| 第1章 引言 | 第1-22页 |
| ·血栓病 | 第9-11页 |
| ·蚯蚓纤溶酶的研究进展 | 第11-18页 |
| ·蚯蚓纤溶酶的应用 | 第11-13页 |
| ·蚯蚓纤溶酶的生化提取与组成成分 | 第13-15页 |
| ·蚯蚓纤溶酶的分子生物学研究进展 | 第15-18页 |
| ·甲醇酵母表达系统的研究进展 | 第18-20页 |
| ·前期基础及本研究的目的、意义 | 第20-22页 |
| 第2章 重组菌株的大量转化 | 第22-30页 |
| ·材料与方法 | 第22-25页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-25页 |
| ·结果 | 第25-28页 |
| ·pPIC9K-EFE6的提取与鉴定 | 第25页 |
| ·pPIC9K-EFE6的线性化及DNA样品浓度检测 | 第25-26页 |
| ·甲醇酵母的分离与鉴定 | 第26-27页 |
| ·电转化结果 | 第27-28页 |
| ·讨论 | 第28-30页 |
| 第3章 高表达转化子的筛选与鉴定 | 第30-39页 |
| ·材料与方法 | 第30-33页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-33页 |
| ·结果 | 第33-37页 |
| ·SDS-PAGE分析原核表达产物 | 第33-34页 |
| ·抗原的纯化 | 第34页 |
| ·原双位膜法筛选甲醇酵母转化子 | 第34-35页 |
| ·甲醇酵母阳性重组子的PCR鉴定 | 第35页 |
| ·重组子的表型鉴定 | 第35-36页 |
| ·G418平板筛选EFE和HSA共表达菌株 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 第4章 重组EFE的表达及分析鉴定 | 第39-50页 |
| ·材料与方法 | 第39-43页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-43页 |
| ·结果 | 第43-47页 |
| ·RT-PCR扩增检测EFE的转录 | 第43-44页 |
| ·SDS-PAGE分析表达产物 | 第44页 |
| ·表达产物的Western blotting分析 | 第44-45页 |
| ·表达条件的正交实验结果 | 第45页 |
| ·酵母表达产物与其它EFE蛋白的Western blotting分析 | 第45-46页 |
| ·共表达菌株的诱导与表达产物的分析 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-50页 |
| 第5章 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 附录1 | 第56-57页 |
| 附录2 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |