| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 引言 | 第11-16页 |
| ·禽流感概述 | 第11-12页 |
| ·禽流感的流行 | 第11-12页 |
| ·禽流感病毒的结构及组成 | 第12页 |
| ·NS1 蛋白的简介 | 第12-14页 |
| ·C-末端效应结构域 | 第13-14页 |
| ·NOLC1 蛋白的简介 | 第14页 |
| ·研究 NOLC1 蛋白与 NS1 相互作用的意义 | 第14-15页 |
| ·本项目研究目的、内容及意义 | 第15-16页 |
| 第一章 NS1 与 NOLC1 蛋白相互作用最小结构域的确定 | 第16-33页 |
| ·前言 | 第16-17页 |
| ·材料 | 第17-18页 |
| ·引物合成 | 第17页 |
| ·细胞株、载体、细菌菌株 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·溶液配制（见附录 A） | 第17页 |
| ·主要仪器及耗材（见附录 B） | 第17-18页 |
| ·方法 | 第18-25页 |
| ·分析 NS1-C 空间结构，确定 NS1-C 各截短体 | 第18页 |
| ·NS1-C（各个截短体）真核表达载体的构建及截短蛋白的表达 | 第18-23页 |
| ·NOLC1 原核载体的构建及蛋白的表达 | 第23-25页 |
| ·His-pull down 体外检测蛋白间相互作用 | 第25页 |
| ·结果 | 第25-31页 |
| ·NS1-C 各个基因截短体的克隆及鉴定 | 第25-26页 |
| ·pEGFP-N1-NS1-C（各个截短蛋白）真核表达载体在 COS-7 细胞中的表达 | 第26-27页 |
| ·NOLC1 原核表达载体的构建及表达 | 第27-28页 |
| ·pEGFP-N1-NS1-C（各个截短体）融合蛋白的 Western blot 分析 | 第28-29页 |
| ·NS1-C（各个截短体）蛋白与 NOLC1 蛋白体外相互作用的 His-pull down 结果 | 第29-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第二章 NS1 与 NOLC1 蛋白相互作用关键氨基酸位点的确定 | 第33-41页 |
| ·前言 | 第33-34页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·引物合成 | 第34页 |
| ·细胞株、载体、细菌菌株 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·溶液配制（见附录 A） | 第34页 |
| ·主要仪器及耗材（见附录 B） | 第34页 |
| ·方法 | 第34-37页 |
| ·NS1-C 单点突变位点确定 | 第34-35页 |
| ·NS1-C 各个突变体真核表达载体的构建 | 第35-37页 |
| ·His-NOLC1 融合蛋白的表达（同 2.3 的诱导方法） | 第37页 |
| ·His-pull down 体外检测蛋白间相互作用 | 第37页 |
| ·结果 | 第37-39页 |
| ·pEGFP-N1-NS1-C（各个突变体）真核表达载体的构建 | 第37-38页 |
| ·Western blot 检测 NS1-C 各个突变蛋白的表达及与 His-NOLC1 pull down 结果 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 结论与展望 | 第41-43页 |
| ·结论 | 第41-42页 |
| ·展望 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及参加科研情况 | 第49-50页 |
| 附录 A 试剂及其配制一览表 | 第50-53页 |
| 附录 B 主要仪器与耗材一览表 | 第53-55页 |
| 附录 C 重组质粒目的片段的序列信息 Blast 结果 | 第55-66页 |
| 1 关于 NS1-C 各个截短体的片段信息 blast 结果 | 第55-60页 |
| 2 关于 NS1-C 各个突变体的片段信息 blast 结果 | 第60-65页 |
| 3 关于 NOLC1 片段信息 blast 结果 | 第65-66页 |
