| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-23页 |
| ·杜氏盐藻 | 第12-15页 |
| ·杜氏藻 | 第12页 |
| ·D. salina 和 D. bardawil | 第12-13页 |
| ·杜氏藻基因工程研究 | 第13-14页 |
| ·杜氏藻的应用价值和商业前景 | 第14-15页 |
| ·类胡萝卜素 | 第15-20页 |
| ·类胡萝卜素简介 | 第15-18页 |
| ·类胡萝卜素的基因工程研究 | 第18页 |
| ·类胡萝卜素的生产与应用 | 第18-20页 |
| ·报告基因与绿色荧光蛋白基因 | 第20-22页 |
| ·报告基因 | 第20-21页 |
| ·绿色荧光蛋白基因 | 第21-22页 |
| ·本课题的研究内容和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 巴氏杜氏 ZDS 基因的克隆 | 第23-48页 |
| ·引言 | 第23-24页 |
| ·试验材料与仪器 | 第24-28页 |
| ·藻种及培养液 | 第24-25页 |
| ·质粒和菌种 | 第25页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第25-26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26-27页 |
| ·常用试剂的配制 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-43页 |
| ·杜氏盐藻的培养 | 第28页 |
| ·盐藻基因组的提取 | 第28-30页 |
| ·大肠杆菌 GT-116 (Top10) 感受态的制备 | 第30页 |
| ·PCR 扩增目的基因 | 第30-32页 |
| ·目的 DNA 片段的回收 | 第32-33页 |
| ·DNA 的连接、转换、验证与保存 | 第33-36页 |
| ·分段 PCR——巴氏藻编码区序列的获得 | 第36-38页 |
| ·基因组步移——启动子与终止子的获得 | 第38-43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-46页 |
| ·杜氏藻基因组的提取 | 第43-44页 |
| ·ZDS 基因编码区序列的获取 | 第44-45页 |
| ·ZDS 基因启动子与终止子的获得 | 第45-46页 |
| ·完整 ZDS 基因 | 第46页 |
| ·本章小结 | 第46-48页 |
| 第三章 ZDS 基因的生物信息学分析 | 第48-57页 |
| ·引言 | 第48页 |
| ·ζ-胡萝卜素脱氢酶基因的生物信息学分析 | 第48-49页 |
| ·ORF 分析及基本性质预测与分析 | 第48页 |
| ·序列相似性搜索与保守结构域分析 | 第48-49页 |
| ·多重序列比对及构建系统发育树 | 第49页 |
| ·ζ-胡萝卜素脱氢酶基因编码区序列分析 | 第49页 |
| ·ζ-胡萝卜素脱氢酶基因启动子分析 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-56页 |
| ·ζ-胡萝卜素脱氢酶 ORF 分析 | 第49-50页 |
| ·序列相似性搜索与保守结构域分析 | 第50-51页 |
| ·多重比对与系统发育树构建 | 第51-52页 |
| ·ZDS 基因编码区序列分析 | 第52-54页 |
| ·ZDS 基因启动子分析 | 第54-56页 |
| ·本章小结 | 第56-57页 |
| 第四章 ZDS 基因启动子与终止子活性验证 | 第57-68页 |
| ·引言 | 第57页 |
| ·实验材料 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-65页 |
| ·质粒提取 | 第57-58页 |
| ·酶切产物纯化 | 第58-59页 |
| ·酶切位点分析与引物设计 | 第59-60页 |
| ·外源表达盒及重组质粒的构建 | 第60-64页 |
| ·启动子活性验证 | 第64-65页 |
| ·结果与讨论 | 第65-67页 |
| ·重组质粒的构建 | 第65-66页 |
| ·EGFP 的表达 | 第66-67页 |
| ·本章小结 | 第67-68页 |
| 结论与展望 | 第68-70页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-80页 |
| 附录:完整 ZDS 基因序列 | 第80-87页 |
| 攻读博士/硕士学位期间取得的研究成果 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 附件 | 第89页 |