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日本沼虾肝胰腺碱性磷酸酶的纯化及特性研究

第一章 绪论第1-15页
 1.1 目的与意义第7页
 1.2 设计方案第7页
 1.3 碱性磷酸酶的国内外研究进展第7-15页
  1.3.1 引言第7页
  1.3.2 碱性磷酸酶的提纯方法第7-9页
  1.3.3 碱性磷酸酶的理化性质及动力学研究第9-11页
   1.3.3.1 理化性质及动力学特征第9页
   1.3.3.2 重金属及有机物对碱性磷酸酶活力的影响第9-11页
    1.3.3.2.1 重金属的影响第9-10页
    1.3.3.2.2 有机物的影响第10-11页
   1.3.3.3 碱性磷酸酶功能基团的研究第11页
  1.3.4 碱性磷酸酶酶活的测定第11-12页
   1.3.4.1 分光光度法第11-12页
   1.3.4.2 荧光法第12页
   1.3.4.3 双酶级联法第12页
  1.3.5 碱性磷酸酶同工酶的研究第12-13页
  1.3.6 碱性磷酸酶固定化的研究第13-14页
  1.3.7 结语第14-15页
第二章 材料与方法第15-18页
 2.1 日本沼虾肝胰腺碱性磷酸酶的提纯方法第15-16页
  2.1.1 实验材料第15页
  2.1.2 实验试剂第15页
  2.1.3 实验仪器第15页
  2.1.4 实验方法第15-16页
   2.1.4.1 酶的分离纯化第15-16页
   2.1.4.2 酶的纯度鉴定第16页
   2.1.4.3 酶活力的测定第16页
   2.1.4.4 蛋白含量的测定第16页
 2.2 日本沼虾肝胰腺碱性磷酸酶理化性质的研究第16-17页
  2.2.1 实验材料第16页
  2.2.2 试剂与仪器第16页
  2.2.3 实验方法第16-17页
   2.2.3.1 酶的分离纯化第16页
   2.2.3.2 酶活力的测定第16页
   2.2.3.3 pH值对酶活力的影响第16页
   2.2.3.4 温度对酶活力的影响第16-17页
   2.2.3.5 米氏常数的测定第17页
   2.2.3.6 化学物质对酶活力的影响第17页
 2.3 日本沼虾肝胰腺碱性磷酸功能基团的研究第17-18页
  2.3.1 实验材料第17页
  2.3.2 试剂与仪器第17页
  2.3.3 实验方法第17-18页
   2.3.3.1 酶的分离纯化第17页
   2.3.3.2 化学修饰测酶活第17-18页
第三章 日本沼虾肝胰腺碱性磷酸酶提纯方法的研究第18-22页
 3.1 引言第18页
 3.2 材料与方法第18页
 3.3 结果第18-21页
  3.3.1 CM-纤维素柱层析的纯化结果第18-19页
  3.3.2 Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱层析的纯化结果第19-20页
  3.3.3 DEAE-纤维素柱层析的纯化结果第20-21页
 3.4 讨论第21-22页
第四章 日本沼虾肝胰腺碱性磷酸酶理化性质的研究第22-29页
 4.1 引言第22页
 4.2 材料与方法第22页
 4.3 结果第22-28页
  4.3.1 酶的分离纯化第22页
  4.3.2 最适pH值第22页
  4.3.3 酶的最适温度第22页
  4.3.4 Km值的测定第22-24页
  4.3.5 Mg~(2+)、Mn~(2+)、Zn~(2+)、Cu~(2+)的影响第24-25页
  4.3.6 有机物的影响第25-28页
 4.4 讨论第28-29页
第五章 日本沼虾肝胰腺碱性磷酸酶功能基团的研究第29-35页
 5.1 引言第29页
 5.2 材料与方法第29页
 5.3 结果第29-34页
  5.3.1 酶的分离纯化第29页
  5.3.2 巯基乙醇对碱性磷酸酶活力的影响第29-30页
  5.3.3 甲醛对碱性磷酸酶活力的影响第30页
  5.3.4 乙酰丙酮对碱性磷酸酶活力的影响第30-31页
  5.3.5 苯甲基磺酰氟对碱性磷酸酶活力的影响第31-32页
  5.3.6 一氯乙酸对碱性磷酸酶活力的影响第32-33页
  5.3.7 N-溴代琥珀酰亚胺对碱性磷酸酶活力的影响第33-34页
 5.4 讨论第34-35页
结语第35-36页
参考文献第36-41页
致谢第41页

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