摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-29页 |
·酵母双杂交系统 | 第13-20页 |
·酵母双杂交系统的原理 | 第13-15页 |
·酵母双杂交系统的类型 | 第15-16页 |
·酵母双杂交系统的优势和局限性 | 第16页 |
·酵母双杂交系统的应用 | 第16-18页 |
·双杂交的其他形式 | 第18-20页 |
·酵母双杂交系统的未来展望 | 第20页 |
·噬菌体展示技术 | 第20-24页 |
·噬菌体展示技术的基本原理 | 第21页 |
·噬菌体展示技术的类型 | 第21-23页 |
·噬菌体展示技术的局限性 | 第23页 |
·噬菌体展示技术的应用 | 第23-24页 |
·噬菌体展示技术展望 | 第24页 |
·蛋白激发子 | 第24-27页 |
·过敏蛋白(Harpin) | 第25-26页 |
·隐地蛋白(Cryptogein) | 第26页 |
·激活蛋白(Activator) | 第26-27页 |
·研究目的和意义 | 第27-29页 |
第二章 利用酵母双杂交LEXA 系统筛选PEMG1 的互作蛋白 | 第29-50页 |
·实验材料 | 第30-33页 |
·LexA 系统 | 第30页 |
·主要试剂及配制 | 第30-32页 |
·常规仪器 | 第32-33页 |
·实验方法 | 第33-44页 |
·载体构建重组诱饵载体pLexA- pemG1 | 第33-37页 |
·诱饵载体pLexA- pemG1 的自激活检测 | 第37-38页 |
·互作蛋白的筛选 | 第38-39页 |
·阳性克隆分离 | 第39-43页 |
·假阳性排除 | 第43页 |
·序列比对 | 第43-44页 |
·结果与讨论 | 第44-50页 |
·载体构建 | 第44页 |
·自激活检测 | 第44-45页 |
·转化效率 | 第45页 |
·文库共转化子的筛选 | 第45-47页 |
·假阳性排除 | 第47-48页 |
·阳性克隆的测序比对分析 | 第48-50页 |
第三章 利用酵母双杂交GAL4 系统筛选PEMG1 的互作蛋白 | 第50-61页 |
·实验材料 | 第51-52页 |
·GAL4 系统 | 第51页 |
·主要试剂 | 第51-52页 |
·常规仪器 | 第52页 |
·实验方法 | 第52-56页 |
·诱饵载体构建和自激活检测 | 第52页 |
·水稻双链cDNA 的合成 | 第52-54页 |
·共转化筛选 | 第54-56页 |
·结果与讨论 | 第56-61页 |
·载体构建和自激活检测 | 第56-57页 |
·水稻总RNA 的提取 | 第57页 |
·双链cDNA 合成和文库构建 | 第57-59页 |
·共转化筛选阳性克隆 | 第59页 |
·阳性克隆的测序比对分析 | 第59-60页 |
·酵母双杂交GAL4 系统优势 | 第60-61页 |
第四章 噬菌体展示技术筛选PEMG1 的结合多肽 | 第61-65页 |
·实验材料 | 第61-62页 |
·实验材料 | 第61页 |
·主要试剂 | 第61页 |
·常规仪器 | 第61-62页 |
·实验方法 | 第62-63页 |
·制备感受态细胞 | 第62页 |
·亲和淘洗 | 第62页 |
·噬菌体的滴定、扩增和纯化 | 第62-63页 |
·ELISA 反应 | 第63页 |
·结果与讨论 | 第63-65页 |
第五章 互作蛋白的结构功能分析 | 第65-67页 |
·跨膜结构的分析 | 第65页 |
·蛋白DNAJ 分析 | 第65-66页 |
·稻瘟菌激活蛋白的分子功能机制 | 第66-67页 |
第六章 全文结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
作者简历 | 第75页 |