摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-14页 |
文献综述 | 第14-28页 |
第一章 胰腺干细胞的研究进展及移植治疗糖尿病 | 第14-28页 |
·糖尿病及其治疗 | 第14-17页 |
·糖尿病 | 第14-15页 |
·糖尿病的主要治疗方法 | 第15-17页 |
·胰岛素的注射 | 第15页 |
·胰腺及胰岛的移植 | 第15页 |
·细胞移植治疗 | 第15-17页 |
·胰腺干细胞的研究进展 | 第17-27页 |
·胰腺发育 | 第17-18页 |
·胰腺发育过程中相关分子调控 | 第18-21页 |
·PDX1 | 第18-19页 |
·Ptf1a | 第19页 |
·Hb | 第19页 |
·Ngn3 | 第19-20页 |
·NeuroD1 | 第20页 |
·Is11 | 第20页 |
·Pax6 | 第20页 |
·Nkx2.2 | 第20页 |
·Nkx6.1 | 第20-21页 |
·MafA | 第21页 |
·胰腺干细胞的来源 | 第21-22页 |
·胰腺干细胞来源于胰腺导管 | 第21页 |
·胰腺干细胞来源于胰岛 | 第21页 |
·胰腺干细胞来源于腺泡 | 第21-22页 |
·胰腺干细胞的分离培养 | 第22-23页 |
·取材 | 第22页 |
·分离纯化 | 第22-23页 |
·培养 | 第23页 |
·向β细胞定向诱导分化 | 第23-27页 |
·向β细胞定向分化的相关方案 | 第23-24页 |
·向β细胞分化的相关信号通路 | 第24-27页 |
·小结与展望 | 第27-28页 |
实验研究 | 第28-75页 |
第二章 永生化胎猪胰腺源间充质干细胞的分离培养与生物学特性鉴定 | 第28-44页 |
·材料与方法 | 第28-34页 |
·实验动物 | 第28-29页 |
·主要仪器 | 第29页 |
·主要试剂 | 第29-30页 |
·主要溶液的配制 | 第30页 |
·胎猪胰腺组织的分离 | 第30-31页 |
·胎猪胰腺源间充质干细胞的分离与培养 | 第31页 |
·胎猪胰腺源间充质干细胞转染hTERT 基因 | 第31页 |
·细胞生长曲线的绘制及群体倍增时间的计算 | 第31-32页 |
·流式细胞仪分析细胞表面抗原 | 第32页 |
·免疫荧光/组织化学染色 | 第32页 |
·RT-PCR | 第32-33页 |
·致瘤性检测 | 第33页 |
·体外向神经细胞诱导分化 | 第33-34页 |
·体外向心肌细胞诱导分化 | 第34页 |
·体外向生殖细胞诱导分化 | 第34页 |
·结果 | 第34-41页 |
·胎猪胰腺源细胞团的分离、培养 | 第34页 |
·胎猪胰腺源间充质样细胞转染hTERT | 第34-35页 |
·细胞生长特性 | 第35页 |
·永生化胎猪胰腺源间充质细胞表达的特征性标记 | 第35-38页 |
·胰腺细胞相关标记检测 | 第35-36页 |
·细胞表面抗原标记检测 | 第36-37页 |
·细胞多能性标记检测 | 第37-38页 |
·致瘤性检测 | 第38页 |
·体外分化潜能的检测 | 第38-41页 |
·向神经细胞定向诱导分化 | 第38-39页 |
·向心肌细胞定向诱导分化 | 第39-40页 |
·向生殖细胞定向诱导分化 | 第40-41页 |
·讨论 | 第41-43页 |
·小结 | 第43-44页 |
第三章 永生化胎猪胰腺源间充质干细胞向胰岛素分泌细胞定向分化 | 第44-58页 |
·材料和方法 | 第44-48页 |
·主要仪器 | 第44页 |
·主要试剂 | 第44-45页 |
·主要试剂配制 | 第45页 |
·实验动物 | 第45页 |
·永生化胎猪胰腺源间充质干细胞向胰岛素分泌细胞定向诱导分化 | 第45-46页 |
·双硫腙染色和免疫荧光染色 | 第46页 |
·QRT-PCR | 第46页 |
·Western-blotting 检测 | 第46页 |
·葡萄糖刺激试验 | 第46-47页 |
·诱导后的细胞团移植治疗小鼠糖尿病 | 第47页 |
·小鼠糖尿病模型的建立 | 第47页 |
·细胞移植 | 第47页 |
·细胞移植治疗效果评估 | 第47页 |
·体内自发分化潜能 | 第47-48页 |
·数据处理 | 第48页 |
·结果 | 第48-55页 |
·DTZ 染色 | 第48页 |
·免疫荧光染色 | 第48-49页 |
·RT-PCR 和QRT-PCR 检测 | 第49-50页 |
·Western-blotting 检测 | 第50页 |
·葡萄糖刺激试验检测 | 第50-51页 |
·模型鼠体重监测结果 | 第51页 |
·血糖监测结果 | 第51-52页 |
·移植细胞的标记 | 第52页 |
·永生化胎猪胰腺源间充质干细胞在体内自发向生殖细胞分化 | 第52-53页 |
·永生化胎猪胰腺源间充质干细胞在体内自发向胰岛细胞团分化 | 第53-55页 |
·讨论 | 第55-56页 |
·小结 | 第56-58页 |
第四章 GSK3 抑制剂-BIO 调控永生化胎猪胰腺源间充质干细胞的增殖 | 第58-75页 |
·材料和方法 | 第58-60页 |
·主要仪器 | 第58页 |
·主要试剂 | 第58-59页 |
·BIO 对永生化胎猪胰腺源间充质干细胞的体外增殖的影响 | 第59-60页 |
·生长曲线的绘制 | 第59页 |
·免疫荧光染色检测 | 第59页 |
·RT-PCR 和QRT-PCR 检测 | 第59页 |
·Western-blotting 检测 | 第59页 |
·BrdU 增殖分析 | 第59-60页 |
·荧光素酶活性分析 | 第60页 |
·细胞凋亡检测(Tunel) | 第60页 |
·BIO 对永生化胎猪胰腺源间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化的影响 | 第60页 |
·体外永生化胎猪胰腺源间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化 | 第60页 |
·免疫荧光检测 | 第60页 |
·QRT-PCR 检测 | 第60页 |
·葡萄糖刺激试验 | 第60页 |
·数据处理 | 第60页 |
·结果 | 第60-73页 |
·BIO 能够促进永生化胎猪胰腺源间充质干细胞的自我更新 | 第60-70页 |
·形态学观察 | 第60-61页 |
·筛选出BIO 的最佳浓度 | 第61-62页 |
·细胞生长特性 | 第62-63页 |
·免疫荧光染色结果 | 第63-64页 |
·QRT-PCR 检测 | 第64-65页 |
·RT-PCR 检测 | 第65页 |
·Western-blotting 检测 | 第65-66页 |
·β-catenin 激活分析 | 第66-67页 |
·BrdU 增殖分析 | 第67-68页 |
·Tunel 染色分析 | 第68-69页 |
·E-cadherin 表达分析 | 第69-70页 |
·BIO 对永生化胎猪胰腺源间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化影响 | 第70-73页 |
·免疫荧光染色分析 | 第70-71页 |
·QRT-PCR 分析 | 第71-72页 |
·葡萄糖刺激试验检测 | 第72-73页 |
·讨论 | 第73-74页 |
·小结 | 第74-75页 |
结论 | 第75页 |
本研究的创新点与进一步研究的课题 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-86页 |
缩略词 | 第86-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
作者简介 | 第89页 |