| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 中英文缩写词表 | 第9-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 一 文献综述 | 第14-24页 |
| 1. 硒蛋白的概况 | 第14-18页 |
| ·硒元素的生物学功能 | 第14-15页 |
| ·硒蛋白的分子结构特点 | 第15页 |
| ·硒代半脱氨酸插入元件(SECIS)及其功能 | 第15-18页 |
| 2. ID Ⅱ和SEL S相关资料 | 第18-22页 |
| ·ID Ⅱ的介绍 | 第18-20页 |
| ·Sel S的介绍 | 第20-22页 |
| 3. 立题依据 | 第22-23页 |
| 4 研究目标和内容 | 第23-24页 |
| ·研究目标 | 第23页 |
| ·研究内容 | 第23-24页 |
| 二 本试验技术路线 | 第24-25页 |
| 三 材料和方法 | 第25-45页 |
| 1. 材料 | 第25-27页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·主要设备和仪器 | 第25页 |
| ·主要使用的信息分析软件 | 第25-26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| 2 实验方法 | 第27-45页 |
| ·引物设计 | 第27-28页 |
| ·猪肺组织总RNA提取 | 第28页 |
| ·目的基因Sel S189的克隆和鉴定 | 第28-31页 |
| ·ID Ⅱ基因的定点突变：TGA→TGT | 第31-33页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第33-38页 |
| ·重组质粒pET-30a(+)-ID ⅡTGT与质粒pET-30a(+)-Sel S189和原核表达菌株BL21(DE3)的转化及转化子的筛选鉴定 | 第38-39页 |
| ·工程菌原核诱导表达及纯化 | 第39-41页 |
| ·兔抗猪ID Ⅱ和Sel S多克隆抗体制备 | 第41-45页 |
| 四 实验结果与分析 | 第45-60页 |
| 1. 猪硒蛋白ID Ⅱ基因定点突变,原核表达及多克隆抗体制备 | 第45-52页 |
| ·ID Ⅱ的突变与表达载体构建 | 第45-48页 |
| ·ID ⅡTGT的原核表达与纯化 | 第48-49页 |
| ·ID Ⅱ多克隆抗体的制备及检测 | 第49-51页 |
| ·ELISA分析猪体各组织中硒蛋白ID Ⅱ含量 | 第51-52页 |
| 2. 猪硒蛋白基因SEL S189的克隆、原核表达及多克隆抗体制备 | 第52-60页 |
| ·猪Sel S189基因的克隆 | 第52-53页 |
| ·Sel S189基因原核表达载体构建 | 第53-55页 |
| ·pET-30a(+)-Sel S189表达菌株的原核表达及纯化 | 第55-57页 |
| ·抗体的质量检测 | 第57-60页 |
| 五 讨论 | 第60-65页 |
| 1. 硒蛋白SEL S189基因序列克隆 | 第60页 |
| 2. 硒蛋白多克隆抗体制备 | 第60-63页 |
| ·理想免疫原的选择 | 第60-61页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第61-62页 |
| ·佐剂的使用 | 第62-63页 |
| 3. 多克隆抗体的鉴定 | 第63-65页 |
| 六 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
