| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-18页 |
| ·抗虫基因资源 | 第10-11页 |
| ·植物来源的抗虫基因 | 第10-11页 |
| ·微生物来源的抗虫基因 | 第11页 |
| ·动物来源的抗虫基因 | 第11页 |
| ·植物胰蛋白酶抑制剂 | 第11-14页 |
| ·植物胰蛋白酶抑制剂的分类与分布 | 第12页 |
| ·植物胰蛋白酶抑制剂的获得途径 | 第12页 |
| ·植物胰蛋白酶抑制剂在抗虫方面的研究 | 第12-14页 |
| ·植物胰蛋白酶抑制剂抗虫机制 | 第14页 |
| ·Kunitz型蛋白酶抑制剂 | 第14-18页 |
| ·半胱氨酸含量 | 第15-16页 |
| ·二级和三级结构 | 第16页 |
| ·反应位点 | 第16-17页 |
| ·抗虫机制 | 第17-18页 |
| 第2章 引言 | 第18-20页 |
| ·研究背景和意义 | 第18-19页 |
| ·技术路线 | 第19-20页 |
| 第3章 蜡梅胰蛋白酶抑制剂基因CpKTI的分子特征 | 第20-28页 |
| ·试验方法 | 第20页 |
| ·结果与分析 | 第20-28页 |
| ·CpKTI克隆子的获得 | 第20页 |
| ·CpKTI基因cDNA序列特征 | 第20-21页 |
| ·CPKTI蛋白同源比对 | 第21-22页 |
| ·CpKTI蛋白聚类分析 | 第22页 |
| ·CpKTI编码蛋白特征分析 | 第22-28页 |
| 第4章 蜡梅胰蛋白酶抑制剂基因CpKTI的荧光定量分析 | 第28-36页 |
| ·实验材料 | 第28页 |
| ·植物材料及生长条件 | 第28页 |
| ·试剂 | 第28页 |
| ·仪器设备 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-31页 |
| ·蜡梅不同组织的采集 | 第28页 |
| ·蜡梅不同时期花芽的采集 | 第28页 |
| ·总RNA提取 | 第28-29页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第29页 |
| ·定量标准品的制备 | 第29-30页 |
| ·标准曲线的建立与样品实时定量PCR | 第30-31页 |
| ·结果与分析 | 第31-36页 |
| ·总RNA提取 | 第31页 |
| ·曲线分析 | 第31-33页 |
| ·CpKTI表达的实时荧光定量分析 | 第33-36页 |
| 第5章 CpKTI的植物表达载体构建及转化烟草的抗性分析 | 第36-56页 |
| ·植物表达载体构建及烟草遗传转化 | 第36-51页 |
| ·试验材料 | 第36-38页 |
| ·试验方法 | 第38-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-51页 |
| ·转基因植株的抗虫性测定 | 第51-56页 |
| ·试验材料 | 第51页 |
| ·试验方法 | 第51-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-56页 |
| 第6章 蜡梅胰蛋白酶抑制剂基因CpKTI的原核表达 | 第56-62页 |
| ·实验材料 | 第56-57页 |
| ·材料 | 第56页 |
| ·购买试剂 | 第56页 |
| ·设备 | 第56页 |
| ·配制试剂 | 第56-57页 |
| ·实验方法 | 第57-60页 |
| ·蜡梅CpKTI基因原核表达载体的构建 | 第57-59页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第59页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳检测目的蛋白 | 第59-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-62页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第60页 |
| ·CpKTI-pET32a(+)的诱导表达 | 第60-62页 |
| 第7章 讨论 | 第62-64页 |
| ·CpKTI胰蛋白酶抑制剂 | 第62页 |
| ·转化烟草的抗虫性鉴定 | 第62页 |
| ·CpKTI在蜡梅中的表达分析 | 第62-63页 |
| ·CpKTI原核表达 | 第63-64页 |
| 第8章 总结 | 第64-66页 |
| ·研究结果 | 第64页 |
| ·本文特色 | 第64-65页 |
| ·下一步研究计划 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 缩略词表 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74-76页 |
| 在校期间发表的文章和参与的项目 | 第76页 |
