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桃PpERS1、PpADC基因克隆、鉴定及PtADC转基因功能分析

摘要第1-11页
Abstract第11-14页
缩略词第14-15页
第一章 前言第15-37页
 1 研究背景第15-16页
 2 文献综述第16-35页
   ·乙烯第16-21页
     ·乙烯的生理作用第16-17页
     ·乙烯的生物合成途径第17-18页
     ·乙烯的信号转导途径第18-21页
   ·多胺第21-27页
     ·多胺的生物合成途径第22-23页
     ·多胺的生理作用第23-27页
   ·乙烯与多胺的交互作用第27-29页
     ·乙烯与多胺的竞争关系第28页
     ·乙烯与多胺的协同作用第28-29页
   ·启动子第29-35页
     ·启动子概述第29页
     ·启动子结构第29-30页
     ·启动子类型第30-32页
     ·启动子克隆第32-33页
     ·启动子功能分析第33-35页
 3 本研究的目的、内容和意义第35-37页
第二章 桃PpERS1基因、启动子的克隆和功能分析第37-77页
 1 引言第37页
 2 材料和方法第37-51页
   ·植物材料和处理第37-38页
   ·DNA和RNA提取第38页
   ·PpERS1基因克隆、鉴定第38-40页
     ·PpERS1基因开放阅读框(ORF)扩增第38-40页
     ·PpERS1基因5’末端PCR扩增第40页
   ·基因表达分析(Real time RT-PCR)第40页
   ·PpERS1基因启动子克隆第40-42页
     ·染色体步移文库构建第40-41页
     ·PpERS1基因5’侧翼片段克隆第41-42页
     ·PpERS1基因启动子全长克隆、鉴定第42页
   ·PpERS1基因启动子表达载体构建第42-45页
     ·PpERS1基因启动子全长表达载体构建第43-44页
     ·缺失启动子表达载体构建第44页
     ·重组根癌农杆菌工程菌株转化第44-45页
   ·番茄Micro-Tom的遗传转化第45-47页
     ·根癌农杆菌介导的番茄遗传转化第45-46页
     ·转基因番茄的分子检测第46-47页
   ·外源条件处理转基因番茄第47-48页
     ·机械伤害处理第47页
     ·乙烯处理第47页
     ·盐胁迫处理第47页
     ·低温处理第47-48页
   ·转基因番茄GUS活性定性及定量分析第48-51页
     ·番茄组织、器官的GUS染色第48-49页
     ·番茄GUS活性的荧光定量测定第49-51页
   ·生物信息学分析第51页
 3 结果与分析第51-72页
   ·PpERS1基因的克隆及其生物信息学分析第51-57页
   ·PpERS1基因表达模式第57-59页
     ·组织器官中的表达模式第57页
     ·逆境胁迫反应过程中的表达模式第57-59页
   ·PpERS1基因启动子的克隆及其生物信息学分析第59-63页
     ·PpERS1基因启动子的克隆第59-61页
     ·PpERS1基因启动子序列的生物信息学分析第61-63页
   ·PpERS1基因启动子功能分析第63-72页
     ·PpERS1基因启动子载体构建第63-65页
     ·番茄Micro-Tom遗传转化第65-69页
     ·PpERS1基因启动子功能鉴定第69-71页
     ·PpERS1基因启动子内含子功能鉴定第71页
     ·PpERS1基因启动子对逆境胁迫反应的响应第71-72页
 4 讨论第72-77页
   ·PpERS1基因克隆及鉴定第72-73页
   ·PpERS1基因表达模式分析第73-74页
   ·PpERS1基因启动子克隆及鉴定第74-75页
   ·PpERS1基因启动子转基因功能分析第75-77页
第三章 桃PpADC基因及其启动子的克隆和功能验证第77-99页
 1 引言第77页
 2 材料和方法第77-82页
   ·植物材料和处理第77页
   ·桃基因组DNA和RNA的提取第77页
   ·PpADC基因克隆与表达分析第77-78页
     ·PpADC基因的克隆第77-78页
     ·PpADC基因表达模式分析第78页
   ·PpADC基因转基因功能验证第78-80页
     ·PpADC基因超量表达载体构建第78-79页
     ·番茄Micro-Tom遗传转化第79页
     ·转基因植株的分子鉴定第79页
     ·转基因植株的分子和生理生化分析第79-80页
   ·PpADC基因启动子克隆第80-81页
   ·PpADC启动子转基因功能验证第81-82页
     ·PpADC启动子GUS表达载体的构建第81页
     ·番茄Micro-Tom遗传转化第81页
     ·转基因植株的分子鉴定第81-82页
     ·转基因植株的GUS活性分析第82页
   ·PpADC基因及其启动子的生物信息学分析第82页
 3 结果与分析第82-95页
   ·PpADC基因的克隆及其生物信息学分析第82-84页
   ·PpADC基因响应逆境胁迫反应的表达模式分析第84-85页
   ·PpADC转基因功能鉴定第85-91页
     ·PpADC超量表达载体构建第85-86页
     ·PpADC转基因番茄的分子鉴定第86-87页
     ·PpADC基因在转基因番茄中的表达分析第87-88页
     ·转基因番茄中多胺含量分析第88-89页
     ·转基因番茄植株发育迟缓分析第89页
     ·外源赤霉素对转基因株系生长发育的恢复作用第89-90页
     ·转基因番茄赤霉素代谢相关基因表达量分析第90-91页
   ·PpADC基因启动子克隆及其生物信息学分析第91-93页
     ·PpADC基因启动子克隆第91页
     ·PpADC基因启动子序列生物信息学分析第91-93页
   ·PpADC基因启动子活性分析第93-95页
     ·PpADC基因启动子GUS表达载体构建第93-94页
     ·PpADC基因启动子活性分析第94-95页
 4 讨论第95-99页
   ·PpADC基因克隆及鉴定第95页
   ·PpADC基因表达模式分析第95-96页
   ·PpADC基因启动子克隆及鉴定第96-97页
   ·PpADC基因转基因功能分析第97-99页
第四章 柑橘精氨酸脱羧酶PtADC转基因功能验证第99-108页
 1 引言第99页
 2 材料和方法第99-101页
   ·植物材料第99页
   ·转基因株系的分子鉴定第99-100页
   ·转基因植株多胺含量测定第100页
   ·转基因植株逆境胁迫处理第100页
     ·脱水处理第100页
     ·干旱处理第100页
   ·电导率、叶绿素测定和活性氧染色第100-101页
     ·离体叶片相对失水率测定第100-101页
     ·离体叶片相对电导率测定第101页
     ·离体叶片总叶绿素测定第101页
     ·离体叶片O_2~-和H_2O_2组织化学定位第101页
 3 结果和分析第101-106页
   ·转基因番茄中PtADC基因的表达分析第101-102页
   ·转基因番茄多胺含量测定分析第102页
   ·转基因番茄抗旱性分析第102-105页
     ·脱水处理条件下转基因番茄抗性分析第102-104页
     ·干旱处理条件下转基因番茄抗性分析第104-105页
   ·转基因番茄脱水处理下活性氧积累分析第105-106页
 4 讨论第106-108页
   ·PtADC基因转基因番茄多胺含量分析第106-107页
   ·PtADC基因转基因番茄抗旱性分析第107页
   ·PtADC基因转基因番茄活性氧含量分析第107-108页
参考文献第108-130页
攻读博士学位期间发表论文第130-131页
致谢第131页

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