| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第1章 前言 | 第9-18页 |
| ·植物无融合生殖 | 第9-11页 |
| ·植物无融合生殖的概念及分类 | 第9-10页 |
| ·植物无融合生殖的重要意义 | 第10页 |
| ·无融合生殖的研究进展 | 第10页 |
| ·无融合生殖甜菜单体附加系M14 品系 | 第10-11页 |
| ·cDNA 末端快速扩增技术 | 第11-16页 |
| ·RACE 技术的基本原理和方法 | 第11-13页 |
| ·RACE 技术的优化与改良 | 第13-14页 |
| ·SMART RACE | 第14-15页 |
| ·“电子”基因克隆 | 第15-16页 |
| ·生物信息学应用概述 | 第16页 |
| ·本实验的内容及目的 | 第16-17页 |
| ·实验技术路线 | 第17-18页 |
| 第2章 材料与方法 | 第18-28页 |
| ·实验材料 | 第18-20页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·候选ESTs | 第18页 |
| ·试剂盒与菌株 | 第18页 |
| ·药品 | 第18页 |
| ·引物 | 第18-20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-28页 |
| ·甜菜M14 品系花器总RNA 的提取及检测 | 第20-21页 |
| ·甜菜M14 品系花器总RNA 的反转录 | 第21页 |
| ·RACE 法克隆基因M14-100 cDNA 末端 | 第21-24页 |
| ·RACE 法克隆基因M14-265 cDNA 末端 | 第24页 |
| ·RACE 法克隆基因M14-G12 cDNA 末端 | 第24-25页 |
| ·目的基因cDNA 全长序列的拼接 | 第25页 |
| ·目的基因cDNA 全长序列的RT-PCR 验证 | 第25页 |
| ·目的基因cDNA 全长序列的生物信息学分析 | 第25-28页 |
| 第3章 结果与分析 | 第28-50页 |
| ·甜菜M14 品系花器总RNA 的提取及检测 | 第28页 |
| ·总RNA 的定量 | 第28页 |
| ·总RNA 完整性检测 | 第28页 |
| ·RACE 法克隆基因M14-100 cDNA 末端 | 第28-30页 |
| ·3′RACE 克隆基因M14-100 cDNA 3′末端 | 第28-29页 |
| ·5′RACE 克隆基因M14-100 cDNA 5′末端 | 第29页 |
| ·目的片段的转化与重组体的筛选 | 第29-30页 |
| ·目的片段的测序 | 第30页 |
| ·RACE 法克隆基因M14-265 cDNA 末端 | 第30-31页 |
| ·3′RACE 克隆基因M14-265 cDNA 3′末端 | 第30页 |
| ·5′RACE 克隆基因M14-265 cDNA 5′末端 | 第30-31页 |
| ·目的片段的转化与重组体的筛选 | 第31页 |
| ·目的片段的测序 | 第31页 |
| ·RACE 法克隆基因M14-G12 cDNA 末端 | 第31-33页 |
| ·3′RACE 克隆基因M14-G12 cDNA 3′末端 | 第31-32页 |
| ·5′RACE 克隆基因M14-G12 cDNA 5′末端 | 第32页 |
| ·目的片段的转化与重组体的筛选 | 第32页 |
| ·目的片段的测序 | 第32-33页 |
| ·目的基因cDNA 全长序列的拼接 | 第33-34页 |
| ·目的基因cDNA 全长序列的RT-PCR 验证 | 第34-35页 |
| ·目的基因的生物信息学分析 | 第35-50页 |
| ·基因M14-100 的生物信息学分析 | 第35-40页 |
| ·基因M14-265 的生物信息学分析 | 第40-45页 |
| ·基因M14-G12 的生物信息学分析 | 第45-50页 |
| 第4章 讨论 | 第50-54页 |
| ·RACE 技术中常见的问题及改进方法 | 第50页 |
| ·关于M14-G12 基因 | 第50-51页 |
| ·关于M14-265 基因 | 第51-53页 |
| ·M14-265 可能是类似于mRNA 的非编码RNA | 第51-52页 |
| ·M14-265 可能是短可读框编码RNA | 第52-53页 |
| ·后续思路 | 第53-54页 |
| ·对M14-100 基因的后续工作思路 | 第53页 |
| ·对M14-265 基因的后续工作思路 | 第53页 |
| ·对M14-G12 基因的后续工作思路 | 第53-54页 |
| 第5章 结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 附录 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-64页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第64-65页 |
