| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 序言 | 第13-20页 |
| 1. 血吸虫的主要种类和分布 | 第13页 |
| 2. 日本血吸虫及其生活史 | 第13-14页 |
| 3. 血吸虫病的危害 | 第14-15页 |
| 4. 血吸虫病的流行情况 | 第15页 |
| 5. 日本血吸虫病免疫学诊断研究现状 | 第15-16页 |
| 6. 血吸虫疫苗研究 | 第16-17页 |
| 7 研究背景、研究内容及意义 | 第17-18页 |
| ·研究背景 | 第17-18页 |
| ·研究内容及意义 | 第18页 |
| 8. 本研究的技术路线 | 第18-20页 |
| 第一部分 日本血吸虫Tollip蛋白(SjTollip)的相关研究 | 第20-61页 |
| 前言 | 第20-22页 |
| 第1章 日本血吸虫Tollip蛋白(SjTollip)的生物信息学分析 | 第22-28页 |
| ·生物信息学分析所使用的工具软件 | 第22页 |
| ·预测开放阅读框架 | 第22页 |
| ·预测分子量/等电点 | 第22页 |
| ·预测信号肽 | 第22页 |
| ·预测跨膜区域 | 第22页 |
| ·预测功能位点及结构域 | 第22页 |
| ·同源序列搜索 | 第22页 |
| ·多序列比对 | 第22页 |
| ·构建进化树 | 第22页 |
| ·软件使用方法 | 第22页 |
| ·结果 | 第22-28页 |
| ·SjTollip的基本特性 | 第22页 |
| ·预测SjTollip信号肽 | 第22页 |
| ·预测SjTollip跨膜区域 | 第22页 |
| ·预测功能位点及结构域 | 第22-23页 |
| ·SjTollip同源序列搜索及多序列对比 | 第23-26页 |
| ·SjTollip及其他物种中同源序列进化树分析 | 第26-28页 |
| 第2章 日本血吸虫To1lip蛋白(SjTTollip)原核重组质粒构建及表达纯化 | 第28-40页 |
| ·材料、仪器及试剂 | 第28-30页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·试剂及仪器 | 第28-29页 |
| ·部分试剂的配方 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-35页 |
| ·SjTollip基因的扩增 | 第30-33页 |
| ·阳性克隆在大肠杆菌中的表达 | 第33-34页 |
| ·不可溶重组蛋白的纯化 | 第34-35页 |
| ·纯化后蛋白浓度测定 | 第35页 |
| ·结果 | 第35-39页 |
| ·SjTollip的PCR扩增 | 第35页 |
| ·SjTollip重组质粒的构建及鉴定 | 第35-36页 |
| ·SjTollip的原核表达 | 第36-37页 |
| ·rSjTollip的纯化 | 第37-38页 |
| ·rSjTollip的蛋白浓度测定 | 第38-39页 |
| ·结论及讨论 | 第39-40页 |
| 第3章 重组日本血吸虫Tollip蛋白(rSjTollip)兔多克隆抗体制备及滴度评价 | 第40-43页 |
| ·材料、仪器及试剂 | 第40页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·仪器 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-41页 |
| ·兔多克隆抗体的制备 | 第40页 |
| ·兔多克隆抗体滴度评价(间接ELISA法) | 第40-41页 |
| ·结果 | 第41页 |
| ·重组日本血吸虫Tollip蛋白(rSjTollip)兔多克隆抗体的制备 | 第41页 |
| ·重组日本血吸虫Tollip蛋白(rSjTollip)兔多克隆抗体的滴度评价 | 第41页 |
| ·结论及讨论 | 第41-43页 |
| 第4章 重组日本血吸虫Tollip蛋白(rSjTollip)的免疫原性检测 | 第43-47页 |
| ·材料、仪器及试剂 | 第43页 |
| ·仪器 | 第43页 |
| ·试剂与耗材 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-45页 |
| ·Western-blot | 第43-45页 |
| ·结果及讨论 | 第45-47页 |
| 第5章 日本血吸虫Tollip蛋白(SjTollip)基因的虫期转录特异性 | 第47-52页 |
| ·材料、仪器及试剂 | 第47页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·仪器 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-50页 |
| ·日本血吸虫各虫期材料的准备 | 第47-48页 |
| ·日本血吸虫各虫期总RNA的抽提 | 第48页 |
| ·日本血吸虫各虫期总RNA的反转录 | 第48-49页 |
| ·SjTollip基因的虫期转录特异性分析 | 第49-50页 |
| ·结果 | 第50页 |
| ·日本血吸虫各虫期总RNA的定量测定 | 第50页 |
| ·SjTollip基因的虫期转录特异性 | 第50页 |
| ·结论及讨论 | 第50-52页 |
| 第6章 日本血吸虫Tollip蛋白(SjTollip)的虫期表达特异性 | 第52-55页 |
| ·材料、仪器及试剂 | 第52页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·仪器 | 第52页 |
| ·试剂 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-53页 |
| ·各虫期材料的准备 | 第52页 |
| ·各虫期蛋白质的抽提(TRIzol法抽提) | 第52页 |
| ·Western blot检测SjTollip的虫期表达特异性 | 第52-53页 |
| ·结果 | 第53页 |
| ·结论及讨论 | 第53-55页 |
| 第7章 重组日本血吸虫Tollip蛋白(rSjTollip)诊断价值评价 | 第55-57页 |
| ·材料、仪器及试剂 | 第55页 |
| ·材料 | 第55页 |
| ·仪器 | 第55页 |
| ·试剂 | 第55页 |
| ·方法 | 第55-56页 |
| ·间接ELISA法 | 第55-56页 |
| ·结果 | 第56页 |
| ·ELISA反应条件摸索 | 第56页 |
| ·S∫Tollip的诊断价值评价 | 第56页 |
| ·结论及讨论 | 第56-57页 |
| 第8章 重组日本血吸虫Tollip蛋白(SjTollip)的免疫保护性实验 | 第57-60页 |
| ·材料、仪器及试剂 | 第57页 |
| ·材料 | 第57页 |
| ·仪器 | 第57页 |
| ·试剂 | 第57页 |
| ·方法 | 第57-58页 |
| ·分组及免疫方案 | 第57-58页 |
| ·采血方案 | 第58页 |
| ·尾蚴攻击感染 | 第58页 |
| ·成虫、虫卵计数 | 第58页 |
| ·结果 | 第58-59页 |
| ·结论及讨论 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 第二部分 日本血吸虫SSX蛋白(SjSSX)的相关研究 | 第61-77页 |
| 前言 | 第61-62页 |
| 第1章 日本血吸虫SSX蛋白(SjSSX)的生物信息学分析及原核表达纯化 | 第62-68页 |
| ·日本血吸虫SSX蛋白(SjSSX)的生物信息学分析 | 第62-64页 |
| ·生物信息学分析所使用的工具软件 | 第62页 |
| ·软件使用方法 | 第62页 |
| ·结果 | 第62-64页 |
| ·日本血吸虫SSX蛋白(SjSSX)原核表达纯化 | 第64-68页 |
| ·材料、仪器及试剂 | 第64-65页 |
| ·方法 | 第65页 |
| ·结果 | 第65-67页 |
| ·讨论 | 第67-68页 |
| 第2章 重组日本血吸虫SSX蛋白(rSjSSX)兔多克隆抗体制备、滴度评价及免疫原性检测 | 第68-71页 |
| ·重组日本血吸虫SSX蛋白(rSjSSX)兔多克隆抗体制备、滴度评价 | 第68-69页 |
| ·材料、仪器及试剂 | 第68页 |
| ·方法 | 第68页 |
| ·结果及讨论 | 第68-69页 |
| ·重组日本血吸虫SSX蛋白(rSjSSX)的免疫原性检测 | 第69-71页 |
| ·材料、仪器及试剂 | 第69页 |
| ·方法 | 第69页 |
| ·结果及讨论 | 第69-71页 |
| 第3章 日本血吸虫SSX蛋白(SjSSX)基因的虫期转录及表达特异性 | 第71-74页 |
| ·日本血吸虫SSX蛋白(SjSSX)基因的虫期转录特异性 | 第71-72页 |
| ·材料、仪器及试剂 | 第71页 |
| ·方法 | 第71页 |
| ·结果及讨论 | 第71-72页 |
| ·日本血吸虫SSX蛋白(SjSSX)的虫期表达特异性 | 第72-74页 |
| ·材料、仪器及试剂 | 第72页 |
| ·方法 | 第72页 |
| ·结果及讨论 | 第72-74页 |
| 第4章 重组日本血吸虫SSX蛋白(rSjSSX)的诊断价值评价 | 第74-75页 |
| ·材料、仪器及试剂 | 第74页 |
| ·方法 | 第74页 |
| ·结果及讨论 | 第74-75页 |
| ·ELISA反应条件摸索 | 第74页 |
| ·SjSSX的诊断价值评价 | 第74-75页 |
| 第5章 重组日本血吸虫SSX蛋白(rSjSSX)的免疫保护性实验 | 第75-76页 |
| ·材料、仪器及试剂 | 第75页 |
| ·方法 | 第75页 |
| ·结果及讨论 | 第75-76页 |
| 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
