| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-22页 |
| ·骨骼肌卫星细胞 | 第11-12页 |
| ·骨骼肌卫星细胞的发生 | 第11页 |
| ·骨骼肌卫星细胞培养 | 第11-12页 |
| ·SMADS 基因家族 | 第12-14页 |
| ·Smads 基因家族的结构特点与功能 | 第12-13页 |
| ·Smad3 基因结构与功能 | 第13-14页 |
| ·生肌调节因子家族 | 第14-15页 |
| ·MyoD 基因家族的结构特点与功能 | 第14-15页 |
| ·MyoD 基因结构与功能 | 第15页 |
| ·GDF-8 基因的结构与功能 | 第15-16页 |
| ·RNA 干涉技术 | 第16-20页 |
| ·RNA 干涉技术的发展 | 第16-17页 |
| ·RNAi 的一般机制 | 第17-18页 |
| ·siRNA 的设计原则 | 第18页 |
| ·设计阴性对照 | 第18页 |
| ·siRNA 的制备方法 | 第18-19页 |
| ·siRNA 的转染 | 第19页 |
| ·RNAi 效果检测 | 第19页 |
| ·RNAi 技术的应用前景 | 第19-20页 |
| ·基因过量表达技术 | 第20-21页 |
| ·基因调控网络 | 第21页 |
| ·本研究目的与意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-37页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·主要仪器设备 | 第22页 |
| ·主要药品、试剂及配制 | 第22-23页 |
| ·主要分析软件 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-37页 |
| ·引物的设计与合成 | 第23-24页 |
| ·骨骼肌卫星细胞体外培养体系的建立 | 第24-26页 |
| ·RNA 干扰 | 第26-34页 |
| ·Smad3 基因过量表达 | 第34-36页 |
| ·数据的统计分析 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-73页 |
| ·骨骼肌卫星细胞体系的建立 | 第37-42页 |
| ·骨骼肌卫星细胞的分离、培养 | 第37-40页 |
| ·骨骼肌卫星细胞的增殖 | 第40-41页 |
| ·核型分析 | 第41-42页 |
| ·SMAD3、MYOD 与GDF-8 在不同世代表达规律 | 第42-44页 |
| ·RNA 的提取 | 第42页 |
| ·Smad3 基因在细胞不同世代表达规律的研究 | 第42-43页 |
| ·MyoD 基因在细胞不同世代表达规律的研究 | 第43-44页 |
| ·GDF-8 基因在不同世代的表达规律 | 第44页 |
| ·SMAD3、MYOD 与GDF-8 基因的RNAI 研究 | 第44-64页 |
| ·Smad3 基因的RNAi 研究 | 第44-52页 |
| ·MyoD 基因的RNAi 研究 | 第52-58页 |
| ·GDF-8 基因的RNAi 研究 | 第58-64页 |
| ·猪骨骼肌卫星细胞增殖转录调节因子SMAD3 基因的过量表达研究 | 第64-71页 |
| ·Smad3 基因真核表达载体的构建 | 第64-66页 |
| ·Smad3 基因过量表达效果检测 | 第66-68页 |
| ·过量表达Smad3 基因对细胞增殖的影响 | 第68-69页 |
| ·Smad3 基因表达上调后GDF-8 和MyoD 基因的表达情况 | 第69-71页 |
| ·SMAD3、MYOD 与GDF-8 基因互作分析及调控网络关系 | 第71-73页 |
| 4 讨论 | 第73-79页 |
| ·骨骼肌卫星细胞的体外培养 | 第73-74页 |
| ·骨骼肌卫星细胞体外培养的增殖特性 | 第73页 |
| ·骨骼肌卫星细胞生长曲线的绘制及核型分析 | 第73-74页 |
| ·SHRNA 的设计与筛选 | 第74页 |
| ·转染效率的影响因素 | 第74-76页 |
| ·SMAD3、MYOD 与GDF-8 基因对猪骨骼肌卫星细胞增殖的影响 | 第76-77页 |
| ·干扰Smad3、MyoD 与GDF-8 基因对猪骨骼肌卫星细胞增殖的影响 | 第76-77页 |
| ·过量表达Smad3 基因对猪骨骼肌卫星细胞增殖的影响 | 第77页 |
| ·SMAD3、MYOD 与GDF-8 基因在猪骨骼肌卫星细胞增殖过程中的调控网络关系 | 第77-79页 |
| 5 结论 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-85页 |
| 附录 | 第85-87页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第87页 |
