| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-29页 |
| ·叶绿体内的氧化还原 | 第11-14页 |
| ·叶绿体内的还原系统 | 第11-12页 |
| ·叶绿体内的氧化系统 | 第12-14页 |
| ·VKOR 研究进展 | 第14-17页 |
| ·动物及微生物 VKOR 的研究进展 | 第14-16页 |
| ·植物中 VKOR 的研究进展 | 第16-17页 |
| ·蛋白质折叠与结构 | 第17-23页 |
| ·富含二硫键蛋白质折叠的过程及方式 | 第17-18页 |
| ·二硫键在蛋白质折叠中的作用 | 第18-19页 |
| ·蛋白质构象的研究方法 | 第19页 |
| ·大肠杆菌 DsbA，DsbC 以及真核 PDI 在蛋白质折叠中的作用 | 第19-23页 |
| ·定点突变技术用于蛋白质功能的研究 | 第23-24页 |
| ·硫氧还蛋白底物蛋白的捕获 | 第24-27页 |
| ·利用巯基标记来检测硫氧还蛋白对靶蛋白二硫键的还原 | 第25-26页 |
| ·利用亲和层析的方法检测硫氧还蛋白的靶蛋白 | 第26-27页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第27-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-43页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·植物材料培养与处理 | 第29页 |
| ·菌株、质粒、酶 | 第29页 |
| ·工具酶和生化试剂 | 第29页 |
| ·主要实验仪器 | 第29-30页 |
| ·主要试剂的配制 | 第30-32页 |
| ·碱裂解法提质粒的相关溶液 | 第30页 |
| ·SDS- PAGE 缓冲液的配制 | 第30-31页 |
| ·蛋白提取过程中相关溶液的配制 | 第31-32页 |
| ·亲和层析中相关溶液的配制 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-39页 |
| ·VKOR 基因的扩增、克隆及序列测定 | 第32-33页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第33-35页 |
| ·感受态大肠杆菌 DH5α的制备 | 第35-36页 |
| ·连接产物的转化 | 第36页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第36-38页 |
| ·E.coli BL21 原核表达的诱导 | 第38页 |
| ·聚丙烯凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第38-39页 |
| ·原核表达 AtDsbA 的纯化 | 第39-40页 |
| ·粗酶液的制取 | 第39-40页 |
| ·亲和层析纯化 | 第40页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第40页 |
| ·AtDsbA 的活性检测 | 第40-41页 |
| ·AtDsbA 还原活性检测 | 第40-41页 |
| ·AtDsbA 的氧化性检测 | 第41页 |
| ·AtDsbA 的异构酶活性检测 | 第41页 |
| ·叶绿体蛋白质的提取及底物捕获 | 第41-43页 |
| ·叶绿体蛋白质的提取 | 第41-42页 |
| ·蛋白质浓缩 | 第42页 |
| ·底物蛋白的捕获 | 第42-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-54页 |
| ·拟南芥 AtDsbA 基因的扩增、克隆及表达 | 第43-45页 |
| ·AtDsbA 基因的扩增 | 第43页 |
| ·重组质粒的构建及 PCR 鉴定 | 第43-44页 |
| ·重组质粒 AtDsbA 的序列测定 | 第44页 |
| ·AtDsbA 的大量表达和纯化 | 第44-45页 |
| ·AtVKOR-DsbA 三维结构的模拟预测 | 第45-46页 |
| ·AtDsbA 的还原活性检测 | 第46-47页 |
| ·AtDsbA 的氧化活性的检测 | 第47-48页 |
| ·AtDsbA 异构酶活性的检测 | 第48-49页 |
| ·AtDsbA 必需氨基酸的确定 | 第49-51页 |
| ·AtDsbA 的突变体 | 第49-51页 |
| ·AtVKOR-DsbA 底物的捕获 | 第51-54页 |
| 4 讨论 | 第54-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第70页 |