIC的测定 | 第47页 |
| ·抗菌药物MBC的测定 | 第47-48页 |
| 3 结果 | 第48-51页 |
| ·各溶解剂最小抑菌浓度 | 第48页 |
| ·最小抑菌浓度 | 第48页 |
| ·最小杀菌浓度 | 第48-49页 |
| ·各抗菌药物的MIC和MBC比较结果 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-54页 |
| ·嗜水气单胞菌抗菌药物的研究 | 第51页 |
| ·有效抗菌药物对病原菌的研究分析 | 第51-54页 |
| 第五章 绿色荧光蛋白基因标记嗜水气单胞菌株的构建 | 第54-66页 |
| 1 材料与方法 | 第54-60页 |
| ·材料 | 第54-55页 |
| ·方法 | 第55-60页 |
| ·卡那霉素抗性基因片段的获取以及切胶回收 | 第55-56页 |
| ·酶切反应以及酶切产物切胶回收 | 第56-57页 |
| ·质粒pEGFP-N1与卡那霉素抗性基因片段的连接 | 第57页 |
| ·绿色荧光蛋白基因(GFP)标记大肠杆菌(Escherichia coli) | 第57页 |
| ·绿色荧光蛋白基因(GFP)标记嗜水气单胞菌 | 第57-58页 |
| ·GFP标记嗜水气单胞菌的检测 | 第58页 |
| ·质粒稳定性的检测 | 第58-59页 |
| ·WJ-8~(GFP)毒力的检测 | 第59页 |
| ·绿色荧光蛋白基因标记嗜水气单胞菌感染路径研究 | 第59-60页 |
| 2 结果 | 第60-63页 |
| ·绿色荧光蛋白在嗜水气单胞菌中的表达 | 第60页 |
| ·双重PCR法检测 | 第60页 |
| ·质粒稳定性检测 | 第60页 |
| ·WJ-8~(GFP)人工感染试验结果 | 第60-61页 |
| ·菌株WJ-8~(GFP)对团头鲂的半致死量 | 第61-62页 |
| ·WJ-8~(GFP)感染后团头鲂体内的分布 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-66页 |
| 全文总结 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 攻读学位期间参加的会议及发表的论文 | 第78页 |