摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-10页 |
缩写词 | 第10-11页 |
1. 前言 | 第11-25页 |
·海藻糖的概述 | 第11-12页 |
·海藻糖的理化性质 | 第12页 |
·海藻糖的生物合成 | 第12-15页 |
·TPS –TPP 途径——以葡萄糖为底物的海藻糖合成途径 | 第12-13页 |
·TreY–TreZ 途径 | 第13页 |
·TreS 途径——以麦芽糖为底物的海藻糖合成途径 | 第13-14页 |
·TreT 途径——以ADP-葡萄糖为底物的海藻糖合成途径 | 第14页 |
·TreP 途径——海藻糖磷酸化酶途径 | 第14-15页 |
·海藻糖的降解途径 | 第15-16页 |
·海藻糖的功能 | 第16-18页 |
·逆境下海藻糖对生物体的保护作用 | 第16-17页 |
·海藻糖可能起调节因子作用 | 第17-18页 |
·能量储备、昆虫飞行能量来源 | 第18页 |
·吸湿性 | 第18页 |
·海藻糖的应用 | 第18-20页 |
·在食品工业上的应用 | 第18-19页 |
·在医药行业上的应用 | 第19页 |
·在农业方面的应用 | 第19-20页 |
·在分子生物学上的应用 | 第20页 |
·海藻糖保护生物分子的机理 | 第20-21页 |
·“水替代”假说 | 第20页 |
·“玻璃态”假说 | 第20页 |
·“化学稳态”假说 | 第20-21页 |
·微生物中海藻糖磷酸化酶的研究 | 第21页 |
·腾冲嗜热杆菌海藻搪磷酸化酶的研究 | 第21页 |
·Brevibacterium sp.SY361 海藻糖磷酸化酶的研究 | 第21页 |
·植物的盐胁迫 | 第21-23页 |
·盐胁迫对植物的影响 | 第21-22页 |
·植物的耐盐机理 | 第22-23页 |
·海藻糖合成基因在植物中的表达应用 | 第23页 |
·立题依据 | 第23-25页 |
2. 材料与方法 | 第25-39页 |
·实验仪器 | 第25页 |
·实验材料 | 第25-26页 |
·植物材料 | 第25页 |
·质粒载体和菌株 | 第25-26页 |
·实验试剂 | 第26页 |
·实验常用溶液及培养基的配制 | 第26-27页 |
·常用溶液的配制 | 第26页 |
·常用培养基的配制 | 第26-27页 |
·拟南芥叶肉细胞原生质体瞬时表达溶液 | 第27页 |
·抗生素的配制 | 第27页 |
·实验所用引物 | 第27-28页 |
·T-DNA 插入纯和突变体鉴定引物 | 第27-28页 |
·构建GUS 载体所用引物 | 第28页 |
·构建tGFP 载体所用引物 | 第28页 |
·构建超表达载体所用引物 | 第28页 |
·RT- PCR 鉴定基因表达所用引物 | 第28页 |
·实验方法 | 第28-39页 |
·拟南芥的种植方法 | 第28-29页 |
·拟南芥基因组DNA 提取方法 | 第29页 |
·T-DNA 插入缺失纯合突变体的鉴定 | 第29-30页 |
·拟南芥基因组总RNA 的提取(Trizol 法) | 第30页 |
·反转录合成拟南芥cDNA | 第30-31页 |
·半定量RT-PCR 检测基因表达情况 | 第31页 |
·DNA 的琼脂糖凝胶电泳 | 第31-32页 |
·PCR 产物以及酶切产物的回收和纯化 | 第32页 |
·重组质粒载体的构建 | 第32-34页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
·重组质粒对大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第35页 |
·质粒DNA 的提取 | 第35-36页 |
·重组质粒的鉴定 | 第36页 |
·杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第36页 |
·农杆菌介导的拟南芥转化 | 第36-37页 |
·转基因阳性植株的筛选 | 第37页 |
·β-葡糖苷酸酶(GUS)的组织化学鉴定 | 第37-38页 |
·PEG 介导的拟南芥叶肉细胞原生质体瞬时表达 | 第38页 |
·共聚焦显微镜观察GFP 与叶绿体自发荧光共定位 | 第38-39页 |
3. 结果与分析 | 第39-47页 |
·T-DNA 插入突变体的鉴定和纯合体的筛选 | 第39-40页 |
·突变体的表型鉴定 | 第40-41页 |
·低浓度NaCl 对trp 种子萌发和幼苗生长的影响 | 第40-41页 |
·pTRP::pCAMBIA1381-GUS 表达载体的构建 | 第41-42页 |
·TRP::pHBT-GFP-NOS 载体的构建 | 第42-43页 |
·TRP 蛋白的亚细胞定位分析 | 第43-44页 |
·TRP::p-Supe11300+超表达载体的构建与验证 | 第44-45页 |
·超表达植株的筛选及基因表达水平检测 | 第45-47页 |
4. 讨论 | 第47-49页 |
·获得了拟南芥TRP 基因的T-DNA 插入缺失纯合突变体trp | 第47页 |
·TRP 参与拟南芥盐胁迫应答的过程 | 第47页 |
·TRP 在拟南芥植株中普遍表达 | 第47-49页 |
5. 结论 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
致谢 | 第55-56页 |