摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
缩略词 | 第14-15页 |
第一章 前言 | 第15-37页 |
1 研究背景 | 第15-16页 |
2 文献综述 | 第16-35页 |
·乙烯 | 第16-21页 |
·乙烯的生理作用 | 第16-17页 |
·乙烯的生物合成途径 | 第17-18页 |
·乙烯的信号转导途径 | 第18-21页 |
·多胺 | 第21-27页 |
·多胺的生物合成途径 | 第22-23页 |
·多胺的生理作用 | 第23-27页 |
·乙烯与多胺的交互作用 | 第27-29页 |
·乙烯与多胺的竞争关系 | 第28页 |
·乙烯与多胺的协同作用 | 第28-29页 |
·启动子 | 第29-35页 |
·启动子概述 | 第29页 |
·启动子结构 | 第29-30页 |
·启动子类型 | 第30-32页 |
·启动子克隆 | 第32-33页 |
·启动子功能分析 | 第33-35页 |
3 本研究的目的、内容和意义 | 第35-37页 |
第二章 桃PpERS1基因、启动子的克隆和功能分析 | 第37-77页 |
1 引言 | 第37页 |
2 材料和方法 | 第37-51页 |
·植物材料和处理 | 第37-38页 |
·DNA和RNA提取 | 第38页 |
·PpERS1基因克隆、鉴定 | 第38-40页 |
·PpERS1基因开放阅读框(ORF)扩增 | 第38-40页 |
·PpERS1基因5’末端PCR扩增 | 第40页 |
·基因表达分析(Real time RT-PCR) | 第40页 |
·PpERS1基因启动子克隆 | 第40-42页 |
·染色体步移文库构建 | 第40-41页 |
·PpERS1基因5’侧翼片段克隆 | 第41-42页 |
·PpERS1基因启动子全长克隆、鉴定 | 第42页 |
·PpERS1基因启动子表达载体构建 | 第42-45页 |
·PpERS1基因启动子全长表达载体构建 | 第43-44页 |
·缺失启动子表达载体构建 | 第44页 |
·重组根癌农杆菌工程菌株转化 | 第44-45页 |
·番茄Micro-Tom的遗传转化 | 第45-47页 |
·根癌农杆菌介导的番茄遗传转化 | 第45-46页 |
·转基因番茄的分子检测 | 第46-47页 |
·外源条件处理转基因番茄 | 第47-48页 |
·机械伤害处理 | 第47页 |
·乙烯处理 | 第47页 |
·盐胁迫处理 | 第47页 |
·低温处理 | 第47-48页 |
·转基因番茄GUS活性定性及定量分析 | 第48-51页 |
·番茄组织、器官的GUS染色 | 第48-49页 |
·番茄GUS活性的荧光定量测定 | 第49-51页 |
·生物信息学分析 | 第51页 |
3 结果与分析 | 第51-72页 |
·PpERS1基因的克隆及其生物信息学分析 | 第51-57页 |
·PpERS1基因表达模式 | 第57-59页 |
·组织器官中的表达模式 | 第57页 |
·逆境胁迫反应过程中的表达模式 | 第57-59页 |
·PpERS1基因启动子的克隆及其生物信息学分析 | 第59-63页 |
·PpERS1基因启动子的克隆 | 第59-61页 |
·PpERS1基因启动子序列的生物信息学分析 | 第61-63页 |
·PpERS1基因启动子功能分析 | 第63-72页 |
·PpERS1基因启动子载体构建 | 第63-65页 |
·番茄Micro-Tom遗传转化 | 第65-69页 |
·PpERS1基因启动子功能鉴定 | 第69-71页 |
·PpERS1基因启动子内含子功能鉴定 | 第71页 |
·PpERS1基因启动子对逆境胁迫反应的响应 | 第71-72页 |
4 讨论 | 第72-77页 |
·PpERS1基因克隆及鉴定 | 第72-73页 |
·PpERS1基因表达模式分析 | 第73-74页 |
·PpERS1基因启动子克隆及鉴定 | 第74-75页 |
·PpERS1基因启动子转基因功能分析 | 第75-77页 |
第三章 桃PpADC基因及其启动子的克隆和功能验证 | 第77-99页 |
1 引言 | 第77页 |
2 材料和方法 | 第77-82页 |
·植物材料和处理 | 第77页 |
·桃基因组DNA和RNA的提取 | 第77页 |
·PpADC基因克隆与表达分析 | 第77-78页 |
·PpADC基因的克隆 | 第77-78页 |
·PpADC基因表达模式分析 | 第78页 |
·PpADC基因转基因功能验证 | 第78-80页 |
·PpADC基因超量表达载体构建 | 第78-79页 |
·番茄Micro-Tom遗传转化 | 第79页 |
·转基因植株的分子鉴定 | 第79页 |
·转基因植株的分子和生理生化分析 | 第79-80页 |
·PpADC基因启动子克隆 | 第80-81页 |
·PpADC启动子转基因功能验证 | 第81-82页 |
·PpADC启动子GUS表达载体的构建 | 第81页 |
·番茄Micro-Tom遗传转化 | 第81页 |
·转基因植株的分子鉴定 | 第81-82页 |
·转基因植株的GUS活性分析 | 第82页 |
·PpADC基因及其启动子的生物信息学分析 | 第82页 |
3 结果与分析 | 第82-95页 |
·PpADC基因的克隆及其生物信息学分析 | 第82-84页 |
·PpADC基因响应逆境胁迫反应的表达模式分析 | 第84-85页 |
·PpADC转基因功能鉴定 | 第85-91页 |
·PpADC超量表达载体构建 | 第85-86页 |
·PpADC转基因番茄的分子鉴定 | 第86-87页 |
·PpADC基因在转基因番茄中的表达分析 | 第87-88页 |
·转基因番茄中多胺含量分析 | 第88-89页 |
·转基因番茄植株发育迟缓分析 | 第89页 |
·外源赤霉素对转基因株系生长发育的恢复作用 | 第89-90页 |
·转基因番茄赤霉素代谢相关基因表达量分析 | 第90-91页 |
·PpADC基因启动子克隆及其生物信息学分析 | 第91-93页 |
·PpADC基因启动子克隆 | 第91页 |
·PpADC基因启动子序列生物信息学分析 | 第91-93页 |
·PpADC基因启动子活性分析 | 第93-95页 |
·PpADC基因启动子GUS表达载体构建 | 第93-94页 |
·PpADC基因启动子活性分析 | 第94-95页 |
4 讨论 | 第95-99页 |
·PpADC基因克隆及鉴定 | 第95页 |
·PpADC基因表达模式分析 | 第95-96页 |
·PpADC基因启动子克隆及鉴定 | 第96-97页 |
·PpADC基因转基因功能分析 | 第97-99页 |
第四章 柑橘精氨酸脱羧酶PtADC转基因功能验证 | 第99-108页 |
1 引言 | 第99页 |
2 材料和方法 | 第99-101页 |
·植物材料 | 第99页 |
·转基因株系的分子鉴定 | 第99-100页 |
·转基因植株多胺含量测定 | 第100页 |
·转基因植株逆境胁迫处理 | 第100页 |
·脱水处理 | 第100页 |
·干旱处理 | 第100页 |
·电导率、叶绿素测定和活性氧染色 | 第100-101页 |
·离体叶片相对失水率测定 | 第100-101页 |
·离体叶片相对电导率测定 | 第101页 |
·离体叶片总叶绿素测定 | 第101页 |
·离体叶片O_2~-和H_2O_2组织化学定位 | 第101页 |
3 结果和分析 | 第101-106页 |
·转基因番茄中PtADC基因的表达分析 | 第101-102页 |
·转基因番茄多胺含量测定分析 | 第102页 |
·转基因番茄抗旱性分析 | 第102-105页 |
·脱水处理条件下转基因番茄抗性分析 | 第102-104页 |
·干旱处理条件下转基因番茄抗性分析 | 第104-105页 |
·转基因番茄脱水处理下活性氧积累分析 | 第105-106页 |
4 讨论 | 第106-108页 |
·PtADC基因转基因番茄多胺含量分析 | 第106-107页 |
·PtADC基因转基因番茄抗旱性分析 | 第107页 |
·PtADC基因转基因番茄活性氧含量分析 | 第107-108页 |
参考文献 | 第108-130页 |
攻读博士学位期间发表论文 | 第130-131页 |
致谢 | 第131页 |