第一章 绪论 | 第1-15页 |
1.1 目的与意义 | 第7页 |
1.2 设计方案 | 第7页 |
1.3 碱性磷酸酶的国内外研究进展 | 第7-15页 |
1.3.1 引言 | 第7页 |
1.3.2 碱性磷酸酶的提纯方法 | 第7-9页 |
1.3.3 碱性磷酸酶的理化性质及动力学研究 | 第9-11页 |
1.3.3.1 理化性质及动力学特征 | 第9页 |
1.3.3.2 重金属及有机物对碱性磷酸酶活力的影响 | 第9-11页 |
1.3.3.2.1 重金属的影响 | 第9-10页 |
1.3.3.2.2 有机物的影响 | 第10-11页 |
1.3.3.3 碱性磷酸酶功能基团的研究 | 第11页 |
1.3.4 碱性磷酸酶酶活的测定 | 第11-12页 |
1.3.4.1 分光光度法 | 第11-12页 |
1.3.4.2 荧光法 | 第12页 |
1.3.4.3 双酶级联法 | 第12页 |
1.3.5 碱性磷酸酶同工酶的研究 | 第12-13页 |
1.3.6 碱性磷酸酶固定化的研究 | 第13-14页 |
1.3.7 结语 | 第14-15页 |
第二章 材料与方法 | 第15-18页 |
2.1 日本沼虾肝胰腺碱性磷酸酶的提纯方法 | 第15-16页 |
2.1.1 实验材料 | 第15页 |
2.1.2 实验试剂 | 第15页 |
2.1.3 实验仪器 | 第15页 |
2.1.4 实验方法 | 第15-16页 |
2.1.4.1 酶的分离纯化 | 第15-16页 |
2.1.4.2 酶的纯度鉴定 | 第16页 |
2.1.4.3 酶活力的测定 | 第16页 |
2.1.4.4 蛋白含量的测定 | 第16页 |
2.2 日本沼虾肝胰腺碱性磷酸酶理化性质的研究 | 第16-17页 |
2.2.1 实验材料 | 第16页 |
2.2.2 试剂与仪器 | 第16页 |
2.2.3 实验方法 | 第16-17页 |
2.2.3.1 酶的分离纯化 | 第16页 |
2.2.3.2 酶活力的测定 | 第16页 |
2.2.3.3 pH值对酶活力的影响 | 第16页 |
2.2.3.4 温度对酶活力的影响 | 第16-17页 |
2.2.3.5 米氏常数的测定 | 第17页 |
2.2.3.6 化学物质对酶活力的影响 | 第17页 |
2.3 日本沼虾肝胰腺碱性磷酸功能基团的研究 | 第17-18页 |
2.3.1 实验材料 | 第17页 |
2.3.2 试剂与仪器 | 第17页 |
2.3.3 实验方法 | 第17-18页 |
2.3.3.1 酶的分离纯化 | 第17页 |
2.3.3.2 化学修饰测酶活 | 第17-18页 |
第三章 日本沼虾肝胰腺碱性磷酸酶提纯方法的研究 | 第18-22页 |
3.1 引言 | 第18页 |
3.2 材料与方法 | 第18页 |
3.3 结果 | 第18-21页 |
3.3.1 CM-纤维素柱层析的纯化结果 | 第18-19页 |
3.3.2 Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱层析的纯化结果 | 第19-20页 |
3.3.3 DEAE-纤维素柱层析的纯化结果 | 第20-21页 |
3.4 讨论 | 第21-22页 |
第四章 日本沼虾肝胰腺碱性磷酸酶理化性质的研究 | 第22-29页 |
4.1 引言 | 第22页 |
4.2 材料与方法 | 第22页 |
4.3 结果 | 第22-28页 |
4.3.1 酶的分离纯化 | 第22页 |
4.3.2 最适pH值 | 第22页 |
4.3.3 酶的最适温度 | 第22页 |
4.3.4 Km值的测定 | 第22-24页 |
4.3.5 Mg~(2+)、Mn~(2+)、Zn~(2+)、Cu~(2+)的影响 | 第24-25页 |
4.3.6 有机物的影响 | 第25-28页 |
4.4 讨论 | 第28-29页 |
第五章 日本沼虾肝胰腺碱性磷酸酶功能基团的研究 | 第29-35页 |
5.1 引言 | 第29页 |
5.2 材料与方法 | 第29页 |
5.3 结果 | 第29-34页 |
5.3.1 酶的分离纯化 | 第29页 |
5.3.2 巯基乙醇对碱性磷酸酶活力的影响 | 第29-30页 |
5.3.3 甲醛对碱性磷酸酶活力的影响 | 第30页 |
5.3.4 乙酰丙酮对碱性磷酸酶活力的影响 | 第30-31页 |
5.3.5 苯甲基磺酰氟对碱性磷酸酶活力的影响 | 第31-32页 |
5.3.6 一氯乙酸对碱性磷酸酶活力的影响 | 第32-33页 |
5.3.7 N-溴代琥珀酰亚胺对碱性磷酸酶活力的影响 | 第33-34页 |
5.4 讨论 | 第34-35页 |
结语 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-41页 |
致谢 | 第41页 |