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永生化胎猪胰腺源间充质干细胞株的建立及向胰岛素分泌细胞分化

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-14页
文献综述第14-28页
 第一章 胰腺干细胞的研究进展及移植治疗糖尿病第14-28页
   ·糖尿病及其治疗第14-17页
     ·糖尿病第14-15页
     ·糖尿病的主要治疗方法第15-17页
       ·胰岛素的注射第15页
       ·胰腺及胰岛的移植第15页
       ·细胞移植治疗第15-17页
   ·胰腺干细胞的研究进展第17-27页
     ·胰腺发育第17-18页
     ·胰腺发育过程中相关分子调控第18-21页
       ·PDX1第18-19页
       ·Ptf1a第19页
       ·Hb第19页
       ·Ngn3第19-20页
       ·NeuroD1第20页
       ·Is11第20页
       ·Pax6第20页
       ·Nkx2.2第20页
       ·Nkx6.1第20-21页
       ·MafA第21页
     ·胰腺干细胞的来源第21-22页
       ·胰腺干细胞来源于胰腺导管第21页
       ·胰腺干细胞来源于胰岛第21页
       ·胰腺干细胞来源于腺泡第21-22页
     ·胰腺干细胞的分离培养第22-23页
       ·取材第22页
       ·分离纯化第22-23页
       ·培养第23页
     ·向β细胞定向诱导分化第23-27页
       ·向β细胞定向分化的相关方案第23-24页
       ·向β细胞分化的相关信号通路第24-27页
   ·小结与展望第27-28页
实验研究第28-75页
 第二章 永生化胎猪胰腺源间充质干细胞的分离培养与生物学特性鉴定第28-44页
   ·材料与方法第28-34页
     ·实验动物第28-29页
     ·主要仪器第29页
     ·主要试剂第29-30页
     ·主要溶液的配制第30页
     ·胎猪胰腺组织的分离第30-31页
     ·胎猪胰腺源间充质干细胞的分离与培养第31页
     ·胎猪胰腺源间充质干细胞转染hTERT 基因第31页
     ·细胞生长曲线的绘制及群体倍增时间的计算第31-32页
     ·流式细胞仪分析细胞表面抗原第32页
     ·免疫荧光/组织化学染色第32页
     ·RT-PCR第32-33页
     ·致瘤性检测第33页
     ·体外向神经细胞诱导分化第33-34页
     ·体外向心肌细胞诱导分化第34页
     ·体外向生殖细胞诱导分化第34页
   ·结果第34-41页
     ·胎猪胰腺源细胞团的分离、培养第34页
     ·胎猪胰腺源间充质样细胞转染hTERT第34-35页
     ·细胞生长特性第35页
     ·永生化胎猪胰腺源间充质细胞表达的特征性标记第35-38页
       ·胰腺细胞相关标记检测第35-36页
       ·细胞表面抗原标记检测第36-37页
       ·细胞多能性标记检测第37-38页
     ·致瘤性检测第38页
     ·体外分化潜能的检测第38-41页
       ·向神经细胞定向诱导分化第38-39页
       ·向心肌细胞定向诱导分化第39-40页
       ·向生殖细胞定向诱导分化第40-41页
   ·讨论第41-43页
   ·小结第43-44页
 第三章 永生化胎猪胰腺源间充质干细胞向胰岛素分泌细胞定向分化第44-58页
   ·材料和方法第44-48页
     ·主要仪器第44页
     ·主要试剂第44-45页
     ·主要试剂配制第45页
     ·实验动物第45页
     ·永生化胎猪胰腺源间充质干细胞向胰岛素分泌细胞定向诱导分化第45-46页
     ·双硫腙染色和免疫荧光染色第46页
     ·QRT-PCR第46页
     ·Western-blotting 检测第46页
     ·葡萄糖刺激试验第46-47页
     ·诱导后的细胞团移植治疗小鼠糖尿病第47页
       ·小鼠糖尿病模型的建立第47页
       ·细胞移植第47页
       ·细胞移植治疗效果评估第47页
     ·体内自发分化潜能第47-48页
     ·数据处理第48页
   ·结果第48-55页
     ·DTZ 染色第48页
     ·免疫荧光染色第48-49页
     ·RT-PCR 和QRT-PCR 检测第49-50页
     ·Western-blotting 检测第50页
     ·葡萄糖刺激试验检测第50-51页
     ·模型鼠体重监测结果第51页
     ·血糖监测结果第51-52页
     ·移植细胞的标记第52页
     ·永生化胎猪胰腺源间充质干细胞在体内自发向生殖细胞分化第52-53页
     ·永生化胎猪胰腺源间充质干细胞在体内自发向胰岛细胞团分化第53-55页
   ·讨论第55-56页
   ·小结第56-58页
 第四章 GSK3 抑制剂-BIO 调控永生化胎猪胰腺源间充质干细胞的增殖第58-75页
   ·材料和方法第58-60页
     ·主要仪器第58页
     ·主要试剂第58-59页
     ·BIO 对永生化胎猪胰腺源间充质干细胞的体外增殖的影响第59-60页
       ·生长曲线的绘制第59页
       ·免疫荧光染色检测第59页
       ·RT-PCR 和QRT-PCR 检测第59页
       ·Western-blotting 检测第59页
       ·BrdU 增殖分析第59-60页
       ·荧光素酶活性分析第60页
       ·细胞凋亡检测(Tunel)第60页
     ·BIO 对永生化胎猪胰腺源间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化的影响第60页
       ·体外永生化胎猪胰腺源间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化第60页
       ·免疫荧光检测第60页
       ·QRT-PCR 检测第60页
       ·葡萄糖刺激试验第60页
     ·数据处理第60页
   ·结果第60-73页
     ·BIO 能够促进永生化胎猪胰腺源间充质干细胞的自我更新第60-70页
       ·形态学观察第60-61页
       ·筛选出BIO 的最佳浓度第61-62页
       ·细胞生长特性第62-63页
       ·免疫荧光染色结果第63-64页
       ·QRT-PCR 检测第64-65页
       ·RT-PCR 检测第65页
       ·Western-blotting 检测第65-66页
       ·β-catenin 激活分析第66-67页
       ·BrdU 增殖分析第67-68页
       ·Tunel 染色分析第68-69页
       ·E-cadherin 表达分析第69-70页
     ·BIO 对永生化胎猪胰腺源间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化影响第70-73页
       ·免疫荧光染色分析第70-71页
       ·QRT-PCR 分析第71-72页
       ·葡萄糖刺激试验检测第72-73页
   ·讨论第73-74页
   ·小结第74-75页
结论第75页
本研究的创新点与进一步研究的课题第75-76页
参考文献第76-86页
缩略词第86-88页
致谢第88-89页
作者简介第89页

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