| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 引言 | 第10-19页 |
| ·干扰素研究概述 | 第10-13页 |
| ·干扰素的分类 | 第10页 |
| ·干扰素的产生机理 | 第10-11页 |
| ·干扰素的基本特性 | 第11页 |
| ·干扰素的生物学特性 | 第11-12页 |
| ·干扰素的生物学活性及作用机理 | 第12-13页 |
| ·腺病毒载体概述 | 第13-16页 |
| ·腺病毒基本结构及感染机理 | 第13页 |
| ·腺病毒载体的构建基础及构建方法 | 第13-14页 |
| ·腺病毒载体的发展过程 | 第14-15页 |
| ·腺病毒载体的优点 | 第15页 |
| ·腺病毒载体的应用 | 第15-16页 |
| ·腺病毒载体的缺点 | 第16页 |
| ·腺病毒载体的改良对策 | 第16页 |
| ·犬干扰素的基因工程 | 第16-17页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
| ·研究目标 | 第18-19页 |
| 2 实验一 重组犬IFN-γ在HEK293T细胞中的表达 | 第19-34页 |
| ·材料 | 第19-23页 |
| ·试验动物 | 第19页 |
| ·载体、菌株及细胞株 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·试验所用溶液及其配制 | 第19-22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| ·方法 | 第23-29页 |
| ·犬脾淋巴细胞总RNA的提取 | 第23页 |
| ·犬IFN-γ基因的扩增 | 第23-25页 |
| ·克隆、表达载体pcDNA3.1A-CaIFN-γ和pcDNA3.1A-CaIFN-γ-STOP的构建 | 第25-27页 |
| ·犬IFN-γ蛋白的表达与鉴定 | 第27-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-31页 |
| ·犬IFN-γ基因的扩增结果 | 第29-30页 |
| ·真核表达载体pcDNA3.1A-CaIFN-γ和pcDNA3.1A-CaIFN-γ-STOP的构建 | 第30-31页 |
| ·犬IFN-γ基因测序结果 | 第31页 |
| ·犬IFN-γ在HEK293T细胞中表达 | 第31页 |
| ·讨论 | 第31-34页 |
| 3 实验二 重组犬IFN-γ腺病毒载体的构建 | 第34-45页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·载体、菌株及细胞株 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·试验所用溶液及其配制 | 第34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-40页 |
| ·构建穿梭质粒pShuttle3/gfp-CaIFN-γ | 第34-35页 |
| ·重组腺病毒质粒pAd-CaIFN-γ的构建 | 第35-37页 |
| ·再生犬IFN-γ的重组腺病毒 | 第37-39页 |
| ·重组犬IFN-γ腺病毒的鉴定 | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-42页 |
| ·穿梭质粒pShu3/gfp-CaIFN-γ的构建 | 第40页 |
| ·重组腺病毒质粒pAd-CaIFN-γ的构建 | 第40-41页 |
| ·犬IFN-γ重组腺病毒的再生与鉴定 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-45页 |
| 4 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 附录1 重组pcDNA3.1A-CaIFN-γ质粒测序报告图 | 第50-51页 |
| 附录2 重组pcDNA3.1A-CaIFN-γ-STOP质粒测序报告图 | 第51-52页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
