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电化学传感检测转基因水稻“汕优63”技术研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
第一章 绪论第17-29页
    1.1 转基因作物概述第17-20页
        1.1.1 转基因作物发展背景及现状第17页
        1.1.2 转基因的安全性争议及相关法规第17-18页
        1.1.3 转基因水稻Bt汕优63第18-20页
    1.2 转基因作物当前检测方法第20-21页
        1.2.1 基于蛋白质的转基因作物检测第20页
        1.2.2 基于DNA的转基因作物检测第20-21页
    1.3 电化学DNA生物传感器第21-25页
        1.3.1 生物传感器作用的原理第21页
        1.3.2 电化学生物传感元件第21-23页
        1.3.3 探针固定方式第23-24页
        1.3.4 杂交指示剂及检测方法第24-25页
    1.4 电化学DNA传感器应用于转基因食品检测第25-26页
    1.5 本论文研究内容及意义第26-29页
第二章 建立并应用电化学DNA传感器定量检测转基因水稻“汕优63”特异序列第29-43页
    2.1 引言第29页
    2.2 实验材料及原理第29-31页
        2.2.1 主要实验材料第29-30页
        2.2.2 主要实验仪器第30页
        2.2.3 检测原理第30-31页
    2.3 实验方法第31-35页
        2.3.1 试剂配制第31-32页
        2.3.2 丝网印刷电极预处理第32-34页
        2.3.3 探针预处理及在电极表面的自组装第34页
        2.3.4 与目标序列杂交反应第34页
        2.3.5 MB的附着及电化学检测第34-35页
    2.4 结论与分析第35-42页
        2.4.1 电极不同处理后的电化学特性第35-36页
        2.4.2 电化学检测过程条件优化第36-39页
        2.4.3 电化学传感器的选择性第39-40页
        2.4.4 电化学传感器的检测范围及检测限第40-42页
    2.5 本章小结第42-43页
第三章 电化学结合传统PCR方法检测水稻及大米实际样品第43-59页
    3.1 引言第43页
    3.2 实验材料及原理第43-45页
        3.2.1 主要实验材料第43-44页
        3.2.2 主要实验仪器第44-45页
    3.3 实验方法第45-47页
        3.3.1 DNA的提取第45-46页
        3.3.2 DNA纯度鉴定第46页
        3.3.3 Touchdown PCR第46页
        3.3.4 琼脂糖凝胶电泳第46-47页
        3.3.5 丝网印刷电极的预处理第47页
        3.3.6 探针预处理及在电极表面的自组装第47页
        3.3.7 与目标序列杂交反应第47页
        3.3.8 电化学指示剂MB的附着及电化学测定第47页
    3.4 结论与分析第47-56页
        3.4.1 合成的目标DNA的PCR及电泳结果第47-48页
        3.4.2 “汕优63”转基因水稻叶片粉末的检测第48-50页
        3.4.3 大米样品的DNA提取结果及纯度鉴定第50-52页
        3.4.4 阳性大米样品梯度稀释PCR及电化学检测结果第52-53页
        3.4.5 不同阳性掺比大米样品PCR及电化学检测结果第53-55页
        3.4.6 市场上大米样品抽检PCR及电化学检测结果第55-56页
    3.5 本章小结第56-59页
第四章 基于金-还原氧化石墨烯修饰的电化学DNA传感器定量检测转基因水稻“汕优63”特异序列第59-75页
    4.1 引言第59页
    4.2 实验材料及原理第59-61页
        4.2.1 主要实验材料第59-60页
        4.2.2 主要实验仪器第60页
        4.2.3 检测原理第60-61页
    4.3 实验方法第61-64页
        4.3.1 制备氧化石墨烯(GO)第61-62页
        4.3.2 制备还原氧化石墨烯(RGO)第62-63页
        4.3.3 制备Au-RGO纳米复合物第63页
        4.3.4 制备表面修饰电极第63页
        4.3.5 DNA提取、鉴定及扩增第63页
        4.3.6 电极表面性质的电化学表征第63页
        4.3.7 探针预处理及在电极表面的自组装第63-64页
        4.3.8 与目标序列杂交反应第64页
        4.3.9 MB的附着及电化学检测第64页
    4.4 结论与分析第64-74页
        4.4.1 氧化石墨烯、石墨烯、Au-RGO复合物的表征第64-66页
        4.4.2 修饰电极的电化学特性第66-67页
        4.4.3 电化学检测实验条件优化第67-70页
        4.4.4 电化学传感器的检测范围及检测限第70-72页
        4.4.5 电化学传感器的重现性及稳定性第72-73页
        4.4.6 大米样品的检测第73-74页
    4.5 本章小结第74-75页
第五章 结论与展望第75-77页
参考文献第77-83页
致谢第83-85页
研究成果及发表的学术论文第85-87页
作者和导师简介第87-89页
附件第89-90页

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