| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第15-27页 |
| 1.1 类弹性蛋白 | 第15-18页 |
| 1.1.1 类弹性蛋白的概述 | 第15页 |
| 1.1.2 类弹性蛋白的相变特性 | 第15-16页 |
| 1.1.3 类弹性蛋白的应用 | 第16-18页 |
| 1.2 类胶原蛋白 | 第18-20页 |
| 1.2.1 类胶原蛋白的概述 | 第18页 |
| 1.2.2 类胶原蛋白的结构 | 第18-19页 |
| 1.2.3 胶原蛋白的应用 | 第19-20页 |
| 1.3 D-氨基酸氧化酶 | 第20-22页 |
| 1.3.1 D-氨基酸氧化酶的概述 | 第20-21页 |
| 1.3.2 D-氨基酸氧化酶的催化机理 | 第21页 |
| 1.3.3 D-氨基酸氧化酶的酶活测定方法 | 第21页 |
| 1.3.4 D-氨基酸氧化酶的功能 | 第21-22页 |
| 1.4 超氧化物歧化酶 | 第22-24页 |
| 1.4.1 超氧化物歧化酶的介绍 | 第22页 |
| 1.4.2 超氧化物歧化酶反应机理 | 第22-23页 |
| 1.4.3 SOD的酶活测定 | 第23页 |
| 1.4.4 超氧化物歧化酶的应用 | 第23-24页 |
| 1.5 过氧化氢酶 | 第24-26页 |
| 1.5.1 过氧化氢酶概述 | 第24页 |
| 1.5.2 过氧化氢酶催化机理 | 第24-25页 |
| 1.5.3 CAT的酶活测定方法 | 第25页 |
| 1.5.4 CAT的功能 | 第25-26页 |
| 1.6 课题意义 | 第26-27页 |
| 第二章 两亲性复合蛋白用于修饰D-氨基酸氧化酶 | 第27-53页 |
| 2.1 引言 | 第27页 |
| 2.2 实验材料 | 第27-28页 |
| 2.2.1 所用菌株和质粒 | 第27页 |
| 2.2.2 常用溶液的配制方法 | 第27-28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28-38页 |
| 2.3.1 pET28a-DAAO-CLP_1-ELP_6和pET28a-DAAO-CLP_3-ELP_6克隆载体的构建 | 第28-31页 |
| 2.3.2 pET28a-DAAO-CLP_1-ELP_6和pET28a-DAAO-CLP_3-ELP_6表达载体的构建 | 第31-32页 |
| 2.3.3 融合蛋白DAAO-CLP_1-ELP_6和DAAO-CLP_3-ELP_6表达 | 第32-33页 |
| 2.3.4 融合蛋白的纯化及浓度测定 | 第33-34页 |
| 2.3.5 DAAO-CLP_1-ELP_6和DAAO-CLP_3-ELP_6结构表征 | 第34-36页 |
| 2.3.6 融合蛋白DAAO-CLP_1-ELP_6和DAAO-CLP_3-ELP_6酶活测定 | 第36-38页 |
| 2.4 结果及分析 | 第38-51页 |
| 2.4.1 构建pET28a-DAAO-CLP_1-ELP_6和pET28a-DAAO-CLP_3-ELP_6克隆载体 | 第38-39页 |
| 2.4.2 融合蛋白的DAAO-CLP_1-ELP_6和DAAO-CLP_3-ELP_6表达 | 第39-40页 |
| 2.4.3 融合蛋白的的纯化及浓度测定 | 第40-42页 |
| 2.4.4 融合蛋白结构表征 | 第42-48页 |
| 2.4.5 酶活结果及分析 | 第48-51页 |
| 2.5 本章小结 | 第51-53页 |
| 第三章 两亲性复合蛋白用于修饰超氧化物歧化酶 | 第53-71页 |
| 3.1 引言 | 第53页 |
| 3.2 实验材料 | 第53页 |
| 3.2.1 所用质粒片段 | 第53页 |
| 3.2.2 常用溶液的配制方法 | 第53页 |
| 3.3 实验方法 | 第53-58页 |
| 3.3.1 pET28a-SOD-CLP_1-ELP_6和pET28a-SOD-CLP_3-ELP_6克隆载体的构建 | 第53-55页 |
| 3.3.2 pET28a-SOD-CLP_1-ELP_6和pET28a-SOD-CLP_3-ELP_6表达载体的构建 | 第55页 |
| 3.3.3 SOD-CLP_1-ELP_6和SOD-CLP_3-ELP_6的表达 | 第55-56页 |
| 3.3.4 融合蛋白的纯化及浓度测定 | 第56页 |
| 3.3.5 融合蛋白结构表征 | 第56-57页 |
| 3.3.6 融合蛋白酶活测定 | 第57-58页 |
| 3.4 结果讨论 | 第58-69页 |
| 3.4.1 构建pET28a-SOD-CLP_1-ELP_6和pET28a-SOD-CLP_3-ELP_6克隆载体 | 第58-59页 |
| 3.4.2 融合蛋白SOD-CLP_1-ELP_6和SOD-CLP_3-ELP_6的表达 | 第59-60页 |
| 3.4.3 融合蛋白的纯化及浓度测定 | 第60-61页 |
| 3.4.4 融合蛋白的结构表征 | 第61-67页 |
| 3.4.5 融合蛋白酶活测定及分析 | 第67-69页 |
| 3.5 本章小结 | 第69-71页 |
| 第四章 双酶体系的建立 | 第71-85页 |
| 4.1 引言 | 第71-72页 |
| 4.2 实验材料 | 第72页 |
| 4.2.1 所用质粒片段 | 第72页 |
| 4.2.2 PCR常用试剂 | 第72页 |
| 4.2.3 所用溶液配制 | 第72页 |
| 4.3 实验方法 | 第72-77页 |
| 4.3.1 pET28a-CAT-CLP_1-ELP_6和pET28a-CAT-CLP_3-ELP_6克隆载体的构建 | 第73-75页 |
| 4.3.2 pET28a-CAT-CLP_1-ELP_6和pET28a-CAT-CLP_3-ELP_6表达载体的构建 | 第75-76页 |
| 4.3.3 融合蛋白CAT-CLP_1-ELP_6和CAT-CLP_3-ELP_6的表达 | 第76页 |
| 4.3.4 融合蛋白纯化及浓度测定 | 第76页 |
| 4.3.5 双酶体系的建立 | 第76-77页 |
| 4.4 结果及分析 | 第77-84页 |
| 4.4.1 构建pET28a-CAT-CLP_1-ELP_6和pET28a-CAT-CLP_3-ELP_6克隆载体 | 第77-78页 |
| 4.4.2 融合蛋白CAT-CLP_1-ELP_6的表达 | 第78-79页 |
| 4.4.3 融合蛋白的纯化及浓度测定 | 第79-80页 |
| 4.4.4 融合蛋白CAT-CLP_1-ELP_6的二级结构测定 | 第80-81页 |
| 4.4.5 双酶体系酶活的建立 | 第81-84页 |
| 4.5 本章小结 | 第84-85页 |
| 第五章 结论与展望 | 第85-87页 |
| 5.1 结论 | 第85-86页 |
| 5.2 展望 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-91页 |
| 附录 | 第91-93页 |
| 致谢 | 第93-95页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第95-97页 |
| 作者及导师介绍 | 第97-99页 |
| 附件 | 第99-100页 |
