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HIV-1 Vpu蛋白与人类Tetherin蛋白相互作用机制研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-15页
第1章 前言第15-33页
   ·HIV-1 Vpu 蛋白的研究现状第15-25页
     ·HIV-1 简介第15-17页
     ·HIV-1 的辅助蛋白及宿主限制因子第17-19页
     ·HIV-1 Vpu 的功能及性质第19-25页
   ·Tetherin 的发现及功能第25-29页
     ·Tetherin 的发现第25-26页
     ·Tetherin 的抗病毒原理第26-29页
   ·Vpu 与 Tetherin 相互作用的研究现状第29-31页
     ·Vpu 拮抗 Tetherin 的作用途径第29-31页
     ·Vpu 与 Tetherin 的直接物理作用第31页
   ·立题依据第31-33页
第2章 材料与方法第33-45页
   ·材料与常规试剂第33-38页
     ·质粒及突变体构建第33-37页
     ·抗体第37-38页
   ·仪器与设备第38页
   ·方法与相关试剂第38-45页
     ·细胞培养及转染第38-39页
     ·免疫印迹法第39页
     ·蔗糖垫超速离心法收获病毒第39页
     ·指示细胞测定感染性病毒颗粒释放第39-40页
     ·免疫沉淀第40页
     ·免疫荧光第40-41页
     ·流式细胞术第41页
     ·镍柱亲和纯化第41-42页
     ·Pull down第42页
     ·ELISA第42页
     ·非变性电泳与非还原电泳第42-43页
     ·胞浆游离钙离子测定第43-45页
第3章 结果与讨论第45-101页
   ·Vpu 与 Tetherin 体内相互作用及位点突变研究第45-62页
     ·Vpu TM 区突变体的设计构建及基本性质测定第45-50页
     ·Vpu TM 区突变对增强 HIV-1 病毒释放能力的影响第50-52页
     ·Vpu TM 区突变对介导 Tetherin 降解和表面下调作用的影响第52-55页
     ·Vpu TM 区突变对 Vpu 与 Tetherin 相互作用的阻断第55-56页
     ·Vpu TM 区突变对介导 CD4 降解和表面下调作用的影响第56-59页
     ·讨论第59-61页
     ·小结第61-62页
   ·Vpu 与 Tetherin 蛋白的纯化及体外相互作用测定第62-71页
     ·Vpu 与 Tetherin 蛋白的构建及表达纯化第62-64页
     ·Vpu 与 Tetherin 蛋白复合物的共同纯化第64-65页
     ·Vpu 与 Tetherin 蛋白体外相互作用测定第65-69页
     ·讨论第69-70页
     ·小结第70-71页
   ·Vpu 拮抗 Tetherin 的作用途径研究第71-89页
     ·降解途径中可能包含的泛素蛋白酶体的验证第71-77页
     ·降解作用与表面下调作用的比较第77-81页
     ·Ca~(2+)对病毒释放的影响及 Ca~(2+)介导的 Vpu/Tetherin 作用途径假说第81-85页
     ·讨论第85-88页
     ·小结第88-89页
   ·阻断 Vpu/Tetherin 相互作用用于对抗 HIV-1 的可能性:含 TM 区的 Tetherin 突变体对 HIV-1 Vpu 的封闭作用第89-101页
     ·设计思想及含 TM 区的 Tetherin 突变体构建第89-91页
     ·含 TM 区的 Tetherin 突变体功能验证及基本性质第91-95页
     ·含 TM 区的 Tetherin 突变体对病毒释放的抑制作用第95-98页
     ·讨论第98页
     ·小结第98-101页
结论第101-103页
参考文献第103-114页
作者简历第114-115页
致谢第115页

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