中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
引言 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-27页 |
1 细胞色素 P450 酶系与细胞色素 P450 | 第12-13页 |
·细胞色素 P450 酶系 | 第12页 |
·细胞色素 P450 | 第12-13页 |
2 昆虫细胞色素 P450 研究进展 | 第13-17页 |
·昆虫 P450 的结构特点 | 第14-15页 |
·昆虫 P450 的表达与调控 | 第15页 |
·昆虫 P450 表达的调控机制 | 第15-16页 |
·昆虫 P450 的功能 | 第16-17页 |
3 家蚕细胞色素 P450 研究进展 | 第17-19页 |
·家蚕 P450 研究进展 | 第17-18页 |
·本研究室工作 | 第18-19页 |
4 双荧光素酶报告基因分析系统 | 第19-23页 |
·概述 | 第19-20页 |
·DLR 分析系统的化学特性 | 第20-21页 |
·DLR 分析系统的载体系列 | 第21-23页 |
5 启动子及其研究进展 | 第23-27页 |
·概述 | 第23页 |
·启动子的结构特点 | 第23-24页 |
·昆虫启动子研究方法 | 第24-25页 |
·昆虫启动子研究进展 | 第25-27页 |
第二章 氟化钠 NaF 诱导下家蚕 CYP9A19 和 CYP9A22 基因的表达变化 | 第27-33页 |
摘要 | 第27页 |
1 材料与方法 | 第27-30页 |
·材料 | 第27-28页 |
·核酸的提取 | 第28页 |
·逆转录 | 第28-29页 |
·引物的设计与合成 | 第29页 |
·Real-time PCR | 第29页 |
·标准曲线制作 | 第29-30页 |
·数据统计与分析 | 第30页 |
2 结果与分析 | 第30-31页 |
·无诱导时家蚕 CYP9A19 和 CYP9A22 基因在不同组织中的表达水平 | 第30页 |
·氟化钠诱导下家蚕 CYP9A19 和 CYP9A22 基因的表达变化 | 第30-31页 |
3 讨论 | 第31-33页 |
第三章 利用 RNA 干涉技术在细胞水平分析家蚕 CYP9A19 和 CYP9A22 基因的表达变化 | 第33-38页 |
摘要 | 第33页 |
1 材料与方法 | 第33-36页 |
·实验材料 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-36页 |
2 结果与分析 | 第36-37页 |
·siRNA 对 CYP9A19,CYP9A22 表达的抑制 | 第36-37页 |
3 讨论 | 第37-38页 |
第四章 家蚕 CYP9A19 和 CYP9A22 基因启动子的活性分析 | 第38-48页 |
摘要 | 第38页 |
1 引言 | 第38-39页 |
2 材料与方法 | 第39-42页 |
·实验材料与试剂 | 第39页 |
·家蚕 CYP9A19 和 CYP9A22 基因启动子的克隆 | 第39-41页 |
·荧光素酶报告质粒的构建 | 第41页 |
·细胞转染 | 第41-42页 |
·细胞抽提物制备和双荧光素酶活性检测 | 第42页 |
3 结果与分析 | 第42-46页 |
·生物信息学分析 CYP9A19 和 CYP9A22 基因启动子 | 第42-44页 |
·CYP9A19 和 CYP9A22 基因启动子的 PCR 扩增 | 第44页 |
·CYP9A19 和 CYP9A22 基因启动子报告载体的构建 | 第44页 |
·CYP9A19 和 CYP9A22 基因启动子在 BmN 细胞中的转录活性 | 第44-45页 |
·氟化钠诱导对 CYP9A19 和 CYP9A22 基因启动子转录的影响 | 第45-46页 |
4 讨论 | 第46-48页 |
第五章 讨论不同载体大小和构建方法对双荧光素酶报告系统的影响 | 第48-56页 |
摘要 | 第48页 |
1 引言 | 第48-49页 |
2 材料与方法 | 第49-51页 |
·实验材料与试剂 | 第49页 |
·荧光素酶报告质粒的构建 | 第49-51页 |
·细胞转染和双荧光素酶活性检测 | 第51页 |
3 结果与分析 | 第51-54页 |
·标准化质粒的构建 | 第51-52页 |
·CYP9A19 和 CYP9A22 基因启动子报告质粒的构建 | 第52页 |
·转染效率相关于载体大小的标准曲线 | 第52-53页 |
·两种载体构建方法双荧光素酶系统检测结果的比较 | 第53-54页 |
4 讨论 | 第54-56页 |
结论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-68页 |