英文缩写注释 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
引言 | 第13-31页 |
1 NDV 的一般生物学特性 | 第13-15页 |
·病毒的分类与理化性质 | 第13页 |
·NDV 的生物学活性 | 第13-14页 |
·NDV 的培养特性 | 第14页 |
·NDV 的致病特性 | 第14-15页 |
2 NDV 的基因组与结构蛋白特征 | 第15-22页 |
·NDV 的基因组结构 | 第15-16页 |
·NDV 的结构蛋白特征 | 第16-22页 |
·F 蛋白 | 第16-18页 |
·HN 蛋白 | 第18-20页 |
·M 蛋白 | 第20-21页 |
·NP 蛋白、P 蛋白和L 蛋白 | 第21-22页 |
3 NDV 致病的分子基础 | 第22-25页 |
4 NDV 的基因分型与分子流行病学 | 第25-29页 |
5 新城疫研究存在的问题 | 第29-30页 |
6 本研究的目的和意义 | 第30-31页 |
试验一 鸡新城疫病毒种蛋分离株的分离、鉴定及蚀斑纯化 | 第31-38页 |
1 材料与方法 | 第31-34页 |
·材料 | 第31-32页 |
·病料 | 第31页 |
·生物制品及来源 | 第31页 |
·缓冲液 | 第31页 |
·主要试剂及培养基 | 第31页 |
·主要仪器设备 | 第31-32页 |
·方法 | 第32-34页 |
·病料的采集 | 第32页 |
·病毒的分离传代 | 第32页 |
·血凝性试验(HA)和血凝抑制(HI)试验 | 第32-33页 |
·HA 试验 | 第32页 |
·HI 试验 | 第32-33页 |
·病毒的蚀斑纯化 | 第33-34页 |
·鸡胚成纤维细胞的制备 | 第33页 |
·蚀斑纯化 | 第33-34页 |
·挑斑 | 第34页 |
·纯化代次 | 第34页 |
·病毒组织培养半数感染量(TCID_(50))的滴定 | 第34页 |
2 结果 | 第34-36页 |
·病毒分离及鉴定 | 第34-35页 |
·HA 及HI 测定 | 第35页 |
·纯化结果 | 第35页 |
·TCID50 的测定 | 第35-36页 |
3 讨论 | 第36-38页 |
·NDV 的分离鉴定 | 第36页 |
·蚀斑纯化的重要性 | 第36页 |
·NDV 流行的现状和特点 | 第36-37页 |
·多种禽类感染发病 | 第37页 |
·传统疫苗预防和紧急接种效果不佳 | 第37页 |
·预防新城疫的困惑 | 第37-38页 |
试验二 新城疫病毒鸡胚分离株和经典毒株抗原性的比较 | 第38-43页 |
1 材料与方法 | 第38-39页 |
·材料 | 第38页 |
·病毒 | 第38页 |
·实验动物 | 第38页 |
·方法 | 第38-39页 |
·抗NDV 阳性血清制备 | 第38页 |
·HI 交叉抑制试验 | 第38-39页 |
·HA 效价测定 | 第38-39页 |
·HI 交叉抑制试验 | 第39页 |
·HI 抗原同源性 | 第39页 |
2 结果 | 第39-41页 |
·交叉HI 结果 | 第39-40页 |
·HI 抗原同源性 | 第40-41页 |
3 讨论 | 第41-43页 |
·抗原变异对HI 效价的影响 | 第41页 |
·多次重复的必要性 | 第41页 |
·新城疫抗原性的变异 | 第41页 |
·对新城疫控制的思考 | 第41-43页 |
试验三 新城疫病毒鸡胚分离株F 及HN 基因的克隆与序列分析 | 第43-58页 |
1 材料与方法 | 第43-51页 |
·材料 | 第43-45页 |
·毒株 | 第43页 |
·菌种、载体、试剂和鸡胚 | 第43页 |
·培养基、相关试剂及配制 | 第43-44页 |
·主要溶液 | 第44页 |
·其他主要试剂 | 第44页 |
·主要仪器设备 | 第44-45页 |
·方法 | 第45-51页 |
·病毒的繁殖和收获 | 第45页 |
·病毒基因组的提取 | 第45-46页 |
·引物设计及RT-PCR 扩增 | 第46-47页 |
·引物设计与合成 | 第46页 |
·RT-PCR | 第46-47页 |
·PCR 产物的回收与纯化 | 第47-48页 |
·PCR 产物与pMD18-T Vecter 的连接 | 第48页 |
·感受态细胞的制备——氯化钙法 | 第48-49页 |
·连接产物的转化 | 第49页 |
·转化菌的筛选 | 第49-51页 |
·重组质粒的提取 | 第49-50页 |
·重组质粒的 PCR 鉴定 | 第50页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第50-51页 |
·阳性质粒测序与序列分析 | 第51页 |
·遗传进化树的绘制 | 第51页 |
2 结果 | 第51-56页 |
·F 及 HN 基因的 RT-PCR 扩增结果 | 第51页 |
·F 及 HN 基因的克隆及阳性克隆的鉴定 | 第51-52页 |
·F和HN基因核苷酸序列的测定 | 第52页 |
·分离株之间及其与参考毒株 F 和 HN 蛋白氨基酸同源性比较 | 第52-53页 |
·F和HN基因遗传进化树的绘制及基因分型 | 第53-56页 |
3 讨论 | 第56-58页 |
结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-69页 |
附录 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
个人简介 | 第71-72页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第72页 |