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从种蛋中分离的新城疫病毒抗原性及其F和HN基因的分析

英文缩写注释第1-9页
中文摘要第9-11页
英文摘要第11-13页
引言第13-31页
 1 NDV 的一般生物学特性第13-15页
   ·病毒的分类与理化性质第13页
   ·NDV 的生物学活性第13-14页
   ·NDV 的培养特性第14页
   ·NDV 的致病特性第14-15页
 2 NDV 的基因组与结构蛋白特征第15-22页
   ·NDV 的基因组结构第15-16页
   ·NDV 的结构蛋白特征第16-22页
     ·F 蛋白第16-18页
     ·HN 蛋白第18-20页
     ·M 蛋白第20-21页
     ·NP 蛋白、P 蛋白和L 蛋白第21-22页
 3 NDV 致病的分子基础第22-25页
 4 NDV 的基因分型与分子流行病学第25-29页
 5 新城疫研究存在的问题第29-30页
 6 本研究的目的和意义第30-31页
试验一 鸡新城疫病毒种蛋分离株的分离、鉴定及蚀斑纯化第31-38页
 1 材料与方法第31-34页
   ·材料第31-32页
     ·病料第31页
     ·生物制品及来源第31页
     ·缓冲液第31页
     ·主要试剂及培养基第31页
     ·主要仪器设备第31-32页
   ·方法第32-34页
     ·病料的采集第32页
     ·病毒的分离传代第32页
     ·血凝性试验(HA)和血凝抑制(HI)试验第32-33页
       ·HA 试验第32页
       ·HI 试验第32-33页
     ·病毒的蚀斑纯化第33-34页
       ·鸡胚成纤维细胞的制备第33页
       ·蚀斑纯化第33-34页
       ·挑斑第34页
       ·纯化代次第34页
   ·病毒组织培养半数感染量(TCID_(50))的滴定第34页
 2 结果第34-36页
   ·病毒分离及鉴定第34-35页
   ·HA 及HI 测定第35页
   ·纯化结果第35页
   ·TCID50 的测定第35-36页
 3 讨论第36-38页
   ·NDV 的分离鉴定第36页
   ·蚀斑纯化的重要性第36页
   ·NDV 流行的现状和特点第36-37页
   ·多种禽类感染发病第37页
   ·传统疫苗预防和紧急接种效果不佳第37页
   ·预防新城疫的困惑第37-38页
试验二 新城疫病毒鸡胚分离株和经典毒株抗原性的比较第38-43页
 1 材料与方法第38-39页
   ·材料第38页
     ·病毒第38页
     ·实验动物第38页
   ·方法第38-39页
     ·抗NDV 阳性血清制备第38页
     ·HI 交叉抑制试验第38-39页
       ·HA 效价测定第38-39页
       ·HI 交叉抑制试验第39页
       ·HI 抗原同源性第39页
 2 结果第39-41页
   ·交叉HI 结果第39-40页
   ·HI 抗原同源性第40-41页
 3 讨论第41-43页
   ·抗原变异对HI 效价的影响第41页
   ·多次重复的必要性第41页
   ·新城疫抗原性的变异第41页
   ·对新城疫控制的思考第41-43页
试验三 新城疫病毒鸡胚分离株F 及HN 基因的克隆与序列分析第43-58页
 1 材料与方法第43-51页
   ·材料第43-45页
     ·毒株第43页
     ·菌种、载体、试剂和鸡胚第43页
     ·培养基、相关试剂及配制第43-44页
     ·主要溶液第44页
     ·其他主要试剂第44页
     ·主要仪器设备第44-45页
   ·方法第45-51页
     ·病毒的繁殖和收获第45页
     ·病毒基因组的提取第45-46页
     ·引物设计及RT-PCR 扩增第46-47页
       ·引物设计与合成第46页
       ·RT-PCR第46-47页
     ·PCR 产物的回收与纯化第47-48页
     ·PCR 产物与pMD18-T Vecter 的连接第48页
     ·感受态细胞的制备——氯化钙法第48-49页
     ·连接产物的转化第49页
     ·转化菌的筛选第49-51页
       ·重组质粒的提取第49-50页
       ·重组质粒的 PCR 鉴定第50页
       ·重组质粒的酶切鉴定第50-51页
       ·阳性质粒测序与序列分析第51页
     ·遗传进化树的绘制第51页
 2 结果第51-56页
   ·F 及 HN 基因的 RT-PCR 扩增结果第51页
   ·F 及 HN 基因的克隆及阳性克隆的鉴定第51-52页
   ·F和HN基因核苷酸序列的测定第52页
   ·分离株之间及其与参考毒株 F 和 HN 蛋白氨基酸同源性比较第52-53页
   ·F和HN基因遗传进化树的绘制及基因分型第53-56页
 3 讨论第56-58页
结论第58-59页
参考文献第59-69页
附录第69-70页
致谢第70-71页
个人简介第71-72页
攻读学位期间发表论文情况第72页

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