| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-31页 |
| 1 鱼类肝细胞原代培养研究进展 | 第15-16页 |
| 2 细胞的分离方法 | 第16-17页 |
| 3 肝细胞体外培养条件 | 第17-23页 |
| ·无污染环境 | 第17页 |
| ·附着底物 | 第17-18页 |
| ·温度 | 第18-19页 |
| ·气体环境 | 第19页 |
| ·pH 值 | 第19页 |
| ·培养基 | 第19-21页 |
| ·污染检测与预防、处理 | 第21-23页 |
| ·体外培养肝细胞生物功能和特性的鉴别 | 第23页 |
| 4 鱼类肝细胞超微结构的研究 | 第23-24页 |
| 5 氧化油脂对鱼体肝肠损伤作用研究进展 | 第24-31页 |
| ·油脂的组成 | 第24-25页 |
| ·油脂的氧化酸败 | 第25-28页 |
| ·鱼体肝肠道组织结构及肠肝损伤 | 第28-31页 |
| 第二章 草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝细胞分离与原代培养 | 第31-41页 |
| 1 实验材料 | 第31页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| 2 实验方法 | 第31-33页 |
| ·肝细胞分离方法 | 第32页 |
| ·肝细胞的纯化 | 第32页 |
| ·肝细胞活力的测定 | 第32页 |
| ·肝细胞的原代培养 | 第32页 |
| ·肝细胞增殖率的鉴定 | 第32页 |
| ·草鱼肝细胞功能测定 | 第32-33页 |
| ·数据处理 | 第33页 |
| 3 结果 | 第33-35页 |
| ·材料肝细胞品质与鱼体强化饲养 | 第33页 |
| ·分离、纯化方法对游离肝细胞数量和活力的影响 | 第33页 |
| ·纯化方法对肝细胞活力、生长的影响 | 第33-34页 |
| ·血清浓度对肝细胞贴壁和增殖的影响 | 第34页 |
| ·细胞接种浓度对肝细胞生长的影响 | 第34页 |
| ·CO2浓度和培养温度对肝细胞生长的影响 | 第34页 |
| ·不同时期肝细胞形态观察 | 第34页 |
| ·MTT 法测定不同时间草鱼肝细胞 A 值 | 第34-35页 |
| ·不同时期草鱼肝细胞 LDH 浓度、BUN 含量和 Alb 含量变化 | 第35页 |
| 4 讨论 | 第35-38页 |
| ·实验鱼的强化养殖 | 第35-36页 |
| ·草鱼肝细胞的分离、纯化条件的优化 | 第36页 |
| ·草鱼肝细胞培养条件及方法 | 第36-37页 |
| ·培养效果评价及应用 | 第37-38页 |
| 小结 | 第38-39页 |
| 图版 | 第39-41页 |
| 第三章 氧化豆油水溶物对草鱼肝细胞损伤作用的研究 | 第41-55页 |
| 1 实验材料 | 第41页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| 2 实验方法 | 第41-43页 |
| ·氧化豆油的制备 | 第41页 |
| ·氧化豆油水溶物的提取 | 第41-42页 |
| ·草鱼肝细胞的原代培养 | 第42页 |
| ·试验分组 | 第42页 |
| ·细胞培养液中 LDH、T-AOC 和 MDA 的测定 | 第42页 |
| ·电镜观察 | 第42-43页 |
| ·数据分析 | 第43页 |
| 3 结果 | 第43-46页 |
| ·正常豆油、氧化豆油、水洗油脂 IV、AV、POV、MDA 以及脂肪酸组成的变化 | 第43-44页 |
| ·细胞形态变化 | 第44页 |
| ·细胞培养液中 T-AOC、LDH、MDA 含量的变化 | 第44-45页 |
| ·电镜观察 | 第45-46页 |
| ·油红 O 和碱性磷酸酶染色观察 | 第46页 |
| 4 讨论 | 第46-49页 |
| ·氧化豆油与正常豆油成分比较分析 | 第46-47页 |
| ·氧化豆油水溶物对肝细胞形态的影响 | 第47-48页 |
| ·氧化豆油水溶物对肝细胞酶学指标的影响 | 第48-49页 |
| 小结 | 第49-50页 |
| 图版 | 第50-55页 |
| 第四章 氧化豆油水溶物对草鱼原代肝细胞相关基因表达活性的影响 | 第55-67页 |
| 1 材料与方法 | 第55-56页 |
| ·材料 | 第55页 |
| ·主要试剂 | 第55-56页 |
| 2 实验方法 | 第56-57页 |
| ·氧化豆油水溶物的提取 | 第56页 |
| ·草鱼肝细胞的原代培养与样品制取 | 第56页 |
| ·mRNA 的实时定量检测 | 第56-57页 |
| ·数据处理 | 第57页 |
| 3 结果与分析 | 第57-63页 |
| ·各油脂样品游离脂肪酸组成 | 第57页 |
| ·基因实时荧光定量 PCR 引物特异性检测 | 第57-60页 |
| ·各试验组草鱼肝细胞相关基因 mRNA 表达量 | 第60-63页 |
| 4 讨论 | 第63-66页 |
| ·氧化豆油水溶液成分探究 | 第63页 |
| ·氧化豆油水溶物诱导草鱼肝细胞损伤作用探究 | 第63-66页 |
| 小结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读硕士学位期间发表或待刊的论文 | 第80页 |
