中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-15页 |
第1章 前言 | 第15-33页 |
·HIV-1 Vpu 蛋白的研究现状 | 第15-25页 |
·HIV-1 简介 | 第15-17页 |
·HIV-1 的辅助蛋白及宿主限制因子 | 第17-19页 |
·HIV-1 Vpu 的功能及性质 | 第19-25页 |
·Tetherin 的发现及功能 | 第25-29页 |
·Tetherin 的发现 | 第25-26页 |
·Tetherin 的抗病毒原理 | 第26-29页 |
·Vpu 与 Tetherin 相互作用的研究现状 | 第29-31页 |
·Vpu 拮抗 Tetherin 的作用途径 | 第29-31页 |
·Vpu 与 Tetherin 的直接物理作用 | 第31页 |
·立题依据 | 第31-33页 |
第2章 材料与方法 | 第33-45页 |
·材料与常规试剂 | 第33-38页 |
·质粒及突变体构建 | 第33-37页 |
·抗体 | 第37-38页 |
·仪器与设备 | 第38页 |
·方法与相关试剂 | 第38-45页 |
·细胞培养及转染 | 第38-39页 |
·免疫印迹法 | 第39页 |
·蔗糖垫超速离心法收获病毒 | 第39页 |
·指示细胞测定感染性病毒颗粒释放 | 第39-40页 |
·免疫沉淀 | 第40页 |
·免疫荧光 | 第40-41页 |
·流式细胞术 | 第41页 |
·镍柱亲和纯化 | 第41-42页 |
·Pull down | 第42页 |
·ELISA | 第42页 |
·非变性电泳与非还原电泳 | 第42-43页 |
·胞浆游离钙离子测定 | 第43-45页 |
第3章 结果与讨论 | 第45-101页 |
·Vpu 与 Tetherin 体内相互作用及位点突变研究 | 第45-62页 |
·Vpu TM 区突变体的设计构建及基本性质测定 | 第45-50页 |
·Vpu TM 区突变对增强 HIV-1 病毒释放能力的影响 | 第50-52页 |
·Vpu TM 区突变对介导 Tetherin 降解和表面下调作用的影响 | 第52-55页 |
·Vpu TM 区突变对 Vpu 与 Tetherin 相互作用的阻断 | 第55-56页 |
·Vpu TM 区突变对介导 CD4 降解和表面下调作用的影响 | 第56-59页 |
·讨论 | 第59-61页 |
·小结 | 第61-62页 |
·Vpu 与 Tetherin 蛋白的纯化及体外相互作用测定 | 第62-71页 |
·Vpu 与 Tetherin 蛋白的构建及表达纯化 | 第62-64页 |
·Vpu 与 Tetherin 蛋白复合物的共同纯化 | 第64-65页 |
·Vpu 与 Tetherin 蛋白体外相互作用测定 | 第65-69页 |
·讨论 | 第69-70页 |
·小结 | 第70-71页 |
·Vpu 拮抗 Tetherin 的作用途径研究 | 第71-89页 |
·降解途径中可能包含的泛素蛋白酶体的验证 | 第71-77页 |
·降解作用与表面下调作用的比较 | 第77-81页 |
·Ca~(2+)对病毒释放的影响及 Ca~(2+)介导的 Vpu/Tetherin 作用途径假说 | 第81-85页 |
·讨论 | 第85-88页 |
·小结 | 第88-89页 |
·阻断 Vpu/Tetherin 相互作用用于对抗 HIV-1 的可能性:含 TM 区的 Tetherin 突变体对 HIV-1 Vpu 的封闭作用 | 第89-101页 |
·设计思想及含 TM 区的 Tetherin 突变体构建 | 第89-91页 |
·含 TM 区的 Tetherin 突变体功能验证及基本性质 | 第91-95页 |
·含 TM 区的 Tetherin 突变体对病毒释放的抑制作用 | 第95-98页 |
·讨论 | 第98页 |
·小结 | 第98-101页 |
结论 | 第101-103页 |
参考文献 | 第103-114页 |
作者简历 | 第114-115页 |
致谢 | 第115页 |